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一种适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒及工程菌的制作方法

来源：花匠小妙招时间：2025-10-21 20:06

技术特征：

1.一种适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒，其特征在于：包括序列8的线性片段。

2.根据权利要求1所述的适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒，其特征在于：所述质粒以16SrDNA的序列作为同源臂，同源臂之间为卡那抗性筛选标记基因、P43启动子、多克隆位点、终止序列。

3.根据权利要求1所述的适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒，其特征在于：所述序列8的线性片段连接在质粒pMD18Tsimple-16SrDNA的pstI酶切位点。

4.一种芽孢杆菌工程菌，其特征在于：利用权利要求1-3所述的质粒构建得到。

5.一株嗜碱芽孢杆菌工程菌，其特征在于：利用权利要求1-3所述的质粒，将多拷贝目的基因apr4M整合到染色体16SrDNA上的工程菌。

技术总结
本发明涉及一种适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒及工程菌，包括序列8的线性片段。所述质粒以16SrDNA的序列作为同源臂，同源臂之间为卡那抗性筛选标记基因、P43启动子、多克隆位点、终止序列。本发明的质粒可以将各种目的基因整合在芽孢杆菌属各种菌上，并可以获得含有不同拷贝数目的基因的转化子，实现目的基因在芽孢杆菌属的稳定高效表达。此外，我们利用此质粒构建了pKD314-apr4M重组质粒，并且通过同源重组方法获得了含有不同拷贝数稳定高产的工程菌。

技术研发人员：路福平;田耀;张会图;王克鼎;
受保护的技术使用者：天津科技大学;
技术研发日：2013.06.27
技术公布日：2013.09.11 发布类型：FMZL主分类号：C12N15/75(2006.01)分类号： C12N15/75(2006.01); C12N1/21(2006.01); C12R1/07(2006.01); 申请权利人：天津科技大学