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一种草本酵素杀虫剂及其制备方法和应用与流程

来源：花匠小妙招时间：2025-10-14 03:06

本发明属于农药技术领域，涉及草本酵素在农作物病虫害的防治应用技术领域，更具体的，涉及一种草本酵素杀虫剂及其制备方法和应用。

背景技术：

杀虫剂主要是指防治农业、林业害虫以及城市卫生害虫的药品。杀虫剂的使用历史久远，品种繁多，且用量巨大。从二十世纪开始，随着我国农业的迅速发展，农作物病虫害成为我国农业主要灾害之一，而杀虫剂的使用使得农业产量大幅升高，因此，杀虫剂逐渐成为在农业生产过程中必不可少的产品之一，而且用量呈快速增长趋势。

大量使用化学杀虫剂所造成的危害也日益显现，具体包括，农业生产成本高，药效时间短，耐药性强，残留范围广等；此外，化学杀虫剂也时刻危及人类和动物的生命安全，全国各地杀虫剂中毒事件时有发生。

随着人们对食品安全意识的增强以及环境安全的迫切需要，全社会尤其是农、林、牧业生产者急需一种高效、低毒且环境友好的杀虫剂。

技术实现要素：

针对现有技术的不足，本发明提供了一种以天然中草药为原料、经菌种发酵而制成的具有杀虫效果好、低毒、无公害的草本酵素杀虫剂。

本发明的另一目的是提供该草本酵素杀虫剂的制备方法。

本发明的又一目的是提供该草本酵素杀虫剂的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种草本酵素杀虫剂，其活性成分由草本中药经提取后接种复合菌发酵而成。

所述草本中药包括：苦参、百部、川楝子和使君子。

所述复合菌包括：博伊丁假丝酵母、布氏乳杆菌和塞内加尔醋酸菌。

其中，苦参，苦，寒，归心、肝、胃、大肠、膀胱经，清热燥湿，利尿，杀虫，宁心止悸，用于湿热泻痢，便血，黄疸尿赤，淋证涩痛，小便不利，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风，心悸不宁。

其中，百部，味甘，苦，性微温，归肺经，润肺下气止咳，杀虫灭虱，用于新久咳嗽，肺痨咳嗽，顿咳，外用于头虱，体虱，蛲虫病，阴痒，蜜百部润肺止咳，用于阴虚劳嗽。

其中，川楝子，苦，寒，归肝，小肠，膀胱经，疏肝泄热，行气止痛，杀虫，用于肝郁化火，胸胁，脘腹胀痛，疝气疼痛，虫积腹痛。

其中，使君子，甘，温，归脾、胃经，杀虫消积，用于蛔虫病，蛲虫病，虫积腹痛，小儿疳积。

在上述技术方案中，所述草本中药由以下重量份的原料组成：

苦参80-150份、百部80-150份、川楝子50-100份和使君子50-100份。

在上述技术方案中，在所述复合菌中，博伊丁假丝酵母、布氏乳杆菌和塞内加尔醋酸菌的活菌数比例为(5-7.5)：(1-1.5)：(1-1.5)。

优选地，在上述技术方案中，所述复合菌以菌剂的形式提供，由含有活菌数5×107-7.5×107cfu/g的博伊丁假丝酵母菌剂0.8-1.2份、含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的布氏乳杆菌菌剂0.8-1.2份和含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的塞内加尔醋酸菌菌剂0.8-1.2份组成。

在上述技术方案中，所述复合菌剂的加入量为所述草本中药总量的0.1-1wt％。

进一步地，在上述技术方案中，所述草本中药由以下重量份的原料组成：

苦参96-135份、百部112-142份、川楝子65-88份和使君子58-95份；

所述复合菌以菌剂的形式提供，由含有活菌数5×107-7.5×107cfu/g的博伊丁假丝酵母菌剂0.89-1.08份、含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的布氏乳杆菌菌剂0.83-1.02份和含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的塞内加尔醋酸菌菌剂0.94-1.15份组成，所述复合菌剂的加入量为所述草本中药总量的0.4-0.9wt％。

再进一步地，在上述技术方案中，所述草本中药由以下重量份的原料组成：

苦参102-128份、百部118-135份、川楝子68-82份和使君子62-88份；

所述复合菌以菌剂的形式提供，由含有活菌数5×107-7.5×107cfu/g的博伊丁假丝酵母菌剂0.92-1.05份、含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的布氏乳杆菌菌剂0.87-0.98份和含有活菌数1.0×107-1.25×107cfu/g的塞内加尔醋酸菌菌剂0.97-1.09份组成，所述复合菌剂的加入量为所述草本中药总量的0.48-0.78wt％。

又进一步地，在上述技术方案中，

所述博伊丁假丝酵母的保藏编号为cctccm2018162bst003；

所述布氏乳杆菌的保藏编号为cctccm2018164bst005；

所述塞内加尔醋酸菌的保藏编号为cctccm2018167bst008。

本发明提供了该草本酵素杀虫剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、按配比称取草本中药，浸泡后加水煎煮两次，合并两次的煎煮液得中药提取物；

s2、往所述中药提取物中加入糖类，混合调配，高温灭菌，冷却后得中药调配液；

s3、往所述中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵，随后同时接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵，高温灭活后过滤，弃除药渣，即得草本酵素杀虫剂。

在上述技术方案中，步骤s1中，所述两次的煎煮过程中，所述水的加入量为所述草本中药所述草本中药8-12倍。

优选地，步骤s1中，所述两次的煎煮过程为采用文火慢煎。

优选地，步骤s1中，所述两次的煎煮时间为60-180min。

优选地，步骤s1中，所述浸泡的时间为30-90min。

进一步地，在上述技术方案中，步骤s2中，所述糖类为单糖或多糖，其加入量为所述草本中药重量的0.02-0.024倍。

优选地，步骤s3中，所述布氏乳杆菌的发酵时间大于48h，所述博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌的发酵时间大于24h。

再进一步地，在上述技术方案中，所述草本酵素杀虫剂的制备方法，包括如下步骤：

s1、按配比称取草本中药，并加入所述草本中药8-12倍重量的水，浸泡45-75min，煮沸75-120min后，滤取一次煎煮液，滤渣再加入所述草本中药8-12倍重量的水煮沸75-120min，并将一次煎煮液加入混合得中药提取物；

s2、往所述中药提取物中加入所述草本中药0.015-0.025倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌10-20min，随后冷却至30-32℃，得到中药调配液；

s3、往所述中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵36-72h，随后再接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵18-30h，加热至115℃，保温10-20min，将所述中药调配液中的活菌灭活，随后过滤，弃除药渣，所得中药发酵液即为草本酵素杀虫剂。

本发明还提供了该草本酵素杀虫剂或该制备方法在制备防治菜青虫、小菜蛾和白粉虱的杀虫剂中的应用。

本发明的优点：

(1)本发明所提供的草本酵素杀虫剂通过对苦参、百部、川楝子和使君子的合理配伍，并采用博伊丁假丝酵母、布氏乳杆菌和塞内加尔醋酸菌的共同发酵，对草本中药进行预消化、分解和转化，将大分子的中间物质分解转化成为能够被直接吸收的有效小分子物质，能加快草本中药的吸收，显著有效提高杀虫效果；

(2)本发明所提供的草本酵素杀虫剂不含任何农药和化学药剂，具有高效、无毒、无害、无污染和无残留的特点，对人、环境和水资源无害，可替代现有使用的化学农药，是一种无公害、环保型杀虫剂，可用于防治各种农作物的病虫害，尤其对同小菜蛾、菜青虫和粉虱类等虫害具有显著的防治效果；

(3)本发明所提供的草本酵素杀虫剂采用加热煎煮和混合发酵相结合的方式制备，能有效提取各草本中药中的活性成分，所需条件和设备简单，工艺简单可控，具有十分重要的实际推广价值，理论和实际意义重大。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。

以下实施例仅用于进一步说明本发明的内容，不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

本发明实施例和对比例中所用原料来源：

本发明实施例和对比例中所用草本中药均为市售产品；

本发明实施例和对比例中所用复合菌剂的制备方法如下：

所述博伊丁假丝酵母菌剂采用来自百士泰(武汉)生物科技有限公司保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)保藏编号为cctccm2018162bst003的博伊丁假丝酵母(分类命名：candidabiodininbst003，保藏地址：中国典型培养物保藏中心(武汉)，中国武汉-武汉大学，保藏日期：2018年03月29日)菌株制成，具体方法如下，在无菌条件下，将博伊丁假丝酵母菌株接入lb琼脂试管斜面培养基上，在30-35℃下恒温培养66-78h，直至长出明显光滑的菌落，即得博伊丁假丝酵母试管菌种，置于2-5℃冰箱中备用，随后将lb液体培养基装入已烘干洗净的1000ml三角瓶中，每瓶装量600-700ml，塞好棉塞，用牛皮纸包扎瓶口，在121℃下恒温灭菌30min，冷却至30-35℃，在无菌条件下接入培养成熟的博伊丁假丝酵母试管菌种，在135-170rpm、28-32℃下恒温培养36-72h，直至其活菌数大于5×107cfu/g，并置于2-5℃冰箱中待用；

所述布氏乳杆菌菌剂采用来自百士泰(武汉)生物科技有限公司保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)保藏编号为cctccm2018164bst005的布氏乳杆菌(分类命名：lactobacillusbuchneribst005，保藏地址：中国典型培养物保藏中心(武汉)，中国武汉-武汉大学，保藏日期：2018年03月29日)菌株制成，具体方法如下，在无菌条件下，将布氏乳杆菌菌株接入已灭菌的mrs琼脂试管斜面培养基上，在30-35℃下恒温培养66-78h，即得布氏乳杆菌菌种，置于2-5℃冰箱中备用，随后将mrs液体培养基装入已烘干洗净的1000ml三角瓶中，每瓶装量600～700ml，塞好棉塞，用牛皮纸包扎瓶口，在121℃下恒温灭菌30min，冷却至30-35℃，在无菌条件下接入培养成熟的布氏乳杆菌菌种，在28-32℃下静置恒温培养36-72h，直至其活菌数大于1×107cfu/g，并置于2-5℃冰箱中待用；

所述塞内加尔醋酸菌菌剂采用来自百士泰(武汉)生物科技有限公司保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)保藏编号为cctccm2018167bst008的塞内加尔醋酸菌(分类命名：acetobactersenegalensisbst008，保藏地址：中国典型培养物保藏中心(武汉)，中国武汉-武汉大学，保藏日期：2018年03月29日)菌株制成，所采用液体培养基配方(质量比)为：酵母浸粉1％、葡萄糖1％和无水乙醇3％，所采用固体培养基配方(质量比)为：酵母浸粉1％、葡萄糖1％、无水乙醇3％和琼脂粉2％，具体方法如下，在无菌条件下，将塞内加尔醋酸菌菌株接入已灭菌的塞内加尔醋酸菌固体试管斜面培养基上，在30-35℃下恒温培养66-78h，即得布氏乳杆菌菌种，置于2-5℃冰箱中备用，将塞内加尔醋酸菌液体培养基中的酵母浸粉和葡萄糖装入已烘干洗净的1000ml三角瓶中，每瓶装量600～700ml，塞好棉塞，用牛皮纸包扎瓶口，在121℃下恒温灭菌30min，冷却至30-35℃，在无菌条件下加入3％的无水乙醇，摇匀后接入培养成熟的布氏乳杆菌菌种，在135-170rpm、28-32℃下恒温培养36-72h，直至其活菌数大于1×107cfu/g，并置于2-5℃冰箱中待用。

若未具体指明，本发明实施例中所用的技术手段均为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1一种草本酵素杀虫剂

1、原料配比：

草本中药包括：

苦参130份、百部128份、川楝子72份和使君子60份；

复合菌剂包括：

博伊丁假丝酵母菌剂0.48份、布氏乳杆菌菌剂0.52份和塞内加尔醋酸菌菌剂0.48-0.65份。

2、制备方法：

s1、按上述配比称取草本中药，并加入草本中药12倍重量的水，浸泡60min，文火慢煎90min后，滤取一次煎煮液，滤渣再加入草本中药12倍重量的水文火慢煎90min，并将一次煎煮液加入混合得中药提取物；

s2、往中药提取物中加入草本中药0.02倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌15min，随后冷却至30℃，得到中药调配液；

s3、往中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵40h，随后再接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵24h，加热至115℃，保温15min，将中药调配液中的活菌灭活，随后过滤，弃除药渣，所得中药发酵液即为草本酵素杀虫剂。

实施例2一种草本酵素杀虫剂

1、原料配比：

草本中药包括：

苦参120份、百部125份、川楝子75份和使君子72份；

复合菌剂包括：

博伊丁假丝酵母菌剂0.66份、布氏乳杆菌菌剂0.52份和塞内加尔醋酸菌菌剂0.58份。

2、制备方法：

s1、按上述配比称取草本中药，并加入草本中药10倍重量的水，浸泡60min，文火慢煎90min后，滤取一次煎煮液，滤渣再加入草本中药10倍重量的水文火慢煎90min，并将一次煎煮液加入混合得中药提取物；

s2、往中药提取物中加入草本中药0.02倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌15min，随后冷却至30℃，得到中药调配液；

s3、往中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵48h，随后再接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵24h，加热至115℃，保温15min，将中药调配液中的活菌灭活，随后过滤，弃除药渣，所得中药发酵液即为草本酵素杀虫剂。

实施例3一种草本酵素杀虫剂

1、原料配比：

草本中药包括：

苦参120份、百部98份、川楝子80份和使君子98份；

复合菌剂包括：

博伊丁假丝酵母菌剂0.75份、布氏乳杆菌菌剂0.82份和塞内加尔醋酸菌菌剂0.35份。

2、制备方法：

s1、按上述配比称取草本中药，并加入草本中药10倍重量的水，浸泡60min，文火慢煎120min后，滤取一次煎煮液，滤渣再加入草本中药10倍重量的水文火慢煎120min，并将一次煎煮液加入混合得中药提取物；

s2、往中药提取物中加入草本中药0.02倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌15min，随后冷却至30℃，得到中药调配液；

s3、往中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵54h，随后再接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵30h，加热至115℃，保温15min，将中药调配液中的活菌灭活，随后过滤，弃除药渣，所得中药发酵液即为草本酵素杀虫剂。

对比例1一种草本杀虫剂

1、原料配比：

草本中药包括：

苦参118份、百部125份、川楝子72份和使君子75份。

2、制备方法：

s2、将中药提取物过滤得药渣和中药药液，弃除药渣，所得中药药液即为草本杀虫剂。

对比例2一种草本酵素杀虫剂

1、原料配比：

草本中药包括：

苦参115份、百部138份、川楝子66份和使君子75份；

复合菌剂包括：

博伊丁假丝酵母菌剂1.5份、布氏乳杆菌菌剂0.48份和塞内加尔醋酸菌菌剂1.2份

2、制备方法：

s2、往中药提取物中加入草本中药0.02倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌15min，随后冷却至30℃，得到中药调配液；

对比例3一种草本酵素杀虫剂草本中药包括：

苦参125份、百部110份、川楝子35份和使君子75份；

复合菌剂包括：

博伊丁假丝酵母菌剂0.55份、布氏乳杆菌菌剂0.48份和塞内加尔醋酸菌菌剂0.47份。

2、制备方法：

s2、往中药提取物中加入草本中药0.02倍重量的糖类，混合调配，再加热至121℃，保温灭菌15min，随后冷却至30℃，得到中药调配液；

s3、往中药调配液中接种布氏乳杆菌，发酵72h，随后再接种博伊丁假丝酵母和塞内加尔醋酸菌，继续发酵48h，加热至115℃，保温15min，将中药调配液中的活菌灭活，随后过滤，弃除药渣，所得中药发酵液即为草本酵素杀虫剂。

杀虫效果评价

分别采用实施例1-3和对比例1-3所制备的杀虫剂作为供试药剂，设计8个组，每组挑选健康成虫各120只，分别放置在室内的新鲜大白菜叶上，用供试药剂稀释100倍喷施。

其中，实验组1以实施例1制得的杀虫剂作为供试药剂，以小菜蛾为供试成虫；实验组2-4以实施例2制得的杀虫剂作为供试药剂，分别以菜青虫、小菜蛾和白粉虱为供试成虫；实验组5-8分别以实施例3和对比例1-3制得的杀虫剂作为供试药剂，以小菜蛾为供试成虫；未施药作为空白对照组。

分别在1天、3天、5天和10天进行观察记录试验结果，结果如下表1所示。

从表1的结果中可以看出，试验例组1-5在喷药后10天内对包括菜青虫、小菜蛾和白粉虱在内的害虫均有较好的防治效果，害虫死亡率在75％以上，且在喷药后的第4-7天的防治效果提升较快，在喷药后的第7天后防治效果平稳增加至最佳效果；相比之下，试验例组6-8的防治效果则明显低于试验例组1-5。

综上所述，本发明依据中药学和微生物发酵学相关理论，科学配伍，利用博伊丁假丝酵母、布氏乳杆菌和塞内加尔醋酸菌对草本中药进行预消化、分解和转化，所制得的草本酵素杀虫剂具有良好的杀虫作用，且其杀虫效果稳定有效，可达到现有常规化学药剂的杀虫效果，且对其他动物体和人体无刺激和毒性作用，不会对环境造成二次污染，是一种杀虫效果良好、无公害、无残留的草本酵素杀虫剂，尤其对同小菜蛾、菜青虫和粉虱类等虫害具有显著的防治效果，实际应用前景广阔。

最后，以上仅为本发明的较佳实施方案，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。