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干扰牛角花齿蓟马取食的引物对、DNA、dsRNA、试剂盒及应用与防控方法

来源：花匠小妙招时间：2025-09-19 12:52

本发明属于生物，具体涉及一种干扰牛角花齿蓟马取食的引物对、dna、dsrna、试剂盒及应用与防控方法。

背景技术：

1、牛角花齿蓟马（ odontothrips loti）是国内为害紫花苜蓿的主要害虫之一，在我国苜蓿主产区发生严重，为害率达70%-100%，严重影响苜蓿产量和品质。同时，苜蓿病毒病是苜蓿田重要病害之一，在田间发生日益加剧，发病率为20%-100%，造成苜蓿减产甚至绝产，是限制苜蓿生产的重要因素。昆虫是植物病毒传播的主要载体，其中牛角花齿蓟马是我国携带和传播苜蓿病毒病的重要媒介昆虫。植物病毒病被称作农作物的“癌症”，至今缺少有效的防治方法。因此，对蓟马的有效防治，是切断病毒病的传播途径，实现苜蓿病毒病的有效预防的关键一环。

2、目前，对牛角花齿蓟马的防治，主要依靠化学农药，包括拟除虫菊酯类、新烟碱类等农药。由于蓟马繁殖力强、生命周期短的特点，其田间抗性发展十分迅速，蓟马对杀虫剂的抗性严重影响了苜蓿草田的病毒病和害虫防治工作。rnai是一种靶标性强，环境友好的新型害虫管理手段，已在农业领域广泛应用。而关于利用rnai技术干扰蓟马取食来防控蓟马的产品和方法，目前尚未见报道。

3、中国专利申请cn116606851a公布了一种防控蓟马的引物组dsfotof/rs、dna、dsrna、试剂盒及应用与方法，该发明通过降低西花蓟马的产卵量来防控蓟马，虽然能降低蓟马后代数量，但无法直接致死，产生防治效果的周期较长。中国专利申请cn115136959a公布了一种豆大蓟马取食抑制剂及其筛选方法与应用，该发明所述取食抑制剂均为植物源提取物，提取工艺复杂，防治成本高。关于通过基因干扰手段影响牛角花齿蓟马取食从而达到防控效果的技术尚未见报道。

4、因此，现有技术中亟需一种干扰牛角花齿蓟马取食的引物组、dna、dsrna、试剂盒及应用与方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了克服现有技术存在的不足，提供一种干扰牛角花齿蓟马取食的引物对、dna、dsrna、试剂盒及应用与防控方法。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、通过对不同杀虫剂抗性水平的牛角花齿蓟马群体进行选择清除分析和差异表达分析，在抗性蓟马中，筛选到一个包含多个非同义突变位点且rna表达水平有显著差异的果胶酶基因，核苷酸序列如seq id no:1 所示。根据该目的序列片段seq id no :1设计得到干扰牛角花齿蓟马取食的引物对。

4、干扰牛角花齿蓟马取食的引物对，核苷酸序列如下所示：

5、dsolplf: 5’-taatacgactcactataggggaaacggagggctacgagac-3’， seq id no :2；

6、dsolplr: 5’-taatacgactcactatagggtgctggcgacctatgttatgg-3’， seq id no :3。

7、干扰牛角花齿蓟马取食的dna，由牛角花齿蓟马的gdna及所述的引物对dsolplf、dsolplr扩增获得，所述干扰牛角花齿蓟马取食的dna的核苷酸序列参见seq id no :1。

8、干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna，以所述干扰牛角花齿蓟马取食的dna为模版合成。该dsrna能通过影响取食来防治牛角花齿蓟马，降低田间蓟马的为害程度，减少蓟马取食带来的损失，并造成牛角花齿蓟马死亡。

9、干扰牛角花齿蓟马取食的试剂盒，活性成分包括干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna。

10、干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna在防控牛角花齿蓟马中的应用。

11、进一步的，所述干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用。

12、一种牛角花齿蓟马的防控方法，采用所述的干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna来防控牛角花齿蓟马。

13、进一步的，所述干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用。

14、本发明的有益效果是：本发明提供的dsrna靶标性强，可特异性防治田间牛角花齿蓟马，对田间有益天敌无影响。本发明提供的dsrna通过干扰牛角花齿蓟马的取食，减少蓟马取食带来的损失，减少苜蓿病毒病的传播，降低为害程度，并造成牛角花齿蓟马死亡。本发明提供的dsrna配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用，能显著提升杀虫剂的防治效果。

技术特征：

1.干扰牛角花齿蓟马取食的引物对，其特征在于：核苷酸序列如下所示：

2.干扰牛角花齿蓟马取食的dna，其特征在于：由牛角花齿蓟马的gdna及权利要求1所述的引物对dsolplf、dsolplr扩增获得。

3.干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna，以权利要求2所述的dna为模版合成。

4.干扰牛角花齿蓟马取食的试剂盒，其特征在于：活性成分包括权利要求3所述的干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna。

5.权利要求3所述的干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna在防控牛角花齿蓟马中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用。

7.一种牛角花齿蓟马的防控方法，其特征在于：采用权利要求3所述的干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna来防控牛角花齿蓟马。

8.根据权利要求7所述的防控方法，其特征在于：所述干扰牛角花齿蓟马取食的dsrna配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用。

技术总结
一种干扰牛角花齿蓟马取食的引物对、DNA、dsRNA、试剂盒及应用与防控方法。干扰牛角花齿蓟马取食的引物对，核苷酸序列如SEQ ID NO:2及SEQ ID NO:3所示。干扰牛角花齿蓟马取食的DNA，由牛角花齿蓟马的gDNA及引物对dsOlPLF、dsOlPLR扩增获得。干扰牛角花齿蓟马取食的dsRNA，以干扰牛角花齿蓟马取食的DNA为模版合成。干扰牛角花齿蓟马取食的试剂盒，活性成分包括干扰牛角花齿蓟马取食的dsRNA。该dsRNA在防控牛角花齿蓟马中的应用，通过干扰牛角花齿蓟马取食，降低为害程度，并造成牛角花齿蓟马死亡。dsRNA配合拟除虫菊酯类杀虫剂使用，能显著提升杀虫剂的防治效果。

技术研发人员：班丽萍,罗撄宁,魏淑花,唐芳,韩海斌
受保护的技术使用者：内蒙古农业大学
技术研发日：
技术公布日：2025/3/24