一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法与流程
本发明涉及组培快繁,更具体的说是涉及一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法。
背景技术:
1、大叶滨紫草(mertensia sibirica(l.)g.don),隶属于紫草科滨紫草属,为多年生草本,具细长或短缩的根状茎,基生叶丛生,茎生叶互生,聚伞花序,通常在茎上部集成小型圆锥状花序,无苞片,花冠漏斗状,通常蓝色或淡蓝色,小坚果四面体形。大叶滨紫草年生长量大,花量颇多,蓝色花系,种子含γ-亚麻酸(gla)占脂肪酸含量的22.8%,具有独特的观赏价值和经济价值。野外仅在2200m以上的高海拔山坡有狭域自然分布,且居群稀少。
2、目前大叶滨紫草的繁育技术研究尚未有报道,为合理开发利用这一具有潜力的植物,通过植物组织培养繁殖方法可满足短时间内快速繁殖苗木的需求。
3、因此,能否提供一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明提供了一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法。
2、为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合,包括初代培养基、继代培养基、生根培养基中的多个;
4、初代培养基包括:ms、1.5mg/l 6-ba、0.01mg/lnaa、30g/l的蔗糖、6g/l的琼脂;
5、继代培养基包括:ms、0.5~1.0mg/l 6-ba、0.01mg/l naa、30g/l的蔗糖、6g/l的琼脂;
6、生根培养基包括:1/8ms、0.1mg/l iba。
7、优选的:包括初代培养基、继代培养基、生根培养基;
8、初代培养基包括:ms、1.5mg/l 6-ba、0.01mg/lnaa、30g/l的蔗糖、6g/l的琼脂;
9、继代培养基包括:ms、0.8mg/l 6-ba、0.01mg/lnaa、30g/l的蔗糖、6g/l的琼脂;
10、生根培养基包括:1/8ms、0.1mg/l iba。
11、本发明还提供了一种使用上述的培养基组合的快速繁殖方法,包括以下步骤:
12、(1)花葶消毒;
13、(2)初代培养:将消毒好的花葶两端部分切除,将花葶沿横截面切为小段,将花葶接种于初代培养基中培养,获得愈伤组织和不定芽;
14、(3)继代培养:将步骤(2)中的不定芽切割后分别接到继代增殖培养基中培养;
15、(4)生根培养:将步骤(3)中培养得到的不定芽单个接入无菌水/生根培养基/培养液中培养,得试管苗;
16、(5)炼苗:待步骤(4)培养的试管苗放置炼苗室炼苗,得小苗,准备移栽;
17、(6)移栽。
18、优选的:步骤(1)具体为:选取幼嫩花葶,用洗衣粉浸泡10min,再用自来水冲洗干净,用滤纸吸干水分,用无菌水冲洗1次,然后用75%酒精溶液消毒30s,无菌水冲洗2次,接着用0.1%hgcl2消毒1min,无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干水分备用。
19、优选的:步骤(2)具体为:用无菌手术刀将消毒好的花葶两端部分切除,将花葶沿横截面切为1.0cm的小段,将花葶接种于初代培养基中培养35~50天获得愈伤组织和不定芽;培养条件为:22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d。
20、优选的:步骤(3)具体为:将步骤(2)中的不定芽切割后分别接到继代增殖培养基中,22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d,培养20~25天。
21、优选的:步骤(4)具体为:将步骤(3)中培养得到的高度达到5cm的不定芽单个接入无菌水中培养,22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d,得试管苗;
22、或,
23、将步骤(3)中培养的高度达到5cm的不定芽单个接入1/8ms培养液中培养,22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d,得试管苗;
24、或,
25、将步骤(3)中培养的高度达到5cm的不定芽单个接入生根培养基中培养,22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d,得试管苗。
26、优选的:步骤(5)具体为:待步骤(4)培养的试管苗根长到1~2cm时,炼苗3d,得小苗,准备移栽。
27、优选的:步骤(6)具体为:取出步骤(5)培养的小苗移栽入试管苗移栽基质中,放入温室内的小拱棚,拱棚湿度保持在80%~85%、温度20~25℃,移栽一周后逐渐打开小拱棚,30天后进入常规管理;
28、试管苗移栽基质为泥炭土、珍珠岩、蛭石质量比为3:1:1,基质移栽前用50%多菌灵可湿性粉剂的1000倍液进行消毒。
29、本发明还提供了上述培养基组合或任一上述的快速繁殖方法在农业生产中的应用。
30、经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明公开提供了一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法,取得的技术效果为本发明提供的大叶滨紫草的组培快繁方法,通过运用植物组织培养技术,采用花葶为外植体,取材容易,筛选的继代培养基和生根培养基解决了对大叶滨紫草进行大规模培养的问题。尤其是在生根培养过程中直接选择改良的1/8ms营养液添加生长素,省去配制培养基这一步骤,也能使大叶滨紫草生根,且生根率可达90%,移栽时不用洗根部培养基,操作简单。此方法简化了组织培养程序、节约生产成本,简便易行,对大叶滨紫草的规模化育苗具有重要的意义。
技术特征:
1.一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合,其特征在于,包括初代培养基、继代培养基、生根培养基中的多个;
2.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,包括初代培养基、继代培养基、生根培养基;
3.一种使用权利要求1或2所述的培养基组合的快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.如权利要求3所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(1)具体为:选取幼嫩花葶,用洗衣粉浸泡10min,再用自来水冲洗干净,用滤纸吸干水分,用无菌水冲洗1次,然后用75%酒精溶液消毒30s,无菌水冲洗2次,接着用0.1%hgcl2消毒1min,无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干水分备用。
5.如权利要求4所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(2)具体为:用无菌手术刀将消毒好的花葶两端部分切除,将花葶沿横截面切为1.0cm的小段,将花葶接种于初代培养基中培养35~50天获得愈伤组织和不定芽;培养条件为:22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d。
6.如权利要求5所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(3)具体为:将步骤(2)中的不定芽切割后分别接到继代增殖培养基中,22~25℃、光照强度2000~2500lux、光周期为12h/d,培养20~25天。
7.如权利要求6所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(4)具体为:将步骤(3)中培养得到的高度达到5cm的不定芽单个接入无菌水中培养,
8.如权利要求7所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(5)具体为:待步骤(4)培养的试管苗根长到1~2cm时,炼苗3d,得小苗,准备移栽。
9.如权利要求8所述的快速繁殖方法,其特征在于,步骤(6)具体为:取出步骤(5)培养的小苗移栽入试管苗移栽基质中,放入温室内的小拱棚,拱棚湿度保持在80%~85%、温度20~25℃,移栽一周后逐渐打开小拱棚,30天后进入常规管理;
10.权利要求1或2所述的培养基组合或权利要求3~9任一所述的快速繁殖方法在农业生产中的应用。
技术总结
本发明公开了一种大叶滨紫草的组培快速繁殖培养基组合及其快速繁殖方法。涉及组培快繁技术领域。包括初代培养基、继代培养基、生根培养基中的一个或多个,并提供了快速繁殖方法。本发明提供的大叶滨紫草的组培快繁方法,通过运用植物组织培养技术,采用花葶为外植体,取材容易,筛选的继代培养基和生根培养基解决了对大叶滨紫草进行大规模培养的问题。尤其是在生根培养过程中直接选择改良的1/8MS营养液添加生长素,省去配制培养基这一步骤,也能使大叶滨紫草生根,且生根率可达90%,移栽时不用洗根部培养基,操作简单。此方法简化了组织培养程序、节约生产成本,简便易行,对大叶滨紫草的规模化育苗具有重要的意义。
技术研发人员:陈陆琴,曹建庭,任保青,马俊,单璐,赵玉琳,张靖宜,康昊,王玮,刘东红
受保护的技术使用者:太原植物园
技术研发日:
技术公布日:2024/12/17
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