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微型月季的离体培养与快速繁殖
微型月季的离体培养与快速繁殖 ` 摘要 通过对微型月季离体生长过程的观测,研究了植物激素对微型月季不定芽增殖、伸长以及壮苗、生根的作用,并筛选出了微型月季快速繁殖不同生长阶段的适宜培养基。结果表明,增殖培养基以MS+BA 1.0+NAA 0.2较好.壮苗培养基以MS+BA 0.4+NAA 0.01较好.生根培养基以1/2MS较好。季节对移栽成活率的影响极大,组培苗的根长、数目也有一定的影响。 关键词 微型月季;离体培养;快速繁殖 杂种香水月季(含切花月季)[1]、微型月季[2,3]、丰花月季[4]的离体培养与快速繁殖已有许多研究报道,主要涉及启动培养、继代培养、生根培养及移栽成活率的影响因素等几个方面。微型月季小巧玲珑,花色丰富,有香味,是案头摆设之佳品,市场需求越来越大。朱建镛等人研究了微型月季腋芽发芽率,茎段放置方法对新生腋芽鲜重与干重的影响,不同光强对新梢生长进程的影响,不同品种增殖率的差别以及不同培养基对增殖进程的影响[2]。洪立萍等人进行了微型月季离体快速繁殖的研究[3]。为了满足人们的需求,近年引入了不少国外微型月季的新品种。为了这些优良品种的快速繁育,中国农业大学观赏园艺系观赏植物遗传育种与生物技术实验室从1999年1月,开始进行了微型月季离体培养与快速繁殖的试验,重点研究植物激素对微型月季离体生长进程的影响,快速繁殖不同阶段的适宜培养基及影响移栽成活率的因素。 1 材料与方法 1.1 试验材料 材料取自北京莱太花卉市场的微型月季商品盆花。首先将整段枝条用洗衣粉水仔细刷洗,滤纸吸干,剪成2—3cm长的节段;然后在超净工作台上用70%的酒精浸泡30S,接着放入0.1%HgCL2溶液中浸泡10min,最后用无菌水冲洗6次以上;最后在无菌条件下切割成单芽茎段,接种于芽启动培养基上。 1.2培养基及其配制 培养基中的各种成分(表1)分别用蒸馏水配成一定浓度的母液,按比例混合后,分装于100ml三角瓶中,每瓶装25-30ml,用耐高温塑料膜封口。培养基中一般含绵白糖3%,琼脂0.6%,pH值为5.8-6.2。1.3-1.5大气压下灭菌20-25min,取出放于无菌室中待用。 表1 微型月季离体培养不同阶段的培养基配方 阶段No.基本 培养基细胞 分裂素生长素阶段No.基本 培养基细胞 分裂素生长素启动1MSBA 5.0IBA0.1CK 1*MS MS BA 1.0 NAA0.42MSBA 10.0NAA 1.01MSBA 1.0IAA0.22*MSBA 1.0NAA1.02MSBA 1.0NAA1.031/4 MSNAA0.5增3MSBA 2.0IAA0.241/2 MSNAA1.0殖4*MSBA 1.0NAA1.0+ IAA0.4生51/2 MSNAA0.75培5*MSBA 1.0NAA1.0根61/2 MSNAA0.5养6MSBA 2.0IBA0.3 + GA310培71/2 MSNAA0.1基7MSKT 3.0NAA0.5养81/2 MSNAA0.038MSKT 1.0NAA0.2基9*1/2 MSNAA1.0壮苗1MSBA 0.5NAA0.110 111/2 MS 1/2 MSIBA1.5 IBA1.02MSBA 0.5NAA0.05培3MSBA 0.5NAA0.0112MSNAA0.5养4MSBA 0.4NAA0.0113MSNAA0.1基5MSBA 0.3NAA0.0114MSNAA0.03*含活性炭1% 1.3 接种、培养、驯化与移栽 把启动培养的腋芽切割下来,每瓶一枚,直插于增殖培养基中。把增殖的丛生芽从基部切开,置于壮苗培养基上,使单芽伸长、增粗。再将形成主茎的壮苗插入生根培养基中;弱苗可在增殖培养基中继代培养。培养室温度25(2(C,每天用荧光灯照明12小时,照度为2000Lux。 将诱导发根后的微型月季无菌苗先炼苗7天。第三天拆封口线,第五天拆封口,第七天取出试管苗,先洗掉基部培养基,细心移栽到苗盘中,基质为珍珠岩和菜园土,按1:1的比率配置。开始用1/2MS培养液浇灌,约1个月。移栽温度以20-25为好,湿度最好大于85%,中午避免阳光直晒。 1.4观测与分析 在离体培养过程中,主要观测并分析了以下数据: 增殖率=(第二次继代增殖率R2-第一次继代增殖率R1)/R1,增加高度=第二次观测高度H2-第一次观测高度H1,生根率=生根总株数/接种总株
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