词:月季“卡罗拉”;茎段快繁;组织培养;炼苗移栽
月季属蔷薇科多年生木本花卉,花姿优美,花型,花色齐备,素有“花中皇后”之美誉,具有很高的观赏价值和商业价值。切花月季位居四大切花之首,多年来销售额稳居各类花卉的前茅。月季种植业的进展,对月季种苗的需求量越来越大。对于新培育和引进的优良品种,传统的扦插法及芽接法繁殖种苗受原数量限制,繁殖速度受到很大限制,短期内推广。而组培育苗具有繁殖速度快、幼苗质量好等特点,对于月季新品种的扩繁与大规模推广运用具有作用[1-3]。本试验以月季“卡罗拉”为组织培养技术探讨,以期建立该品种快繁系统,为改善月季组培快繁技术大规模生产名优月季品种。
1 与策略
1.1选取江西金乔园林有限公司建设的江西月季产业园中月论文网季“卡罗拉”当年生生长健壮的未开花枝条,去除顶部3个芽,其余去叶去刺后剪成带单腋芽的小段。
1.2 策略
1.2.1腋芽诱导。将剪好的茎段用洗衣粉溶液浸泡1min,自来水冲洗干净,在超净工作台上用75%酒精消毒30s,无菌水冲洗1遍,再用0.1%氯化汞溶液浸泡10min,无菌蒸馏水冲洗4~5遍。切去茎段两端毒害的,接种于诱导培养基中。培养基为MS,设2个处理,添加6-BA 0.5mg/L和0.8mg/L,每处理接60个茎段。观察萌芽,10d后统计结果。1.2.2继代增殖。将长至2~3cm的丛生芽切成单芽,转接到增殖培养基中,培养基为MS,添加不同浓度的6-BA和NAA。共7个处理,每处理接20个芽,28d后观察并统计结果。
1.2.3生根培养。将生长健壮,为2.5~4cm的丛生苗切单株,转入生根培养基中培养。培养基为1/2MS,添加不同浓度的NAA(0.1~0.6mg/L)或IBA(0.1~0.6mg/L),共13个处理,每处理20个芽,观察分化,14d后统计结果。确定最适生根培养基后,将继代培养中生长健壮、高2.5cm的无根苗切成单株,分为2.5~4.0cm、4.0~5.5cm、5.5~
7.0cm共3组,转接到相同的生根培养基中,接种14d后观察幼苗的生根情况。
培养基均添加30g/L蔗糖,6g/L琼脂,pH值调至5.8左右。瓶苗在培养室中培养,培养条件为:25℃,光周期16h/8h,光强1500~2000lx。1.2.4炼苗移栽。当组培苗数根系长达0.8cm左右时,将其置于常温条件下炼苗3~5天,然后取出幼苗洗去植株根部残留的培养基,移栽到用0.1%的百菌清消毒的泥炭和珍珠岩(体积比1:1)基质中,移植后浇水使基质保持湿润但不积水,并用遮阳网覆盖。10d后逐渐揭膜炼苗,20d后调查成活率。
2 结果与浅析
2.1 腋芽诱导茎段接种5d后腋芽开始萌动,萌动后芽生长情况培养基内6-BA的浓度不同而不同。培养20d后,在MS+ BA 0.5mg/L的培养基中,80%腋芽分化出1个芽,20%的腋芽分化出2个芽。而在MS+ BA 0.8mg/L的培养基中,腋芽均分化出2~3个芽,丛生芽长势健壮。结果培养基MS+ BA 0.8mg/L适用于诱导“卡罗拉”萌芽。
2.2 继代增殖
在试验的BA浓度范围内,嫩芽的增殖倍数开始BA浓度的增加而增加,当BA达1.5mg/L后增殖倍数无显著变化。在相同浓度的BA条件下,NAA浓度对增殖倍数影响不大,但影响增殖苗长势。以增殖倍数和增殖苗长势等综合因素看, MS+BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L是最适的不定芽增殖培养基(表 1) 。
2.3生根培养
2.3.1不同激素浓度对生根的影响。将月季幼嫩植株接到添加不同浓度的NAA或IBA的1/2MS培养基中生根培养。结果,在1/2MS+NAA(0.1~0.6mg/L)的培养基中培养的植株基部均产生愈伤组织,培养17d后才有植株在愈伤组织周围长出根,根短小而脆弱,NAA不适用于月季“卡罗拉”生根。而在1/2MS+ IBA(0.1~0.6 mg/L)培养基中培养5d后植株基部产生白色根原基,10d后,培养基上逐步长出白色的根(后期逐渐变褐),根长、生根率和植株长势等综合情况浅析,1/2MS+IBA0.3mg/L最适合于“卡罗拉”生根,生根率达95%(表2),平均根数10.4条,平均根长0.75cm,根白壮且苗长势较好。2.3.2不同芽高对生根的影响。将不同的单株无菌苗接种于1/2MS+ IBA0.3 mg/L培养基中,培养14d后观察,为5.5~7.0cm芽大枯死,生根率最低;为4.0~5.5cm的芽黄化,生根率较低;而2.5~4.0cm的植株长势最好,生根率高达95%,根粗壮,叶片深绿(表3)。,为2.5~4.0cm的芽适合于生根培养,高于5cm植株会黄化。
2.4 炼教育论文苗移栽
组培苗根长达0.5~0.8cm时炼苗移栽,成活率达70%。组培苗的健壮对移栽成活率影响,株高高于6cm或低于2.5cm、根长超过1.5cm、叶片少的苗移栽后很死亡。
3 讨论以月季“卡罗拉”茎段为外植体月季组培快繁,激素浓度配比对月季组培各阶段均有影响,MS+BA0.8mg/L是最适的离体芽诱导培养基,MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L是最适的不定芽增殖培养基,1/2MS+IBA0.3mg/L是最适宜的生根培养基。上看,本探讨结果与月季组织培养探讨在某些结果具有的差别,这可能与其基因型差别有关[4-11]。在品种月季组培快繁时,培养基及激素的适宜浓度配比的探讨是必要的,盲目套用。
芽高对组培苗生根移栽成活率有很大影响。结果最适于生根的芽高为2.5~4.0cm,芽过高会导致芽的枯死,以而影响生根。这与蔺红苹[11]等的结果一致,芽的枯死可能理由是芽过高而纤细的茎难于运输的养料至顶芽,导致顶芽枯萎,以而导致整棵芽苗枯死。瘦高细弱的生根苗移栽后也倒伏萎蔫影响成活率。
组培苗根长为0.8~1cm时即要炼苗移栽,在清洗和移栽时过长的根受损,根的继续生长,细胞逐渐衰老,同化能力降低,移栽后反而不易成活。朱鹿鸣等[12]具根原基的试管苗比根系已长出的试管苗移栽成活率高,并且耐贮藏,不易烂苗,机理有待探讨。
本探讨初步建立月季“卡罗拉”组培快繁系统,为大规模推广运用该品种了。江西省近年来大量引进名优月季品种,但未建立相应的快繁系统,探讨结果为品种月季的组培快繁了技术,对月季名优新品种的迅速具有作用。(收稿:2011-12-23)
文献
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