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月季花瓣的rna提取方法

来源：花匠小妙招时间：2024-12-26 17:58

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RNA谢吉容唬淘偃，黄兴奇唬瓶Q鏑云南农业大学学报(Rosahybrid)的传统花卉和世界五大鲜切花之一，受到了世界各国人民的厚爱，月季的花色和芳香是植物正常繁育后代的前提，也是使其在切花生产、庭园美化、家居装饰等方面都发挥着重要作用，其栽培几乎遍及世界各地，具有极其重要的经济价值。月季花瓣RNA花香基因表达的必要基础。月季花蕾富含花色素、香味、多糖等次生代谢产物，这极大地影响了从花瓣中提取＞」艽痈髦植牧现刑崛的RNARNaseKit瓣中成功分离宦砟械炔捎肏法从月季花瓣中得到纯度较高的，；但这些有限的费用较高的方法应用上有很大的局限性。本试验以富含类黄酮的月季花瓣为试验材料，选取相对廉价的基本方法进行对比，以期归结出能被借鉴的RNA香相关基因奠定基础。22420077(14021602400715颇鲜∨┮悼蒲г海颇侠ッ摘要：以富含类黄酮的月季花瓣为试验材料，通过比较不同方法，优化和改进提取步骤，发现多级沉淀法、RNA28S18S28S18S倍。而狶ā约量焖俜ㄌ崛〉腞黄酮胶状沉淀难溶，电泳图谱条带模糊难辨，条带很亮。这为月季花色差减文库构建及花色相关基因克隆奠定了良好的基础。RNACTABSA文章编号：———Jiron912CHENGZaiquan3HUANGXin-qi3TANG．400715China，收稿日期：——修回日期：一—·基金项目：云南省科技攻关项目；云南省农业科技攻关项计划。作者简介：谢吉容，重庆永川人，女，副教授，主要从事花卉种质资源和育种研究。毒·通讯作者Jul2007Kaixue3AbstractDiverseinexpensiveand琾琣polysaccharides甊——猵SDS甌colorwordsRosa籧tissueRNAextractionCTABmanylevel-precipitationE-******@tomcornNo4珻SciencesYongchuan402168China瓹琒，3YunnanSciencesKunming簒．
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(7)50RlVase刮轗水溶解在沉淀中加入铀芙猓尤70250DEPCRNA操作按照其附带的使用说明进行。无水41材料(YellowIsland)由云南昆明杨月季公司提供。花枝采样后立即插2h冻，再放入一℃冰箱保存。RNAroseReagentRNA加入％，室温过夜后，高压灭菌除去，得到水。另外，玻璃器皿、离心管、枪头、研钵等经过％水浸泡过夜高压灭菌后使用。方法ReagentSDSLiCl(1)05g磨成粉末状，迅速加入mL(01Tfis(pH=85)10，含尤一饱和酚mL(241)(2)50mL1rrain45，取上层水相移人一1(NaCl=1201)(3)2070痳下离心恋鞷，去上清液；恋砣芙庥无尤LiCI4陨希痳下离心min(5)10mLRNase加入mL1过夜；rrain4C15755mL2离心管，测完整性，一℃保存。123(1)01g管；(2)500LmolL50L10SDS10L135℃条件下，痳胄取上清液；肛ズ头85)100L．，充分混匀；痬，离心(6)2030410(7)500L．悬浮沉5min％乙醇洗涤危琑沉淀于室温下干燥～恋恚琑液置于一℃保存。CTABH(1)05g20656的呀庖汉一巯基乙醇，℃保温(2)15饱

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