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菌种鉴定方法及手段真菌细菌检测

来源：花匠小妙招时间：2024-11-26 10:03

1、菌种鉴定菌种鉴定方法及手段方法及手段真菌检测真菌检测/细菌检测细菌检测菌种鉴定菌种鉴定一般就只要提取基因组 DNA，然后 PCR 扩增 16srDNA 片段，上 GeneBank 或者 Eztaxon 对比即可。一般序列相似度在 97%以上就可以认为是同种细菌。常规鉴定常规鉴定常规鉴定内容有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应等。自动鉴定自动鉴定 BIOLOG 鉴定系统以微生物对不同碳源的利用情况为基础，检测微生物的特征指纹图谱，建立与微生物种类相对应的数据库。通过软件将待测微生物与数据库参比，得出鉴定结果。该系统已获美国 FDA 认可，已逐步应用于食品和饮品企业、环保、海洋生物/水产品、制药、农业微生物、生物治理、化妆品、临床等领域的微生物鉴定试验中。拥有国内最全的 BIOLOG 数据库，涉及革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌、酵母、丝状真菌在内近 2000 种微生物。分子生物学鉴定分子生物学鉴定应用分子生物学方法从遗传进化角度阐明微生物种群之间的分类学关系，是微生物分类

2、学研究普遍采用的鉴定方法。科标生物检测中心拥有微生物菌种分类鉴定的分子生物学实验室，配有 PCR 仪、高速冷冻离心机、电泳仪、HPLC、凝胶成像系统、紫外控温分析系统等先进仪器设备，以及 DNAMAN、BIOEDIT、CLUSTALX、TREEVIEW 等序列分析软件。可采用核酸序列分析法分析细菌 16S rDNA/16S-23S rDNA 区间序列、酵母 18S rDNA/26S rDNA（D1/D2）序列及丝状真菌的 18S rDNA/ ITS1-5.8S-ITS2 序列，提供科学的鉴定结果。 API 细菌鉴定细菌鉴定 API 鉴定系统涵盖 15 个鉴定系列，约有 1000 种生化反应，已可鉴定超过 600 种的细菌。鉴定过程中，可根据细菌所属类群选择适当的生理生化鉴定系列，通过软件将待测细菌与数据库参比，得出鉴定结果。可应用 API 50CH 系列、API 20 E 系列、API Staph 系列对乳酸杆菌（Lactobacillus sp.）和相关细菌、芽孢杆菌（Bacillus sp.）、葡萄球菌属（Staphylococcus sp.）、微球菌属

3、（Micrococcus sp.）和库克菌属（Locuria sp.）进行鉴定。技术分析技术分析功能性分析及功能基因不断致力于工业微生物资源的功能及其功能基因研究，通过木聚糖酶、纤维素酶、葡萄糖异构酶、-甘露聚糖酶等功能基因的克隆进行菌种产酶的功能性分析。应用 gyrA、atpD 及 pheS 等看家基因于微生物菌种鉴定，在某些种、亚种、株间有较好的分辨效果。 RAPD、SSCP 技术技术随着微生物菌种应用的进一步发展，在食品安全管理、生物产品出口认证、知识产权保护等行业需求日益增加，微生物菌种株水平的鉴别技术成为一个迫切需要解决的问题。采用随机扩增多态性 DNA（Randomly amplified polymorphism DNA，RAPD）技术和单链构象多态性(Single Strand Conformation Polymorphism，SSCP）技术对微生物菌株进行鉴别。如采用 RAPD 技术能够对同一菌种原始菌株与诱变菌株进行鉴别，对诱变菌株知识产权保护具有重要意义；采用 SSCP 技术进行工业酒精酵母菌株的鉴别，此技术结合菌株发酵特性，在酒类生产的质量控制方面起到积极作用。 TLC 薄层层析薄层层析 TLC 薄层层分析技术应用于微生物菌种鉴定，进行细菌、放线菌细胞壁化学组分分析（氨基酸、糖），作为划分属特征的重要鉴定技术手段，起到了良好的辅助作用。全细胞脂肪酸分析鉴定系统全细胞脂肪酸分析鉴定系统采用 Sherlock 全自动细菌鉴定系统，通过对不同菌株的脂肪酸图谱进行分析，并与标准数据库进行比对，来鉴定细菌及酵母。该技术是细菌或酵母种水平鉴定的有效手段之一。（9）（G+C）mol%及 DNA/DNA 杂交通过采用 DU800 核酸蛋白分析仪测定 Tm 值，从而得到微生物菌株的（G+C）mol%，并与模式菌株进行 DNA/DNA 同源性分析，该鉴定技术手段是多相鉴定的重要组成部分。

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