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植物病原真菌鉴定

来源：花匠小妙招时间：2024-10-30 10:08

植物病原真菌鉴定

直接观察或借助实验手段确认某种植物病害的病原真菌，并给予正确学名的过程。植物病原真菌鉴定包括病害标本采集、症状描述、病原真菌形态特征检测，将观察结果与真菌分类检索表中有关种的描述逐一加以核对，如基本一致，即可认为是该已知种所致病害，而予以相同的拉丁学名。有时所采植物病原真菌需要分离培养，经过培养性状的观测和致病性鉴定并进行病原真菌生理生化试验等均作为辅助鉴定手段。

目录 1 标本采集 2 症状观察 3 病原真菌的形... 4 真菌的分离培... 5 病原真菌培养... 6 生理生化测定

病原真菌鉴定的步骤主要有：标本采集、症状观察、形态观测、真菌分离培养、培养性状和生理生化测定等。

标本采集

真菌病害标本是研究病害症状和病原真菌形态及生理特征的基础材料，经过田间观察记载后，进一步对病害标本在室内进行病原真菌鉴定。植物病原真菌病害标本的采集要求症状具有典型性，即带有病菌子实体的标本。标本上的病斑种类力求单纯，以利于确定是一种或几种病害。标本应有一定数量的复份，对寄主名称、病害发生环境、条件、采集时间、地点等进行详细记载。采集标本时应注意对寄主植物的鉴定，一些病原真菌（白粉菌、黑粉菌和锈菌等）当寄主植物分类地位不明确时很难鉴定出种名。对不熟悉的寄主植物，应采全其花、果实、种子等部位以便鉴定。适于干制的蜡叶标本，应随时压于标本夹吸水纸中，并经常换纸，使其干燥。

症状观察

病害对植物全株的影响（有无凋萎、萎缩、畸形或生长特性的改变等），病部坏死斑的形状、数目、大小、色泽、子实体排列及有无轮纹等；腐烂组织的颜色、气味、质地等；病部产生的病原真菌菌丝体和子实体的特征，都是症状观察和描述的重要内容。一般常见真菌病害，经过症状观察，即可以对致病的真菌作出初步判断。但症状对病原真菌的鉴定不完全可靠，不同的病原物有时可产生相似的症状，反之，一种病害症状可随寄主和发病环境条件而改变。

病原真菌的形态观测

病原真菌的鉴定以病菌形态鉴定为准。借助显微镜，对病原真菌的菌丝体和其它营养体的形态、结构和大小，孢子的形态、颜色、大小，产孢方式，子实体的形态结构和产生部位等进行观察和测量。如标本尚未形成病菌子实体，可将标本经保湿处理，即可见子实体的产生。标本表面产生的菌丝体和子实体，可直接用针挑取少许，置加有一滴浮载剂如水或乳酚油（苯酚40毫升，乳酸20毫升，甘油40毫升，蒸馏水20毫升配制而成）的载玻片上，加盖玻片后在显微镜下检视。埋生于植物组织中的真菌子实体，需要将材料切成薄片再制成玻片标本进行显微观察。植物组织内真菌子实体的制片常用徒手切片和石蜡切片两种方法。①徒手切片。将病组织湿润后用手指轻压，用刀片将材料切成薄片，置于载玻片上的水滴中，用挑针选择带有子实体的厚薄适中的病组织进行检测。植物病原真菌的鉴定常用这种方法。②石蜡切片。将病害标本用固定剂固定后脱水，经石蜡渗透及包埋，然后用轮转切片机将包埋病组织的石蜡块按一定方向切成薄片，将薄片粘贴于载玻片上，去蜡后进行染色，再将切片材料透明即可封固，进行镜检。这种方法步骤多，且易使材料变形和变色，一般适用于教学或研究真菌侵染过程的制片。

鉴定植物病原真菌时还要掌握该病原真菌的有关测量数据，如孢子的长宽度、孢子梗的长度、子囊壳的直径等。真菌营养体、孢子和子实体的测量，可借助显微镜测微尺进行。

真菌的分离培养

真菌病害不能单纯依靠子实体的观察鉴定而作出正确诊断。因为发病部位检查到的真菌，不一定是致病的病原物，有可能是在植物组织死亡后腐生的某些真菌。因此，真菌病害的诊断，必需经过病原菌的分离培养和接种试验，确定该病原菌致病性和症状。真菌的分离是将致病的真菌与其它杂菌分开，经纯化，使之扩大繁殖而得到致病菌的纯培养。植物病原真菌的分离常采用组织分离法和孢子稀释分离法。①组织分离法。切取小块病组织，取病健交界处边缘部分，经表面消毒、灭菌水冲洗，移植琼脂培养基平板上培养，形成菌落，如培养性状表现一致，可自菌落边缘挑取菌丝体纯化培养，再进行致病性测定和菌种鉴定。②孢子稀释分离法。以灭菌水将产生的病菌孢子配成悬浮液，用移植环蘸取悬浮液在琼脂平板上划线，在显微镜下沿线观察并用挑针挑取单孢子置琼脂培养基上培养。有时还可通过单孢子分离获得纯菌系菌株。真菌的培养有固体培养和液体培养两种。

病原真菌培养性状

培养性状的描述和记载是植物病原真菌鉴定中的重要资料，包括菌落质地、形状、孢子堆的干湿性，子实体和休眠结构的形成和所需时间；菌落正面和背面的色泽、有无色素分泌，有无特殊气味，生长率等。培养性状的描述要注明特定的培养条件，有时需用几种培养基进行培养观察。一些真菌的分生孢子器或子囊壳在琼脂培养基上不易形成，往往需要采用自然基质，进行模拟自然条件培养。有的真菌子实体的形成需要特定的光照条件。