基于dsRNA

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第一章绪论

1．1烟草花叶病毒及其基因组结构

1．2RNAi技术研究进展

1．3壳聚糖季铵盐纳米材料研究进展

1．4dsRNA纳米药物应用研究进展

1．5选题背景及研究内容

1．5．1选题背景

1．5．2研究内容

第二章dsRNA高效靶向基因筛选及原核表达载体构建

2．1材料与方法

2．1．1材料

2．1．2dsRNA高效靶向基因筛选

2．1．3原核表达载体构建

2．2结果与分析

2．2．1dsRNA体外转录制备

2．2．2不同dsRNA对烟草花叶病毒致病性影响

2．2．3原核表达载体双酶切验证

2．3讨论

第三章原核表达制备提取dsRNA及Small RNA测序

3．1材料与方法

3．1．1材料

3．1．2菌液诱导表达提取dsRNA

3．1．3诱导表达条件优化

3．1．4Small RNA高通量测序分析

3．2结果与分析

3．2．1原核表达制备提取dsRNA酶解鉴定

3．2．2IPTG诱导的最适条件

3．2．3Small RNA高通量测序结果分析

3．3讨论

第四章纳米药物制备及三种施药方式的效果比较

4．1材料与方法

4．1．1材料

4．1．2纳米药物的制备

4．1．3最大载药量及表征

4．1．4药物稳定性测试

4．1．5Small RNA高通量测序

4．2．1最大载药量及表征结果分析

4．2．2药物稳定性研究

4．2．3Small RNA高通量测序分析

4．2．4烟草花叶病毒相对表达量结果分析

4．3小结与讨论

第五章纳米药物荧光标记示踪

5．1材料与方法

5．1．1材料

5．1．2纳米药物荧光标记

5．1．3纳米药物的运输路径示踪

5．1．4原生质体制备及激光共聚焦观察

5．2结果与分析

5．2．1纳米药物在根茎叶中的分布

5．2．2纳米药物原生质体转化情况

5．3讨论

6．1全文结论

6．2本文创新点

6．3存在的问题

参考文献

致谢

作者简历

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