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AFL2基因的花遗传转化和AFL1基因的原核表达研究.pdf
中文摘要 月尼厢彳尼三基因是从苹果中克隆出来的腿因的同源基因,在苹果的成花过程 中起关键作用,长约1.4kb,它们的碱基序列在编码区有9096的同源性。为了更深入 地研究彳尼基因的表达产物及其与开花的分子机理,本研究以这一对基因为材料,进 行了原核表达和菊花转化的研究。 头:JB:小早菊;Jc:8月菊)的试管苗叶片为材料,研究了预培养方式、预培养时 间、感染时间、感染条件、共培养时间以及几种常用抗生素对菊花再生的影响.为 了筛选一种有效抑制农杆菌的抗生素,试验了4种抗生素对农杆菌生长的影响。结 果表明,预培养两天、感染时间10分钟、共培养2天、抑菌培养8至lO天,效果 最好。硫酸卡那霉素浓度为5mg/L时能有效抑制植物体的再生:羧苄青霉素浓度在 抑菌培养阶段和筛选阶段均为400mg/L时,既能有效地抑制茵体生长,又对菊花的 再生影响不大。 在已建立的菊花品种Jc再生体系和优化的农杆菌介导的转化体系上进行的菊花 遗传转化实验中,得到3株转化植株。虽然转化植株在发育早期均呈现出不同于非 转化植株的一些表型,但在发育后期又恢复了非转化植株的表型。 第二部分:在已经得到的AFLl基因克隆载体的基础上,经酶切,将AFLl基因 基因在大肠杆菌中成功表达,表达的/IFLl融合蛋白分子量大约为53J‘D,与预计的蛋 白质分子量相同,但只是蛋白表达水平较低。 关键词:菊花;遗传转化;AFLl和AFL2基因;原核表达 which Therewerea ofLFY AFLlandAFL2 cloned pair homologousgenes in fi?om the run.ionfloral 1.4kb,havekey approximately apple,long of alkalibase have order 90%homology.In apple,their sequences formatting the the ofAFL and tothemore research expresses thorough product gene molecularmechanismoffloral researchtakethis of formation,this pairgenes as researchedthe and materials,has prokaryoficexpression transformsofthem. the ofthine flowered First leaves glasscultivars(JA:Latebig part:By August lion;JB:Smallchrysanthemum;JC:In chrysanthem
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