首页分享一种野生米斛的选种培育方法.pdf

一种野生米斛的选种培育方法.pdf

来源：花匠小妙招时间：2024-11-18 02:01

《一种野生米斛的选种培育方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种野生米斛的选种培育方法.pdf（7页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)申请公布号 CN 104054575 A (43)申请公布日 2014.09.24 CN 104054575 A (21)申请号 201410236942.X (22)申请日 2014.05.30 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人霍山宝信园石斛开发有限公司地址 237200 安徽省六安市霍山县黑石渡镇清潭沟村 (72)发明人李维宝 (54) 发明名称一种野生米斛的选种培育方法 (57) 摘要本发明公开了一种野生米斛的选种培育方法生产工艺，包括采集野生种苗、人工培育和授粉、配制培养基、培养基培育、移植各个步骤。本发明能彻底改变了米斛自然授粉结。

2、实率低的问题，同时解决野外的种种环境因素制约，受气候影响较大，且病虫害严重且难以防治，保护了野生米斛，同时提高了野生米斛繁殖率，保护了米斛的繁殖。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书2页说明书4页 (10)申请公布号 CN 104054575 A CN 104054575 A 1/2 页 2 1. 一种野生米斛的选种培育方法，其特征在于包括以下步骤：（1）采集健康、生长性状良好的野生米斛，将采集的米斛幼苗置于大棚栽培生长，保持大棚湿度为 60%，夏季棚中的温度控制。

3、在 20-25，冬季棚内温度控制在 10-15 ；（2）待野生米斛生长开花至花期绽放，一般开花后一个星期授粉为佳，授粉环境须天气晴朗且无风，温度以 20为佳，采用人工授粉的方式： a、选取茁壮的米斛植株的花朵，拔除唇瓣； b、用牙签挑取花药，将牙签上的花药送入蕊柱腔，花粉粘在蕊柱腔内即可，动作要轻，以免刺伤花朵； c、一周内可观察授粉是否成功，若授粉成功，得到果荚；（3）配制培养基，培养基工作液包括大量元素、微量元素、铁盐和有机物质， a、所述大量元素浓度和成分为： 1650mg/L 的 NH4NO3， 1900mg/L 的 KNO3，。

4、 440mg/L 的 CaCl22H2O， 370mg/L 的 MgSO47H2O， 170mg/L 的 KH2PO4 ；所述微量元素浓度和成分为： 0.83mg/L 的 KI， 6.3mg/L 的 H3BO3， 22.3mg/L 的 MnSO44H2O， 8.6mg/L 的 ZnSO47H2O， 0.25mg/L 的 Na2MoO42H2O， 0.025mg/L 的 CuSO45H2O， 0.025mg/L 的 CoCl26H2O ；所述铁盐浓度和成分为： 27.8mg/L 的 FeSO47H2O， 37.3mg/L 的 Na2-EDTA2H2O ；所述有机物质浓度和成分为：。

5、 100mg/L的肌醇， 0.5mg/L的烟酸， 0.5mg/L的盐酸吡哆醇， 0.1mg/L的盐酸硫胺素， 2.0mg/L 的甘氨酸； b、大量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取大量元素药品，置于三角瓶中，分别加蒸馏水 100ml 左右于三角瓶中，再放到磁力搅拌器搅拌溶解，然后一一倒入 1000ml 的容量瓶中，注意 CaCl2 要后加，最后加蒸馏水定容至刻度，此为 10 倍液的大量元素母液； c、微量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取微量元素药品 , 按大量元素母液配制方法，配成 100 倍液的微量元素母液； d、铁盐母液的配制，。

6、在分析天平上按 a 中称取 FeSO4.7H2 O 和 Na2 EDTA 药品，配成 100 倍液的铁盐母液； e、有机物母液的配制，用分析天平按a中分别称取甘氨酸VB1 、 Vpp、 VB6、肌醇，配成50 倍有机物质母液；培养基的合成： a、加入药品用量筒取大量元素母液 100ml 倒入 1000ml 定容瓶中 , 用专用的移液管分别移取微量元素母液 10ml, 铁盐母液 10ml, 有机物母液 10ml, 均加入该定容瓶中 , 再用蒸馏水定容至刻度，摇匀 , 取 3/1 至 1/2 液体培养基移入白瓷缸中，称取琼脂丝 7 9g 和蔗糖 30g 放入白瓷缸中。

7、； b、加热通电加热，烧开后改用文火，至琼脂全部融化，透澈见底为止； c、调整 PH 值从电炉上取下冷却后，用 0.1N 的 NaOH 或 0.1N 的 HC1 调整 pH 值为 5.8 ； d、培养基的分装搅拌均匀后，分装到三角瓶中，每瓶约 25-30 ml，即 1 升培养基分装 40-35 瓶，最后用封口塑料膜包上瓶口，用线绳扎口，写上标号；（4）待种子成熟后，将种子掰开，取出壳内果实，用酒精进行消毒后，同时对配制好的培养基进行高温消毒灭菌，再放入培养室内的培养基中培养，培养条件：要求每日光照 12-16 小时，光照度 1000-。

8、5000lx，温度以 23-27为宜，湿度为 100%，保持畅通的空气；权利要求书 CN 104054575 A 2 2/2 页 3 （5）将在培养室培养后的幼苗取出，洗去培养基，移栽到无菌的混合土中，保持湿度为 60% 和温度为 25，当长出新叶时，即可移栽到种植地中。权利要求书 CN 104054575 A 3 1/4 页 4 一种野生米斛的选种培育方法技术领域 0001 本发明属于食品领域，具体涉及一种野生米斛的选种培育方法。背景技术 0002 米斛是我国濒临灭绝的珍稀物种，被誉为 “中华仙草” 之首，是霍山县独有的、拥有原产地地理标。

9、志的名贵中药材，具有极高的药用保健价值，具有生津益明、清热养阴、消炎止痛、清音明目功能及抗癌、抗衰老、抗辐射和增强免疫力等功效，尤其米斛多糖具有极高的保健和医疗作用。但由于其生境狭窄，繁殖困难，植株数量极少，因此人工种植霍山米斛具有广阔的前景，但缺乏优质种苗是霍山米斛种植业的瓶颈之一。虽然国内早有关于霍山米斛种苗生产的专利和文献报道，但是却没有见到利用试管开花授粉结果的方法来繁殖霍山米斛的。 0003 安徽省霍山县地处我省西部偏南，大别山北麓。介于北纬 33 03 -31 33 , 东经 115 52 -116 32 之间。平均海拔 500 米，属亚热带。

10、季风气候区。四季分明，雨量充沛，年平均气温 14.2 -16.1，最冷月平均气温 2，最热月平均气温 27.8。年降水量1100-1600mm，绝对湿度年平均15.6mb，常年相对湿度80%，全年 80% 天数200 天左右。无霜期为 220-270 天，无霜期长。自然环境优美，是霍山米斛品质形成的重要条件。 0004 米斛为兰科多年生附生草本植物，形曲不直，似蚱蜢髀，是米斛中的极品，为我县独有，拥有原产地地理保护标志和濒临灭绝的国家级珍惜名贵中药材，是国家野生中药材二级保护品种，有 “植物大熊猫” 之称，本草纲目记载：米斛生于悬崖峭壁之间、性。

11、微寒，有养胃生津、滋阴除热、补肾益精、明目之功效。以之代茶可开胃健脾，霍山米斛具有益精填髓、补五脏内绝不足，平胃气、长肌肉、益智除烦、清虚热、轻身延年之功效，清赵学敏、赵学凯本草纲目拾遗百草经语曰：米斛近时有一种形短祗寸许细如灯芯，色青黄、嚼之味甘，微有滑涎。 0005 米斛喜阴凉湿润环境，常附生于阴凉湿润的树上和岩石上。喜风，又有 “风大贯” 之称。尤其是半阴半阳的地方，附生有苔藓植被石灰岩石上和树上最好。其生长条件苛刻，米斛种子细小，不具胚乳（供幼苗生长的物质），在自然状态下，发芽率很低，成苗更难， 20 世纪。

12、40 年代 kundson 介绍了简便萌发兰花种子的培养基。为米斛种子培育试管苗奠定了基础，但米斛组织培养试管苗工作大多起步于 20 世纪 70 年代末至 80 年代初。20 世纪 90 年代，国内许多教育科研植物园等单位均开展此项研究工作，发展很快，至 90 年代末组织培养试管苗移栽大田成活率已达 95% 以上。 0006 由于野外的种种环境因素制约，受气候影响较大，且病虫害严重且难以防治，野生的米斛濒临灭绝，属于国家级珍惜名贵中药材，野外养殖繁殖率低，且成本较高。发明内容 0007 本发明的目的是提供一种野生米斛的选种培育方法。 0008 本发明通过以下技术方案。

13、实现：说明书 CN 104054575 A 4 2/4 页 5 一种野生米斛的选种培育方法，包括以下步骤：（1）采集健康、生长性状良好的野生米斛，将采集的米斛幼苗置于大棚栽培生长，保持大棚湿度为 60%，夏季棚中的温度控制在 20-25，冬季棚内温度控制在 10-15 ；（2）待野生米斛生长开花至花期绽放，一般开花后一个星期授粉为佳，授粉环境须天气晴朗且无风，温度以 20为佳，采用人工授粉的方式： a、选取茁壮的米斛植株的花朵，拔除唇瓣； b、用牙签挑取花药，将牙签上的花药送入蕊柱腔，花粉粘在蕊柱腔内即可，动作要轻，以免刺伤花朵；。

14、c、一周内可观察授粉是否成功，若授粉成功，得到果荚；（3）配制培养基，培养基工作液包括大量元素、微量元素、铁盐和有机物质， a、所述大量元素浓度和成分为： 1650mg/L 的 NH4NO3， 1900mg/L 的 KNO3， 440mg/L 的 CaCl22H2O， 370mg/L 的 MgSO47H2O， 170mg/L 的 KH2PO4 ；所述微量元素浓度和成分为： 0.83mg/L 的 KI， 6.3mg/L 的 H3BO3， 22.3mg/L 的 MnSO44H2O， 8.6mg/L 的 ZnSO47H2O， 0.25mg/L 的 Na2MoO42H2O，。

15、0.025mg/L 的 CuSO45H2O， 0.025mg/L 的 CoCl26H2O ；所述铁盐浓度和成分为： 27.8mg/L 的 FeSO47H2O， 37.3mg/L 的 Na2-EDTA2H2O ；所述有机物质浓度和成分为： 100mg/L的肌醇， 0.5mg/L的烟酸， 0.5mg/L的盐酸吡哆醇， 0.1mg/L的盐酸硫胺素， 2.0mg/L 的甘氨酸； b、大量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取大量元素药品，置于三角瓶中，分别加蒸馏水 100ml 左右于三角瓶中，再放到磁力搅拌器搅拌溶解，然后一一倒入 1000ml 的容量瓶中，注意。

16、CaCl2 要后加，最后加蒸馏水定容至刻度，此为 10 倍液的大量元素母液； c、微量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取微量元素药品 , 按大量元素母液配制方法，配成 100 倍液的微量元素母液； d、铁盐母液的配制，在分析天平上按 a 中称取 FeSO4.7H2 O 和 Na2 EDTA 药品，配成 100 倍液的铁盐母液； e、有机物母液的配制，用分析天平按a中分别称取甘氨酸VB1 、 Vpp、 VB6、肌醇，配成50 倍有机物质母液；培养基的合成： a、加入药品用量筒取大量元素母液100ml倒入1000ml定容瓶中；用专用的移液管分。

17、别移取微量元素母液 10ml, 铁盐母液 10ml, 有机物母液 10ml, 均加入该定容瓶中 , 再用蒸馏水定容至刻度，摇匀 , 取 3/1 至 1/2 液体培养基移入白瓷缸中，称取琼脂丝 7 9g 和蔗糖 30g 放入白瓷缸中； b、加热通电加热，烧开后改用文火，至琼脂全部融化，透澈见底为止； c、调整 PH 值从电炉上取下冷却后，用 0.1N 的 NaOH 或 0.1N 的 HC1 调整 pH 值为 5.8 ； d、培养基的分装搅拌均匀后，分装到三角瓶中，每瓶约 25-30 ml，即 1 升培养基分装 40-35 瓶，最后用封口塑料膜包上瓶口，用线。

18、绳扎口，写上标号；（4）待种子成熟后，将种子掰开，取出壳内果实，用酒精进行消毒后，同时对配制好的培养基进行高温消毒灭菌，再放入培养室内的培养基中培养 , 培养条件：要求每日光照 12-16 小时，光照度 1000-5000lx，温度以 23-27为宜，湿度为 100%，保持畅通的空气；说明书 CN 104054575 A 5 3/4 页 6 （5）将在培养室培养后的幼苗取出，洗去培养基，移栽到无菌的混合土中，保持湿度为 60% 和温度为 25，当长出新叶时，即可移栽到种植地中。 0009 本发明的有益效果：能彻底改变了米斛自然授粉结实率低。

19、的问题，同时解决野外的种种环境因素制约，受气候影响较大，且病虫害严重且难以防治，保护了野生米斛，同时提高了野生米斛繁殖率，保护了米斛的繁殖。具体实施方式 0010 一种野生米斛的选种培育方法，包括以下步骤：（1）采集健康、生长性状良好的野生米斛，将采集的米斛幼苗置于大棚栽培生长，保持大棚湿度为 60%，夏季棚中的温度控制在 22，冬季棚内温度控制在 12 ；（2）待野生米斛生长开花至花期绽放，一般开花后一个星期授粉为佳，授粉环境须天气晴朗且无风，温度以 20为佳，采用人工授粉的方式： a、选取茁壮的米斛植株的花朵，拔除唇瓣； b、用。

20、牙签挑取花药，将牙签上的花药送入蕊柱腔，花粉粘在蕊柱腔内即可，动作要轻，以免刺伤花朵； c、一周内可观察授粉是否成功，若授粉成功，得到果荚；（3）配制培养基，培养基工作液包括大量元素、微量元素、铁盐和有机物质， a、所述大量元素浓度和成分为： 1650mg/L 的 NH4NO3， 1900mg/L 的 KNO3， 440mg/L 的 CaCl22H2O， 370mg/L 的 MgSO47H2O， 170mg/L 的 KH2PO4 ；所述微量元素浓度和成分为： 0.83mg/L 的 KI， 6.3mg/L 的 H3BO3， 22.3mg/L 的 MnSO44H。

21、2O， 8.6mg/L 的 ZnSO47H2O， 0.25mg/L 的 Na2MoO42H2O， 0.025mg/L 的 CuSO45H2O， 0.025mg/L 的 CoCl26H2O ；所述铁盐浓度和成分为： 27.8mg/L 的 FeSO47H2O， 37.3mg/L 的 Na2-EDTA2H2O ；所述有机物质浓度和成分为： 100mg/L的肌醇， 0.5mg/L的烟酸， 0.5mg/L的盐酸吡哆醇， 0.1mg/L的盐酸硫胺素， 2.0mg/L 的甘氨酸； b、大量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取大量元素药品，置于三角瓶中，分别加蒸馏水 100m。

22、l 左右于三角瓶中，再放到磁力搅拌器搅拌溶解，然后一一倒入 1000ml 的容量瓶中，注意 CaCl2 要后加，最后加蒸馏水定容至刻度，此为 10 倍液的大量元素母液； c、微量元素母液的配制，在分析天平上按 a 中分别称取微量元素药品 , 按大量元素母液配制方法，配成 100 倍液的微量元素母液； d、铁盐母液的配制，在分析天平上按 a 中称取 FeSO4.7H2 O 和 Na2 EDTA 药品，配成 100 倍液的铁盐母液； e、有机物母液的配制，用分析天平按a中分别称取甘氨酸VB1 、 Vpp、 VB6、肌醇，配成50 倍有机物质母液；培养基的合。

23、成： a、加入药品用量筒取大量元素母液100ml倒入1000ml定容瓶中；用专用的移液管分别移取微量元素母液10ml,铁盐母液10ml,有机物母液10ml ，均加入该定容瓶中,再用蒸馏水定容至刻度，摇匀 , 取 3/1 液体培养基移入白瓷缸中，称取琼脂丝 8g 和蔗糖 30g 放入白瓷缸中；说明书 CN 104054575 A 6 4/4 页 7 b、加热通电加热，烧开后改用文火，至琼脂全部融化，透澈见底为止； c、调整 PH 值，从电炉上取下冷却后，用 0.1N 的 NaOH 或 0.1N 的 HC1 调整 pH 值为 5.8 ； d、培养基的分。

24、装搅拌均匀后，分装到三角瓶中，每瓶约 28 ml，即 1 升培养基分装 36 瓶，最后用封口塑料膜包上瓶口，用线绳扎口，写上标号；（4）待种子成熟后，将种子掰开，取出壳内果实，用酒精进行消毒后，同时对配制好的培养基进行高温消毒灭菌，再放入培养室内的培养基中培养，培养条件：要求每日光照 14 小时，光照度 3000lx，温度以 25为宜，湿度为 100%，保持畅通的空气；（5）将在培养室培养后的幼苗取出，洗去培养基，移栽到无菌的混合土中，保持湿度为 60% 和温度为 25，当长出新叶时，即可移栽到种植地中。说明书 CN 104054575 A 7 。