水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
【摘要】: 水稻既是世界上的主要粮食作物之一,也是科学研究的一种模式生物。转基因技术的飞速发展不仅对水稻的转基因育种产生了深远影响,也促进水稻功能基因组学的发展。但是,目前成熟的水稻转基因技术仅局限于少数常规粳稻品种,籼稻的基因转化仍然进展缓慢,因而对一些重要的水稻品种进行组织培养能力和基因转化效率的考察将会大大促进水稻转基因育种的长远发展。本研究选取了21个在农业生产上具有重要价值的水稻品种,通过对它们成熟胚的组培再生能力以及转基因效率的考察,发现这些水稻品种间再生能力和转基因效率均存在显著差异,并且受到愈伤日龄和培养基组成成分的重大影响。具体研究内容和结果如下:1.不同水稻品种成熟胚组培再生能力考察:(1)通过对21份水稻品种成熟胚的愈伤诱导实验,发现不同水稻品种之间愈伤诱导率(CIR,%)存在较大差异(普遍介于25%和70%之间);(2)对这些材料的愈伤进行连续继代培养后,观察发现基因型不同,愈伤的形态特征和增殖能力等方面出现明显区别;(3)采用两种分化培养基(NBm和DL3),分别选取日龄为15天、25天、35天的各材料愈伤进行植株再生培养,并以单粒愈伤平均出苗数(NRS)和植株再生率(RR)进行再生能力的考察,结果发现,植株再生能力与基因型和接种愈伤日龄均有密切关系,同时发现DL3分化培养基更适于大部分籼稻材料,而NBm分化培养基较有利于粳稻的分化。2.不同水稻品种基因转化能力的考察:利用农杆菌介导法对选取的14个水稻品种的愈伤进行Bt基因的转化实验,并对获得的转基因植株进行目的基因的PCR检测,结果共得到8个水稻品种的转基因阳性植株,且不同品种间基因转化率存在显著差异(0-25%),并与其相应的植株再生能力有关。目前,这些转基因苗正在海南繁种加代,进一步的抗虫能力检测正在进行中。
【学位授予单位】:杭州师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
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