2植物学(二)实验指导(孢子植物)解读
1、植物学(二)实验指导(被子植物)周吉源 刘树楠 编目录实验十七 兰藻门( cyanophyta )实验十八 绿藻门( Chlorophyta )实验十九 金藻门( Chrysophyta )、红藻门( Rhodophyta) 褐藻门( Phaeopyta )实验二十真菌门(Eumycophyta)、鞭毛菌亚门(Mastigomycotina )接合菌亚门( Zygomycocita )实验二十一真菌门(Eumycophyta)担子菌亚门(Basidiomycotina )实验二十二 地衣门( Lichenes )实验二十三 苔鲜植物门( Bryophyta )实验二十四 蕨类植物( Pteri
2、dophyta )石松亚门( Lycophytina ) 楔叶亚门( Sphenopphytina )实验二十五 蕨类植物( Pteridophyta )真蕨亚门( Filicophytina )实验十八 绿藻门( Chlorophyta )一、目的要求:观察、认识常见绿藻的形态、结构及生殖方式,从而掌握绿藻门的特征,及其在植物界 的演化地位。二、实验用品:显微镜、载玻片、烧杯( 50 毫升)、镊子、解剖针、吸管、吸水纸、碘液、衣藻、团藻 (包括装片标本) 、小球藻、栅藻、盘星藻、丝藻、水锦等新鲜标本,石莼的浸泡和腊叶标 本。三、实验步骤:1 衣藻属( Chlamydomonas)衣藻在静止的
3、水池、 水沟、 水坑中繁殖旺盛。 采回水样, 在显微镜检查, 若衣藻数量少、 体积小时,可加少量氮肥或人尿置水样中,并放在窗口向阳的地方。1 2 天以后,衣藻可大量繁殖,体积也增大。用吸管吸取一滴衣藻液装片, 置显微镜观察, 可见衣藻是呈卵园形的单细胞体。 在视野 中可看到它从各个方向自由游动的情况, 用吸水纸从盖玻片一端吸去一些水分, 使衣藻游动 减缓或稳定。仔细观察,在衣藻的细胞中有一个厚底杯状叶绿体,其杯底埋着一个蛋白核, 在细胞前端杯状叶绿体的开口处充满着透明的细胞质, 细胞质中央有一个园形细胞核, 红色 眼点也位于细胞前端一侧, 为了清楚地观察衣藻的鞭毛, 可以盖玻片一端注入一滴碘液
4、, 用 吸水纸从盖玻片另一端将碘液吸过去,使藻体染色。这时细胞核呈黄色,蛋白核呈兰黑色, 鞭毛因吸碘液膨胀加粗而易见。注意衣藻鞭毛着生的位置、数目、长短。2团藻属( Volvox )取团藻装片标本, 置低倍显微镜观察, 在视野中许多染成红色的空心球体, 这就是团藻。 由于团藻装片封胶很厚, 一般不能用高倍镜观察, 以防损坏玻片材料和显微镜镜头。 在低倍 镜下, 选择一个完整的团藻群体, 仔细观察团藻是由许多衣藻型细胞组成的群体。 这些细胞 在球状群体表面排列成单层。 共同居于胶质鞘中, 球状群体的中央是一个大空腔, 其内充满 水和胶质。 群体中的每个细胞周围又有一层很厚的胶质鞘, 由于各个细胞
5、的胶质鞘, 相互挤 压, 故从表面看去细胞呈多边形, 细胞之间借胞间连丝相联。 注意你在团藻的母群体中看到 子群体吗?团藻植物体的细胞在生理上有分工吗?3丝藻属( Ulothrix )丝藻固着生活在有流水经过的石头、 木桩和水草上, 常形成一层绿色绒毡, 多见于温度 较低的流动水中的石头上。用镊子取少许生活的或浸制的丝藻标本装片或装片标本, 置显微镜观察, 可见丝藻是由 一串圆筒状细胞构成的不分枝的丝状体, (在装片标本中丝状体染成兰黑色) ,基部的固着器 由于采集时损坏不易看见。 调节细准焦螺旋能清楚地看到丝状体的每个营养细胞中有一个环 带状叶绿体, 沿细胞内壁围成大半环, 其上有数个蛋白核
6、。 这种环带状叶绿体的细胞叫做丝藻型细胞。4水绵属( Spirogyra ) 水绵广泛生长于池塘、水沟、水坑或稻田中,一般漂浮水面,也有附着于水草、木桩、 石头上的。采集的标本,用手触摸有滑腻感,营养生长的藻丝呈鲜绿色。行有性生殖时,常 呈淡黄或黄褐色。取绿色水绵丝状体 1 2 条装片,置显微镜观察,注意水绵的丝状体是不分枝的,其细 胞多为圆筒形, 每个营养细胞内有 1 至数条带状的叶绿体, 它在细胞中呈螺旋状排列, 其上 有一列蛋白核,液泡很大,一个细胞核在中央,由原生质丝将它和周围原生质连着。为了更 清楚地观察水绵的细胞构造, 可在盖玻片一端注入一滴碘液, 用吸水纸从盖玻片另一端将碘 液吸
7、过去,使水绵藻体染色,这时可看到细胞核被染成黄色,叶绿体上的淀粉核呈蓝黑色, 你能区分细胞质和液泡吗?取已变黄褐色的水绵观察, 可能看到正在进行有性生殖的藻丝, 如无材料, 可取水绵有 性生殖装片观察。梯形接合: 两条水绵并列成对, 两条丝状体上相对应的细胞各生一个突起, 两个突起逐 渐长大, 接触处的细胞壁溶解。 二个突起连成一个短管叫接合管。 细胞中的原生质体收缩成 为一个配子, 由接合管流入相对的细胞中, 与对方同样的配子相接合成一个厚壁的合子 (也 称接合孢子) 。侧面接合: 在同一个丝体上的两个相邻细胞间发生的接合现象即为侧面接合, 侧面接合 不常见。 接合时两个细胞相邻处的侧壁发生
8、隆起, 横壁亦随之延伸, 不久此横壁近隆起处的 部分溶化, 二相邻细胞沟通, 一个细胞所形成的配子即通过横壁溶化处与相邻细胞的配子结 合成合子。水绵成熟的合子具有厚壁,厚壁上有各种花纹,壁内有细胞质、细胞核,并贮藏许多养 料。合子的抵抗力很强,经过休眠萌发成新的水绵。5石纯属( Utva )石莼生于海中, 藻体是两层细胞厚的膜状体, 基部有多细胞的固着器, 观察示范桌上的 石莼浸泡或腊叶标本。6轮藻属( Chara )取轮藻新鲜或浸泡标本, 用放大镜观察, 其外形颇似被子植物中的金鱼藻。 藻体下有分 枝的假根,上有直立细长的“茎” ,“茎”有“节”和“节间” ,“节”上生一轮小枝,小枝也 有“
9、节”和“节间”之分,小枝的“节”上生有单细胞刺状突起叫苞茎叶。再取一段有轮生小枝的“茎”置载玻片上,用低倍显微镜观察,可见“茎”和“小枝” 和节间中央有一个大细胞。 有的节间外还有一层细长的细胞环绕成鞘, 叫皮层细胞。 新鲜轮 藻标本在其节间细胞中可看到许多绿色粒状叶绿体,注意观察有无原生质流动?取生有精囊球和卵囊球的新鲜标本或装片标本, 置显微镜观察: 可见在雌雄同体的轮藻 中,卵囊球位于精囊球的上方。卵囊球呈长卵形,内有一个卵细胞,外围有 5 个螺旋状围绕 着卵囊的管细胞, 每个管细胞上面生有一个小的冠细胞。 精囊球是圆形, 在新鲜标本中成熟 的精囊球呈桔红色。若用镊子取下新鲜成熟的精囊球
10、,置载玻片水滴中,用解剖针挑破后, 加盖玻片,置高倍显微镜观察,则可看到看细胞。盾柄细胞、头细胞和精子囊丝、精子囊等 构造。四、作业: 1绘一放大的衣藻图,表明其各部分构造。 2绘水绵营养细胞及梯形结合生殖过程图。3 绘一段轮藻的藻体,表明卵囊球和精囊球着生的部位和形态。4 课后在校园采集数种常见绿藻标本,回实验室进行镜检。实验十九 金藻门( Chrysophyta )红藻门( Rhodophyta)褐藻门( Phaeopyta)一、目的要求: 观察、认识金藻门、红藻门、褐藻门常见代表植物的形态构造和生殖方式。二、实验用品: 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸管、 50 毫升烧杯、吸水纸、硅藻、
11、无隔藻新鲜标 本、紫菜、多管藻、海带等植物的浸泡及玻片标本。三、实验步骤:(一)金藻门( Chrysophyta )1羽纹硅藻属( Plnnuoaria ) 羽纹硅藻属的种类,广泛分布于淡水中,在校园附近的池塘、水沟、稻田采回的标本, 用吸管吸取 12 滴装片。置显微镜观察,可见藻体为黄棕色单细胞体。注意它的细胞壁由 上下两半套合而成, 形如一个透明的小盒子, 盒的正面叫瓣面 (壳面),侧面叫环面 (带面)。从藻体瓣面观察,细胞基本呈纺锺形,瓣面的花纹左右对称,羽状排列。在瓣面中央有 一条长裂缝称为脊缝,脊缝的中央和两端细胞加厚,分别称为中央节和极节。从藻体环面观察, 细胞近似长方形, 调节细
12、调节轮, 可见其细胞壁的上瓣和下瓣相互套 合着。2 观察示范显微镜下的中心硅藻玻片标本。此类硅藻多为海产,淡水分布很少。它们 与羽纹硅藻属的主要区别在于壳面花纹为辐射对称。3 无隔藻属( Vauchiria ) 无隔藻常固着于稻田或潮湿泥土的表面,成深绿色的毡绒状群丛,用镊子取23 条藻 丝装片,置显微镜观察。可见藻体是无隔管状具分枝的多核体,基部有无色分枝的假根,有 时在藻丝顶端可看到激动孢子囊,成熟的藻体上还可看到精子囊和卵囊。(二)红藻门( Rhodophyta )1 紫菜属( Porphyra )观察紫菜的腊叶标本, 可见其植物体为绿色叶状体, 基部有一固着器。 用镊子取一小块 浸泡的
13、紫菜标本装片,置显微镜观察,它的叶状体只有一层或两层细胞厚,外有胶质层。你 能看到细胞内的细胞核和色素体呢?2多管藻属( Poiysiphonia ) 多管藻的藻体是分枝的丝状体, 为多管型构造。 其中央有一列中轴细胞称为中轴管, 四 周的一圈细胞称围轴管。取多管藻雌配子体装片标本, 置显微镜观察。 注意在染成黄褐色的藻体侧面, 可看到园 形的囊果(果孢子体) ,它是由果孢受精后发育的。囊果的外面是多细胞呈瓶状的囊果被; 囊果内是染成褐色的果孢子囊,其内有果孢子,但在装片材料中难以看清。取多管藻雄配子停装片标本, 置显微镜观察, 可见雄配子体分枝顶端生有精子囊穗 (染 成深兰色),其上密生精子
14、囊。3观察示范桌上各种红藻腊叶和浸泡标本。 (三)褐藻门( Phaeophyta )1 海带( Laminaria japonica ) 观察海带的孢子体干制标本, 它明显地分为带片, 柄部和固着器三个部分。 再观察浸泡 的海带标本, 可见成熟的孢子体带片中、 下部两面或一面孢子囊密集聚生成棕褐色的孢子囊 群, 用镊子取少许孢子囊装片, 置显微镜观察孢子囊的形态特征。 若在显微镜下观察切片标 本,可更清楚地看到孢子囊为长棒状,囊与囊之间是侧丝(隔丝) 。许多孢子囊和侧丝聚生 成孢子囊群。取海带的带片切片标本,置显微镜观察,可分出以下几个部分:( 1)表皮由 12 层含有色素体的方形小细胞构成,
15、排列紧密,外有胶质层。 (2)皮层由多层细胞组成,排列疏松,靠外面的部分具粘液道。( 3)髓部由纤维状细胞构成。 观察海带的雌、雄配子体。用镊子取少许海带雌、雄配子体的浸泡标本,分别置两块载 玻片上,用解剖针轻轻将材料挑开,加盖玻片,置显微镜观察,注意海带的雌、雄配子体在 形态上有何区别?再取海带幼孢子体装片标本,置显微镜观察其形态特征。2 观察示范桌上各种褐藻腊叶和浸泡标本。四、作业1 绘羽纹硅藻的瓣面孔的和环面观。2 绘海带带片横切面一部分,表明各种构造。3 绘海带孢子体图。实验二十 真菌门( Eumycophyta)鞭毛菌亚门( Mastigomycotina )接合菌亚门( Zygom
16、ycocita ) 子囊菌亚门( Ascomycotina )一、目的要求:观察、 认识鞭毛菌亚门、 接合菌亚门和子囊菌亚门主要代表植物的形态、构造及生殖方式,从而掌握藻状菌纲和子囊菌纲的形态特征。二、实验用品: 显微镜、放大镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、蒸馏水、滴瓶、吸水纸、水霉、根 霉、酵母菌、青霉、曲霉、甘薯黑斑病、油菜菌核病菌等植物的新鲜标本、制片标本。三、实验步骤:(一)鞭毛菌亚门( Mastigomycotina )1 水霉属( Saprolegnia ) 水霉常生于水中腐烂的植物、昆虫、鱼类的尸体上,或寄生在鱼卵、小鱼体上。 在温暖季节,将几个死苍蝇或饭粒,放有盛有塘水的烧杯
17、中,几天后虫体或饭粒周围, 可看到白色绒毛,这就是水霉的菌丝体。用镊子取少许白色菌丝装片, 置显微镜观察, 可见水霉的菌丝体分枝茂盛, 菌丝无隔多 核。 有的菌丝顶端可以看到长园筒形的孢子囊。 注意孢子囊与营养菌丝之间有横壁隔开。 孢 子囊内产生许多卵形游动孢子,其前端(尖的一端)生有两条鞭毛。游动孢子从孢子囊顶端 小孔逸出,游动片刻立即停止,失去鞭毛,缩成球形,萌发后又形成一肾形的具两条侧生鞭 毛的游动孢子, 这就是水霉的双游现象, 你能看到空的孢子囊吗?空孢子囊内有无新的孢子 囊产生。这种现象称为孢子囊的层出形成。观察水霉的有性生殖器官,若新鲜材料看不到时,可取水霉装片标本,置显微镜观察,
18、 可见卵囊呈球形,内含数卵,精子囊为管状,生于卵囊附近,与卵囊抱合在一起,注意在它 们的接合处形成受精管。(二)接合菌亚门( Zygomycotina )最常见的是匍枝根霉( Rhizopus sioloniler ),又名黑根霉,匍枝根霉常滋生于面包、 馒头和富于淀粉的食物上,使食物腐烂变质。用放大镜观察滋生在馒头上的铺枝根霉, 其菌丝如白色绒毛, 满布基质表层。 注意在直 立菌丝顶端生有黑色小颗粒,是其成熟的孢子囊,有的菌丝伸入基质内,是其假根,但在放 大镜下不易看清。用解剖针从基质上, 轻轻挑取少许带有孢子囊的菌丝装片。 置显微镜观察, 可见匍枝向 下生有假根,假根有分枝吗?匍枝在着生假
19、根处向上生数枝孢子囊柄(梗) ,其顶端有一膨 大球形孢子囊,调节细调节轮,可看到孢子囊内有孢子囊轴和无数黑色孢子。取匍枝根霉有性生殖的制片标本,置显微镜观察,可见相对的两条(十) 、(一)菌丝, 各生出一个短枝, 两个短枝顶端接触处膨大, 成为配子囊, 配子囊与菌丝短枝之间有一横壁, 横壁后面部分是配子囊柄。 在制片标本中, 还可看到成熟的相互接触的配子囊, 它们接触处 的细胞壁已消失, 原生质相互融合形成一个大的黑色厚壁的合子, 称为接合孢子, 接合孢子 壁上有无花纹?(三)子囊菌亚门( Acomycotina )1 酵母菌属( Saccharomycos )最常见的是啤酒的一种酵母菌( S
20、accharmyces cerevisiae ),用于酿造啤酒。取 12 滴酵母液或米酒装片,置显微镜观察,可见菌体为单细胞,卵形,内有一个大 液泡,细胞质内含油滴,细胞核很小,注意观察酵母出芽生殖的情况。2 青霉属( Penicillium ) 青霉分布很广,是常见的污染菌。通常滋生于水果、蔬菜、面包、肉食、衣服及皮革等 物上。用放大镜观察生长在柑桔上的青霉标本, 其菌丝体白色, 有些部分已呈现蓝绿色, 这是 成熟分生孢子的颜色。用解剖针轻轻挑取少许白色部分菌丝装片, 置显微镜观察, 注意菌丝体有无分枝?菌丝 有无横隔?仔细寻找, 在有的菌丝上生有长而直立的分生孢生梗 (柄),梗的顶端分枝数
21、次, 呈扫帚状。 最末级的分枝呈瓶状, 叫小梗, 小梗上生一串分生孢子, 成熟的分子孢子呈园形, 蓝绿色。许多分生孢子梗上的分生孢子民成熟而散落,只留下小梗。3 曲霉属( Aspergillus )曲霉和青霉一样,也是最常见的污染菌,青霉生长的地方,曲霉也能生长。 用放大镜观察培养皿中新鲜曲霉标本, 可见白色菌丝体上有的部分呈现黄绿色、 深褐色, 是成熟的分子孢子的颜色。用解剖针挑取少许菌丝装片(或用玻片标本) ,置显微镜观察,可见曲霉与青霉在形态 上主要区别,是它的分生孢子梗不分枝,顶端膨大,呈园球形的泡囊。泡囊的四周满布放射 状排列的瓶状小梗,每一个小梗生出一串分生孢子。观察曲霉子囊果玻片
22、标本, 可见其子囊果为球状闭囊壳, 不规则地子囊分散在闭囊壳内。4甘薯黑斑病菌( Ophiostoma fimbriatum )在甘薯黑斑病菌浸染的薯块上, 用放大镜观察, 可看到一些黑色园形病斑, 中央略凹陷, 表面粗糙不平,病斑周围有灰色霉状物,是真菌丝体,注意病斑中心,往往可看到灰黑色刺状物,是其子囊果。用镊子取少许刺状物装片(或用制片标本) ,置显微镜观察,可见长颈 烧瓶状的子囊壳,子囊壳内有子囊,子囊梨形,内有8 个子囊孢子。5 虫草属( Cordyceps ) 虫草寄生在昆虫体内,形成菌核。观察虫草浸泡或干刺标本,外部为虫壳包裹的部分。是其菌核,菌丝已把虫体内部组织破坏,仅外皮残留
23、成一空壳,翌年入夏,菌核从虫体头部 生出有柄的头状物,叫子座。子座内生有许多囊壳。子囊壳内有子囊,每个子囊 8 个子囊孢 子。6 油菜菌核病菌( Selerotinia Sclerotiorum)油菜菌核病常在油菜花谢结荚时普遍发生, 是油菜中最常见的病害, 此菌主要危害油菜 茎的基部。观察病株,其茎基软腐,表面生出绵毛状菌丝体,产生分生孢子,进行传播,严重受害 的植株, 病菌已将其茎杆内部组织破坏而成空心, 里面生有白色菌丝体和鼠粪状的菌核。 在 早春或晚秋,气候条件适宜时,一个菌核萌发后可生出110 个褐色有柄的子囊盘。取玻片标本,置显微镜观察子囊盘的子实层,注意子囊和隔丝。7羊肚菌属(
24、Morchella )观察羊肚菌的子囊盘(子实体) ,它由菌盖和菌柄组成。菌盖的表面凹凸不平叫羊肚, 凹陷的部分着生子实层,取玻片标本,置显微镜观察子实层。四、作业:1 绘黑根霉形态图示菌体各部分构造。 2绘啤酒酵母的的出芽生殖图。3绘青霉、曲霉形态图,表示各部分。实验二十一 真菌门( Eumycophyta) 担子菌亚门( Basidiomycotina )一、目的要求:观察、 认识担子菌亚门主要代表植物的形态、 构造和生殖方式, 从而掌握担子菌亚门的 特征。二、实验用具: 显微镜、放大镜、载玻片、培养皿、镊子、解剖针、盖玻片、蒸馏水滴瓶、吸水低、蘑 菇新鲜或浸泡标本、 香菇干制标本, 伞菌
25、菌褶玻片标本、 茯苓菌核、 灵芝标本、 黑粉病麦秆、 木耳、银耳、秆锈菌麦秆和玻片标本。三、实验步骤:1 伞菌目( Agaricales )伞菌种类繁多,绝大多数腐生,常见的蘑菇、香菇、草菇等均属此目。观察蘑菇新鲜或浸泡标本,其担子果伞形,主要由菌盖(菌帽)和菌柄两部分组成。菌 盖的下方有许多放射排列的片状物, 叫菌褶。 子实层着生在菌褐的两面, 菌柄基部膨大部分 叫菌托, 这是子实体幼时外面的一层包被叫外菌幕, 当菌柄引长时, 残留在菌柄基部而形成 的,菌杆中部有一环状物叫菌环,它是残留在菌柄上的内菌幕。取伞菌横切片, 置低倍显微镜观察, 可见中央有一园形菌柄, 由菌柄向外辐射排列的许 多长
26、形条片,是其菌褶,转换高倍镜观察,在菌褶的两边生有子实层。注意担子和隔丝在子 实层上紧密排列着。移动玻片,仔细寻找,子实层上大部分的担子,可看到一个或二个担孢 子,具有四个担子孢子的担子在下片标本中很难找到。观察示范桌上香茄和草菇和草菇及其他伞菌标本,可见它们的担子果均为伞形。2多孔菌目( Polypcrales ) 观察灵芝标本,担子果木质,棕红色,表面覆盖一层坚硬和像漆样的光泽物质,分菌和 菌盖。用放大镜观察,在菌盖下方,密生圆形小孔,小孔内方是小管,子实层着生在小管周 围管壁上,担孢子成熟后,由管后散落。观察层孔菌标本,担子果呈半圆形,木质,多年生,每年新生的实体的年轮清楚。 观察茯苓菌
27、核,它生于松树的根际,球形,表面深褐色,多皱内部粉粒状白色。3木耳目( Auriculariales )和银耳目( Tremellales ) 观察木耳和银耳标本,比较它们担子果的颜色,外形有何区别? 4锈菌目( Urcdinales )禾柄锈菌( Puccinia graminis ) 此菌引起小麦的条锈病,是小麦中最主要病害。它的生活史中可产生5 种不同的孢子,有两种不同的寄主,故为转主寄生。见参考资料中的锈菌生活史图解。取被感染的小麦病株观察, 其茎、 叶上可看到许多棕红色的条纹病斑, 这是锈菌的夏孢 子堆。取玻片标片,置显微镜观察:( 1)夏孢子 在小麦叶横切片上,可看到许多菌丝贯穿叶
28、组织,在表皮下形成许多椭 园形、双核的夏孢子。夏孢子有长柄,群聚成夏孢子堆。夏孢子是绣菌繁殖最有效的方式, 一季以内可以反复侵害寄主数次,病株由一株或数株可蔓延到大面积。( 2)冬孢子 在观察成熟麦秆,其上有黑色病斑,是锈菌的冬孢子堆。在麦秆横切片上, 可看到从寄主表皮以上成堆生长的有柄的冬孢子。 注意具长长柄的冬 孢子,椭圆形,由横壁隔成两个细胞,外壁厚。( 3)性孢子器 在小檗叶横切片上,可见从上表皮内靠栅栏组织处,有从叶内向表皮 空出的瓶状性孢子器,其中有无数小的孢子 , 即性孢子。移动玻片,观察锈孢子器。( 4)锈孢子器 位一小檗叶的海绵组织中,形如杯状的构造,是锈孢子器,它的开口 突
29、出表皮以外, 边缘是一层单列细胞的包被, 底部有许多栅状排列的短柄。 柄的上端产生一 串锈孢子(即分生孢子) 。有些地方还可看到的锈孢子之间有扁小的不育细胞相间排列着, 以后这些小细胞消失,使成熟的锈孢子能散出去。5黑分菌目( Ustilaginales ) 本目菌类是最常见的禾本科植物寄生菌,引起禾谷类作物的黑粉病。 观察黑粉菌侵害的玉米病穗标本, 其上生有大小不一的病瘤。 瘤内寄主组织破坏, 仅一 层表皮,内生无数黑色粉末;这就是黑粉菌的厚垣孢子(冬孢子) 。四、作业:1绘伞菌褶图示担子及担孢子。2 绘伞菌担子果形态图。实验二十二 地衣门( Lichenes )一、目的要求: 观察识别三种
30、不同类型的地衣的形态特征。二、实验用品:显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、蒸馏水、滴瓶、吸水纸三种不同类 型的地衣标本,叶状地衣玻片标本:三、实验步骤 :观察三种类型的地衣标本,注意区别它们的外形。(1)壳状地衣原植体紧贴于基质上,很难采下。(2)叶状地衣原植体仅由菌丝形成假根,固着于基质上,便于采取。(3)枝状地衣原植体多分枝,直立或悬垂。 用镊子取小许叶状地衣,置载玻片水滴中,并用解剖针轻轻将材料分开,加上盖玻片, 用显微镜观察,在视野中你能看到组成叶状地衣的真菌菌丝和藻类细胞吗?取叶状地衣玻片标本,置显微镜观察,可见由上而下分为三层: 上层:由紧密交织的菌丝的组成。中层: 由
31、蔬松交织的菌丝和藻类细胞组成, 注意藻类细胞是成层排列还是分散在菌丝之 间?下层:也是由紧密交织的菌丝组成,并有成束菌丝形成的假根。 注意观察,能否区分出明显的藻胞层。四、作业1列表区别三种类型地衣的主要形态特征。2绘叶状地衣横切面,并表示各部分。实验二十三 苔鲜植物门( Bryophyta )一、目的要求:观察、认识苔鲜植物主要代表植物的形态、构造,从而掌握苔鲜植物的特征、生活史, 及其在植物界的演化地位。二、实验用品: 显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、培养皿、镊子、解剖针、蒸馏水滴瓶、吸水纸、地 钱、葫芦藓或金发藓属的新鲜或浸泡标本,玻片标本。三、实验步骤:(一)地钱属( Marchant
32、ia )喜生于阴湿地方。1 观察地钱配子体的新鲜标本, 它是绿色扁平二叉分枝的叶状体, 把标本置玻片中央, 在解剖镜下观察, 可看到叶状体背面有许多菱形或多角形的小区, 小区中央有气孔。 把标本 翻过来,在叶状体的腹面,可看到紫色的鳞片,在鳞片之间有假根。用镊子取少许假根制成临时装片,置显微镜观察,你能区别简单假根和舌状假根吗? 再注意观察,有的叶状体,在其背面分叉处,生有小杯状物,这是它的胞芽杯。胞芽杯 内生有许多胞芽, 胞芽是地钱营养繁殖的结构部分。 若用镊子取下一个胞芽杯, 置载玻片上, 用解剖针挑破杯壁,并抖出胞芽,加上盖玻片,在显微镜观察,注意胞芽的形态特征。2观察地钱雌株的新鲜或浸
33、泡标本,其雌器托由托柄、托盘两部分组成,若用镊子取 下一个胞芽状, 置载玻片上, 用解剖针挑破杯壁, 并抖出胞芽, 加上盖玻片, 在显微镜观察。 注意胞芽的形态特征。取地钱雌器托纵切玻片标本置显微镜观察。 可见其托柄顶端的两条芒钱之间的基部, 倒 悬着一列颈卵器。颈卵器的壁由一层细胞构成,颈部细长,内有一串小细胞,叫颈沟细胞, 腹部膨大,内有一个卵细胞,卵细胞上面还有一个细胞,叫腹沟细胞,有的颈卵器已成熟, 腹沟细胞、颈沟细胞已消失,仅有一个卵细胞在腹腔内,有的卵细胞已受精发育成孢子体。取孢子体的玻片标本,置显微镜观察。其孢子体可分三部分: 基足埋于颈卵器基部的组织中。蒴柄较短,一端与基足相连
34、,另一端与孢蒴相连。孢蒴孢蒴是孢子体的主要部分, 外面为单层细胞构成的壁所包被, 内有孢子和弹丝。3观察地钱雄株的新鲜或浸泡标本,比较雄器托与雌器托在形态上的差异,取雄器托 纵切片,置显微镜观察,可见雄托盘上有许多小孔腔,每个孔腔内有一个精子器。精子器呈 椭圆形,具短柄。(二)葫芦藓属( Funaria )、金发藓属( Polytrichum )都喜生于阴湿的林下、山坡、 沟边、路旁。葫芦藓本地分布较少,金发藓在校园附近潮湿地方,常成群生长。1观察金发藓新鲜标本。其配子体下有假根,上有茎、叶。茎长而直立,茎上着生螺 旋状排列的绿叶,较老部分的叶片变成褐色,有的已脱落。茎的地下部分,生有假根。金
35、发藓是雌雄异株。 取雄株新鲜标本观察, 茎顶宽而薄的特化叶片, 这种特化叶形成一 个莲座式的叶丛,形如一朵小花。春季采集的标本,在叶丛中生有许多精子器。用镊子取少 许精子器装片, 并用镊子柄轻压盖玻片, 置显微镜下观察。 其精子器为棒形囊状, 下有短柄。 有的精子器的壁被压破,精母细胞流出,有时还可看到成熟精子器顶端放出精子的情况。取真藓雄枝纵切玻片标本, 置显微镜观察, 可见枝顶生有许多精子器, 精子器之间有隔 丝。取金发藓雌株新鲜标本观察, 它的茎顶没有特化叶, 枝顶形如一个叶芽。 春季采集的标 本,枝顶中部生有颈卵器,用镊子折下枝顶,放在载玻片上,置解剖镜下,用两根解剖针将 叶片剥开,可
36、见瓶状颈卵器。未成熟的颈卵器呈绿色,成熟的颈卵器呈黄褐色,在材料上加 一滴水,盖上盖玻片,置显微镜观察,它的颈卵器在形态结构上均与地钱相似。再取真藓雌枝枝顶纵切玻片标本,置显微镜观察颈卵器的详细构造。2观察金发藓的孢子体。它生于雌配子枝顶。以基足插入雌配子体枝顶组织中,肉眼 不易看见。蒴柄细长。顶部有一个孢蒴。孢蒴是孢子体的主要部分,其结构较复杂。注意在 蒴上套有蒴帽,蒴帽是它的孢子体还是配子体?用镊子轻轻揭去它,可见孢蒴顶端有蒴盖, 再小心摘掉蒴盖,在蒴囊的开口边缘有一圈蒴齿。压破蒴囊,其内的黄色孢子挤出。取出藓孢蒴纵切片标本, 置显微镜观察, 可见孢蒴顶部最外面为蒴盖, 蒴盖下面两侧部 分
37、是蒴齿。蒴囊是孢蒴的主要部分,外有多层细胞构成的蒴壁,中央为蒴轴。蒴轴周围是造 孢组织, 造孢组织发育成孢子细胞, 每个孢子母细胞经减数分裂形成四个孢子。 孢子成熟借 蒴齿水湿与干燥发生运动而散发, 这是与地钱不同之处。 在造孢组织与蒴壁之前, 还可看到 有排列蔬松的细胞,其中有许多空隙,叫气室。再在显微镜下观察藓的原丝体装片标本, 原丝体是由孢子萌发的, 它是多细胞的分枝丝 状花,其上生芽,芽长成具茎,叶的配子体,配子体成长后,它就枯萎了。3观察示范桌上的葫芦藓及其了真藓的浸泡或干标本,比较它们在形态上与发藓有何 区别。四、作业:1 绘葫芦藓或其他真藓雌、雄枝顶纵切面,分别表示颈卵器,精子器
38、的结构及养生位 置。2绘金发藓植株外形,表示孢子体寄生于配子体上。实验二十四 蕨类植物( Pteridophyta )石松亚门( Lycophytina ) 楔叶亚门( Sphenopphytina )一、目的要求: 通过主要代表植物观察, 掌握石松亚门、 楔叶亚门的形态特征、 生活史及其在植物界的 演化地位。二、实验用品: 显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、培养皿、镊子、解剖针、蒸馏水滴瓶、吸水纸、石 松属、卷柏属、木贼属植物标本、孢子叶穗纵切玻片标本。三、实验步骤:(一)石松纲( Lyophyltina )1 石松属( Lycopodium ) 石松属的植物, 大多数分布于热带、 亚热带,
39、常生于山野树林, 我国南方各地都有分布。 观察石松属植物的腊叶标本,它们的植物体有根、茎、叶分化。其葡匐茎向上生直立小 枝,向下生不定根。根茎都是二叉分枝,叶细小,螺旋状排列在小枝上,孢子叶穗着生于直 立茎的顶端。用放大镜观察孢子叶穗,其孢子叶在孢子叶穗轴上,也是螺旋状排列,在孢子 叶的叶腋处能看到孢子囊吗?取石松孢子叶穗纵切片标本, 置低倍显微镜观察, 可更清楚地看到每个孢子叶的叶腋处, 有一个孢子囊。孢子囊内的孢子大小一样,即为同型孢子。2卷柏属( Sclaginella ) 卷柏也常生于阴湿环境中, 在校园附近树林、 山坡、 田边阴湿地方都有大片卷柏属的植 物生长。观察卷柏的新鲜标本,其
40、植物体较细弱,外形颇似藓类。茎多分枝,常铺匐于地面,具 背腹性。许多鳞片状小叶,在茎上排列成四行,两行较大,两行较小,仔细观察,在每个叶 腋生一小片状物,叫叶舌。在匍匐茎分枝处还生有无叶的根托,根托顶端生有不定根。孢子 叶穗生于枝顶。孢子叶的叶腋生孢子囊。注意孢子囊有两种,一个为大孢子囊,一个为小孢 子囊, 着生大孢子囊的孢子叶叫大孢子叶, 着生小孢子囊的孢子叶叫小孢子叶, 成熟的大孢 子囊呈黄色,成熟的小孢子囊呈红色。取卷柏孢子叶穗纵切玻片标本, 置低倍显微镜观察, 可见大小孢子囊分别生于大小孢子 叶的基部,大孢子囊内有四个大孢子,在切片上只能看到三个,小孢子囊内有许多小孢子。 卷柏孢子异型
41、,这与石松不同。异型孢子在植物界进化上有何重要意义?(二)楔叶亚门( Sphenopphytina ) 楔叶亚门植物,现代生存的只一属即木贼属(Equisetum )。常见的有问荆、 节节章。观察问荆、节节草的新鲜或腊叶标本,他们具有如下几个明显的特征。( 1)地上茎和地下茎都有明显的节和节间,每个节间有许多凸出的纵肋(脊),两个纵肋凹陷处为槽(沟) 。上下两个相邻间的纵助是互生的,因此槽也是互生的。(2)鳞片状的小叶轮生在节上,其基部连成管状的鞘,先端膜质非绿色。(3)地下茎生不定根。(4)地上茎有营养枝和生殖枝之分,营养枝绿色,节上轮生许多小枝;生殖枝不分枝, 无色,顶端单生一孢子叶穗。取
42、问荆孢子叶穗浸泡标本, 先用放大镜观察, 其孢子叶穗为长圆柱状, 是许多特化的孢 子叶聚生在一起组成的, 特化孢子叶顶面观是一个六角形的盾状物。 用镊子取一特化孢子叶, 置载玻片上,在解剖镜下观察。其六角形盾状顶盘的下面有一个短柄,短柄周围有5 10个孢子囊生于盾状顶盘的下面。取问荆孢子叶穗纵切玻片标本, 置显微镜下观察, 可见孢子叶穗中央是穗轴, 特化孢子 叶螺旋状排列在穗轴上, 注意孢片囊着生的位置, 每个孢子囊内有许多染成红色的同型孢子。 孢子的外壁附有弹丝。四、作业:1绘卷柏外形图、卷柏孢子叶穗纵切简图,表示各部分。2绘问荆外形图,问荆孢子叶穗纵切简图,表示各部分。实验二十五 蕨类植物
43、( Pteridophyta )真蕨亚门( Filicophytina )一、目的要求:通过真蕨亚门主要代表植物的形态观察, 从而掌握真蕨亚门的特征、 生活史, 及其在植 物界的演化地位。二、实验用品: 显微镜、解剖镜、放大镜、载玻片、盖玻片、培养皿、镊子、解剖针、蒸馏水滴瓶、 95% 酒精、吸水纸、海金沙、鳞毛蕨等常见的特生真蕨代表植物新鲜或腊叶标本、苹、槐叶苹等 水生真蕨代表植物新鲜或腊叶标本。 蕨地下茎横切玻片标本, 蕨原叶体新鲜与装片标本, 蕨 幼孢子体装片标本。三、实验步骤:真蕨亚门植物是现代最茂盛的蕨类植物, 广泛分布在各种生态环境。 在桂子山附近也有 多种真蕨植物生长。(一)厚囊
44、蕨纲( Eusporangiapsida ) 本纲植物的孢子囊壁由多层细胞组成,观察瓶尔小草属( Ophioglos-sum )和阴地蕨属 ( Botrychium )的腊叶标本,注意其植物体(孢子体)的外形及孢子叶穗着生情况。(二)薄囊蕨纲( Leptosporangiapsida )本纲植物的孢子囊壁由一层细胞组成。1观察陆生代表植物的形态。( 1)海金沙属( Lygodium ) 海金沙是常见的真蕨类植物,分布很广。它是攀援蕨类植物,以无限伸长的叶轴,攀援 在树枝或它物上生长。叶羽状或掌状分裂,营养叶(不育叶)和孢子叶(能育叶)在形态上 无区别。在孢子叶先端边缘并生二行孢子囊、孢子囊成熟
45、时为褐色。( 2)观察鳞毛蕨( Dryopteris )及其他常见陆生真蕨的新鲜或腊叶标本的外形,它们 的根状茎常有褐色鳞毛。向下生不定根,向上生大型复叶。注意叶脉的形态,孢子囊群着生 的位置、形态,有无囊群盖等特征。(3)取真蕨地下茎横切片标本,置显微镜下观察,最外面是表皮,表皮以内为一圈机 械组织, 薄壁组织占茎的大部分, 在薄壁组织中有两圈维管束彼此套生着, 外圈由多个圆形 或椭圆形的小维管束组成, 内圈由两个长条维管束组成, 这是网状中柱结构特征。 注意每个 维管束中心为木质部, 外围为韧皮部, 属同心维管束的周韧官束, 在内外圈维管束之间另有 两行染成深色的机械组织。(4)观察真蕨植
46、物的孢子囊。从蕨叶孢子囊群中,摄取少许孢子囊,放在载玻片上, 用解剖针将材料分开, 加上盖玻片, 置显微镜下观察。 可见每个孢子囊有一个多细胞组成的 柄,柄上生一个扁圆的囊。囊壁由单层细胞组成,其上有特殊细胞组成的环带。注意环带细 胞内切面及两侧的壁加厚,整修环带绕囊大半环。环带有何功用?在视野中有些孢子囊尚未开裂,可在盖玻片一端注入 95%酒精,用吸水纸从盖玻片另一端将酒精吸过去,立即观察, 能看到孢子囊开裂的情况,孢子囊内有许多孢子,孢子有无大小之分?另取孢子叶切片标本,置显微镜观察。( 5)观察真蕨原叶体(配子体) ,孢子成熟散落后,在自然条件,一般到第二年春天萌 发成一个心形的配子体,
47、叫原叶体,原叶体很小,具叶绿素,能独立生活,往往成丛的生于 蕨类植物的群丛之下,潮湿土壤上。取蕨原叶体新鲜标本装片(或装片标本) ,置显微镜下观察。心形原叶体前端凹陷处是 生长点,其腹面的后端生许多假根。精子器、颈卵器同生于原叶体的腹面。精子器球形,位 于原叶体腹面后半部假根附近, 颈卵器位于原叶体腹面前端凹陷处附近。 注意颈卵器的腹部 埋在原叶体组织中, 仅颈部露在原叶体表面并向后弯曲, 调节细准焦螺旋, 可见颈卵器内有 一个卵细胞, 有的卵细胞已受精成合子。 合子在颈卵器内发育成胚, 胚在配子体发育成幼孢 子体。再观察真蕨幼孢子体的新鲜标本或装片标本, 具幼叶的幼小孢子体寄生在配子体上,
48、不 久它的初生根穿出配子体,伸入土壤,变成一个独立生活的蕨孢子体。以后配子体即死亡。2观察水生真蕨代表植物的外形( 1)苹( Marxilea guadrifolia)苹常生池塘、水沟、水田中,根状茎在淤泥中匍匐生长,向下生不定根,向上生叶,叶 有长柄,上生四片小叶,叶柄随涨水伸长,故叶片总是露出水面,呈田字形,孢子囊群生于 特化的孢子囊果内,孢子囊果形如小豆,生于叶柄基部,大小孢子囊在同一孢子囊果内。( 2)槐叶苹( Salvinia natans )槐叶苹也常生于池塘、 水田、小溪中。 它的外形颇似槐树的羽状复叶。 植物体(孢子体) 有茎、叶之分;无根。茎细弱匍匐生长,每节生三叶,上面二片
49、叶绿色,扁平,浮于水面, 下面一片叶裂为细丝,形如须根,沉于水中,叫沉水叶(吸水叶) ,功用如根。大孢子囊生 于大孢子果内,小孢子囊生于小孢子果内。四、作业:1 绘蕨的孢子囊,表示各部分。2 绘蕨原叶体,表示各部分。 3简述蕨类植物孢子体,配子体与苔藓植物的区别。参考文献一、淡水藻类标本的采集方法(一)采集:淡水藻类分布极广, 大体上分为水生和气生的两大类。 水生的, 生长在各种水体 (沟渠、 池塘、沼、湖泊、水库、泉水、溪流、瀑布、河流等)中;气生的,生长在潮湿或干燥的岩 石、墙垣、高等植物的茎叶表面, 混生在苔藓植物之间以及土壤和长年积雪的地面和夹层中。 此外, 还有共生在其他生物体内的,
50、 可以说在任何地方都可以采到藻类, 只是在不同的环境 下,藻类区系有不同罢了。采集不同生境中的藻类,应根据它们的生长情况采用不同的采集方法。1 着生藻类对于生在其他物体上较大型的藻类,一般用手或镊子采取,应尽可能 采取整体植物,包括它们的基部和着生部分。因此,生长在岩石上的最好是用小刀刮取,生 长在水草上的最好是用剪刀剪取生有藻类最多的一部分一同保存, 生长在土壤上的最好是用 刀铲取,尽可能少带泥土(如专作土壤藻类研究,则应分层土进行培养)生长在树树杆上的 最好用刀削取, 生长在高等植物叶上的最好是选手一有藻类最多的整个叶片 (尽可能记上此 种高等植物的名称) ,保存方法:水生的一般用浸液,气
51、生的一般用干制(方法见后) 。微型藻类也有不少是着生的,更有一些是混生在其他植物(如苔藓)之间的,不但有水 生的也有气生的,在有这些藻类生长的部位常具有各种颜色的斑块、斑点、颗粒、粘质层、 壳皮状薄膜等标志, 应选择藻类生长最多的部分有刀刮取、 削取或用剪刀剪取。 混生在苔藓 植物之间的可连苔藓一同采取。 岩石上不易刮下的种类, 如急流中石上的兰藻、 褐藻、 红藻; 可敲取或拾取小型石块一同保存。2漂浮藻类在各种静水水体中常漂浮着一些丝状藻类的藻块,采集时应注意采取 同一藻块上不同颜色的部分或不同颜色的藻块, 特别是变成黄褐色的部分, 因为这些部分常 为生殖时期的植物体,标本是液浸。如为细长、
52、分枝的藻类,不宜折取标本的一段应尽可能采取整体,如太长,可同时采取 较多的标本作成干制标本。3 浮游藻类在水面较宽、较深的水体中,一般用 25 号筛绢来回捞取,在同一水体 中,最好在不同部位和不同深度的地方捞取标本,然后放在同一标本瓶中固定。在小水体和浅水域 (如湖泊、 水库的浅水港和沼泽等) 中采取浮游藻类不宜用网来回捞 取,最好是用碗取水注入网中过滤,要多在水草丛生的下部取水,尽可能不带入泥沙。没有 网时,可用镊子多次采取水草在瓶中搅洗,也可采得较多的藻类。浮游藻类标本中常有不少鞭毛类种类,对这些类藻类的固定以随采随即固定为好。4雪藻在长年积雪的地区,不论是高山或两极都可发现成片的“红雪”
53、、“绿雪”或“黄雪”,甚至达若干里宽。在这些雪里经常生长着一种或一种以上占优势的极耐寒的特 种藻类。 由于这些藻类具有不同的色素遂成不同颜色的雪。 因此在采集时, 对不同地区有色 的雪, 即或是同一颜色也可能是不同的藻类, 一定要分别采取标本, 即在同一地区中有不同 颜色的各部分也应分别采取标本, 采集雪样最好用塑料代表上较多的雪带回驻地, 在雪未溶 化前即固定。 固定的方法是在较大的容器中用等量的雪和配好的固定液搅匀, 在雪逐渐溶解 置 24 小时后,吸取底部沉淀的藻类放在标本瓶中加入新鲜的固定液固定。不同颜色的标本 应分别保存并在采集记录中注明在野外采集时的颜色,分布区域的面积和垂直分布的
54、深度。 如有可能,可在野外摄取采色照片。如带回驻地不便,亦可用标本瓶随采随加固定液固定。 即将标本瓶中已装好的 1 毫升福尔马林和 2 毫升的甘油加水至 10 毫升摇匀,再加上有色的 雪 10 毫升,对多种颜色的雪最好是至少采两瓶标本。(二)保存 :供一般分类研究用的淡水藻类标本有液浸的和干制的两种:1液浸标本: 我们所用的保存液的配方为:福尔马林1毫升,甘油 10毫升,水 86 毫升。一般淡水藻类都可用此液保存。注意保存液的用量应为藻类标本的量(去水的)的 2 倍。如标本瓶的容量为 21 毫升好装上藻类标本 7 毫升(约为瓶高的 1/2 ),保存液 14 毫升 (约为瓶的 2/3 )。采集的
55、标本最好是采集时或采集后不久即加上保存液,不宜放太长,特 别是在夏季。另一法是在外出采集之前,每个标本瓶中装上福尔马林 1 毫升,甘油 2毫升,采集时, 如采用网采的浮游藻类即将代水的标本注满瓶中, 摇匀即可, 如系丝状藻类则先在瓶中注入 约达 2/3 高度的水摇匀, 再放入去水的藻类把瓶装满, 再来回颠倒标本瓶, 使固定液渗透到 标本的各部,如系雪藻,则先注入 1/2 高的水,摇匀后,再放有色的雪、装满、摇匀。标本号数的标签,应用软软的铅笔(H或HB写好放入瓶内,并在瓶盖上用铅笔写上同样的号楼。2干制标本即不经固定, 天然风干的标本, 标在通风处干后即可放入牛皮纸状中保存。 除在纸代内 放上
56、采集号签外, 并在纸代左上角注上同样的采集号数, 气生藻类一般都以干制为好, 水生 的大型藻类如轮藻, 刚毛藻等如量大瓶小便固定时也采用此法, 最好是要采取较多的整体植 株,成束地风干。(三)其他应注意事项1 采集的记录应尽可能逐项详细填写。2所采的标本如不能及时固定,可不在瓶中装满标本盖上盖子,只可装上至多至瓶高2/3 的部分,留下 1/3 的空间,同时带回驻地后应立即将盖子打开,让瓶内通风。3干制标本一般都应多采一点,绝对不可先用保存液固定,后再风干或烘干。 4应注意采集小水体、浅水体,特别是沼泽区中水草上的以及急流中石上的藻类。5标签上的号数要用“ H或“ HE”这样的铅笔写,字写大,写
57、清楚。二、蕨类植物原叶体的培养和标本制作法蕨类植物的原叶体固然在野外可以采得, 但机会较少, 往往不易采到, 故可用孢子在室 内培养,以一平底瓦缸或玻璃缸,内盛水,将一瓦片放入水中,凸的一面向上,缸内水的用 量使瓦片两边浸没在水中, 将蕨类植物的孢子散布在瓦片上, 缸口用木板盖上使空气温度变 高,放在比较阴湿而温暖之处,约两周即得绿色的叶状体,即原叶体。原叶体的保存可用浸制, 但欲观察其两性器官, 必须染色做成整体封藏的玻片标本, 其 方法与步骤如下:1. 将活的原叶体在 F? A? A固定液(F? A? A固定剂的配方冰醋酸福尔马林各5cc加 70%酉精90cc,即成)固定在12至24小时;2. 用50%酒精洗12小时,换一次;3. 换清水洗净,约需 12小时,最好换两次水;4. 以代氏苏水精染色 10分钟(配制方法另附) ;5. 以清水冲洗 10分钟;6. 先在 35%,后在 50%的酉精各浸 3分钟;7. 盐酸酉精中浸几秒钟(以适当的颜色深度为依据);
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