在单子叶C4植物中表达外源基因的病毒载体及应用制造技术
本发明专利技术公开了在单子叶C4植物中表达外源基因的病毒载体及应用。以在大范围田间病毒病调查中偶然发现的侵染玉米仅引起轻微花叶症状的甘蔗花叶病毒分离物SCMV‑mDu的基因组RNA为模板,扩增得到全长cDNA,构建至植物双元表达载体得到侵染性克隆pSCmDu,并在pSCmDu病毒基因组中插入两侧分别融合单酶切位点的预期表达基因编码区序列,得到病毒载体,转化土壤杆菌得到SCMV‑mDu VOX系统,该系统适用于在玉米、高粱等单子叶C4植物中高效表达蛋白、多肽,且SCMV‑mDu侵染植物引起的症状轻微,可用于基因的高效、系统性表达,在重要单子叶C4作物种质资源的改良及遗传育种领域应用前景广阔。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物基因工程,具体地说,涉及一种在单子叶c4植物中表达外源基因的病毒载体及应用。
技术介绍
1、在全球范围内,玉米( zea maysl.)和高粱[ sorghum bicolor(l.)moench]是广泛种植的禾本科c4作物,它们不仅是重要的粮食作物,而且还是生产牲畜饲料和制造生物燃料的重要原材料。由于现阶段针对玉米和高粱的遗传转化技术存在周期长、成本高和效率低下等问题,限制了对它们基因功能的大规模、快速研究;同时这一技术限制也阻碍了在玉米和高粱等c4植物中快速、高通量地表达异源的功能性蛋白,如抗性相关蛋白、小肽、抗原决定簇和抗体等的研究。因此,开发稳定转基因技术的替代方法具有必要性。
2、研究表明,由病毒介导的过表达(virus-mediated overexpression,vox)技术可用于在植物中高通量、瞬时和快速表达蛋白,从而促进对植物基因功能的研究(gleba,klimyuk,&marillonnet,2007...
【技术保护点】
1.在单子叶C4植物中表达外源基因的病毒载体,其特征在于,所述病毒载体的构建方法包括:
2.根据权利要求1所述的病毒载体,其特征在于,所述报告基因为GFP,所构建的在单子叶C4植物中表达外源基因的病毒载体为pSCmDu::GFP。
3.根据权利要求2所述的病毒载体,其特征在于,所述病毒载体的全序列由SEQ ID NO:1~2依次连接而成。
4.含有权利要求1-3任一项所述病毒载体的生物材料,所述生物材料为表达载体、工程菌或宿主细胞。
5.单子叶C4植物外源基因表达系统,其特征在于,所述表达系统是将外源基因的编码区插入经B...
【技术特征摘要】
1.在单子叶c4植物中表达外源基因的病毒载体,其特征在于,所述病毒载体的构建方法包括:
2.根据权利要求1所述的病毒载体,其特征在于,所述报告基因为gfp,所构建的在单子叶c4植物中表达外源基因的病毒载体为pscmdu::gfp。
3.根据权利要求2所述的病毒载体,其特征在于,所述病毒载体的全序列由seq id no:1~2依次连接而成。
4.含有权利要求1-3任一项所述病毒载体的生物材料,所述生物材料为表达载体、工程菌或宿主细胞。
5.单子叶c4植物外源基因表达...
【专利技术属性】
技术研发人员:周涛,杜开通,彭得智,王皓,范在丰,
申请(专利权)人:中国农业大学,
类型:发明
国别省市:
相关知识
植物病毒载体系统研究及应用.doc
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