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一种火龙果悬浮细胞培养方法

来源：花匠小妙招时间：2025-10-29 07:50

摘要：本发明公开了一种火龙果悬浮细胞培养方法，包括以下步骤：选取火龙果茎，切成茎段消毒后备用；将茎段消毒后接种于诱导培养基中，在光照下培养后得到火龙果愈伤组织；将火龙果愈伤组织转接于继代培养基，在光照下培养后得到火龙果黄色疏松愈伤组织；将火龙果黄色疏松愈伤组织转接到一代悬浮细胞培养基中遮光振荡培养；取培养液中的细胞悬浮液，转接至二代悬浮细胞培养基中培养，蓝光光照12h、遮光12h条件下振荡培养即得到火龙果悬浮细胞。本发明建立红心火龙果的悬浮细胞培养体系以及一种可提高火龙果悬浮细胞中可溶性蛋白、类黄酮、总酚等代谢产物的培养方法，可为火龙果...

主分类号：

A01H4/00(2006.01)(通过组织培养技术的植物再生)

权利要求：

1.一种火龙果悬浮细胞培养方法，其特征在于：包括以下步骤： S1:选取健康无病害的火龙果茎，切成茎段消毒后备用； S2：将S1准备的茎段消毒后接种于诱导培养基中，在光照下进行培养后得到火龙果愈伤组织； S3：将S2获得的火龙果愈伤组织转接于继代培养基，在光照下进行培养后得到火龙果黄色疏松愈伤组织； S4：将S3获得的火龙果黄色疏松愈伤组织转接到一代悬浮细胞培养基中进行培养，进行遮光振荡培养； S5:取S4培养后的培养液中的细胞悬浮液，转接至二代悬浮细胞培养基中进行培养，按序依次经过蓝光照射培养以及遮光振荡培养后即得到火龙果悬浮细胞；所述步骤S2中，所述诱导培养基的配方为：MS基本培养基+NAA1.0mg/L+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.7％，所述诱导培养基的pH为5.5-6.0；所述步骤S3中，所述继代培养基的配方为：MS基本培养基+TDZ 0.4mg/L+KT0.8mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.7％，所述继代培养基的pH为5.5-6.0；所述步骤S5中，所述二代悬浮培养基的配方为：MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+30g/L蔗糖，所述蓝光照射的培养条件为：在温度25℃下使用波长450nm、光强为5000Lux的蓝光照射二代悬浮细胞培养基12小时。 2.根据权利要求1所述的一种火龙果悬浮细胞培养方法，其特征在于：所述步骤S2以及所述步骤S3中，所述培养的条件为：在温度25℃、光照12h/d、光强1500-1800Lux的条件下培养14天。 3.根据权利要求1所述的一种火龙果悬浮细胞培养方法，其特征在于：所述一代悬浮细胞培养基与所述二代悬浮细胞培养基的配方相同。 4.根据权利要求1所述的一种火龙果悬浮细胞培养方法，其特征在于：所述步骤S4和S5中，遮光振荡培养的条件为：在25℃、100-120r/min的摇床中遮光振荡，且步骤S4中，培养的时间为14天。 5.根据权利要求1所述的一种火龙果悬浮细胞培养方法，其特征在于：所述步骤S5中，采用的培养具体为蓝光与遮光培养交替培养，且蓝光照射的时间与遮光时间等同，培养的时间为14天。