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番茄遗传转化体系的建立及LC和GFP标记基因的表达

来源:花匠小妙招 时间:2025-10-29 00:12

作者:苏彩霞; 李君明; 霍秀文; 范维强; 刘磊lcgene绿色荧光蛋白番茄遗传转化

摘要:本研究以小型番茄(miniature Lycopersicon esculentum Mill.)Micro-Tom为试材,建立其以子叶、下胚轴为外植体的高效、稳定再生体系及遗传转化体系。结果表明,以子叶、下胚轴为外植体时,诱导愈伤组织和芽分化的适宜培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L,芽分化率均可高达92%。两种外植体适宜的生根培养基均为MS+NAA0.1mg/L。同时,通过根癌农杆菌介导法,建立了Micro-Tom的遗传转化体系。而乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化番茄的效率,当AS=180μm/L时,芽分化率为52.8%;OD600=0.14是转化的最佳菌液浓度;子叶外植体与农杆菌共培养后,经过诱导,根的再生,获得了抗性苗,利用绿色荧光蛋白(GFP)检测和整株表型为紫色(Lc)基因的表达,初步证明外源基因已经整合到Micro-Tom中,为番茄激活标签体系的建立奠定了基础。

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