特殊染色和组织化学技术:神经髓鞘染色
主要方法是砂罗铬花青法。
1.试剂配制
(1)10%硫酸铁铵水溶液:i
硫酸铁铵1111 10g
蒸馏水 1 l00ml
(2)砂罗铬花青染液:i
砂罗铬花青R 1111111110.2g
蒸馏水1111111111111111111196ml
10%硫酸铁铵水溶液1111111114ml
浓硫酸111111111111111111110.5ml
依次溶解,l充分混合。
(3)荧光桃红染液:i
荧光桃红B1111111111111111110.5g
0.5%氯化钙水溶液11111111100ml
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中(不少于3d为宜),l常规脱水、i石蜡包埋和切片(切片厚4~6扯m)。
(2)切片脱蜡至水。
(3)滴加砂罗铬花青染液于切片上,l室温下染15~20min。
(4)倾去染液,l流水冲洗1~2min。
(5)10%硫酸铁铵水溶液分化1~5min,l至胶原纤维和肌纤维接近无色或淡灰色,l髓鞘呈清晰的蓝色为止。每次取出切片水洗后,l应在显微镜下观察控制。
(6)流水冲洗5~l0min。
(7)荧光桃红液复染1~3s。
(8)稍水洗后,l各级乙醇脱水。
(9)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果髓鞘呈鲜蓝色,l红细胞呈深蓝色,l神经细胞细胞质、i肌纤维和胶原纤维呈鲜红色,l细胞核和核仁呈蓝色,l神经纤维不着色。
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