一种环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法
本发明涉及月季繁育的
技术领域:
,尤其涉及一种环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法。
背景技术:
:月季既是我国十大名花之一,也是四大鲜切花之一,应用范围十分广泛。嫁接法、扦插法是两种较为常用的繁殖方法。但在实际生产中,有一些月季品种扦插不易生根,或者扦插后月季产生的根系对土壤逆境适应性差,植株生长不良,只能采用嫁接繁殖。而嫁接苗在栽培过程中,砧木会产生大量的萌蘖,人工去除费时费力。萌蘖消耗大量营养,严重影响嫁接月季的生长、产量以及景观价值,而且若是砧木选择不当依然不能克服月季根系对土壤逆境适应性差的问题。尤其在园林中,由于月季嫁接苗的砧木萌蘖旺盛生长,经常会取代接穗月季而彻底改变园林景观。技术实现要素:本发明的目的在于提供一种环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法,既能解决月季扦插生根困难的问题,又能增强月季对土壤环境胁迫的抗性,还能避免月季嫁接苗砧木萌蘖多的问题。为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:本发明提供了一种环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法,包括如下步骤:(1)环剥:环剥月季枝条和砧木枝条,收集环剥的砧木皮部;(2)嫁接:将收集的砧木皮部环状贴皮嫁接到月季枝条被环剥的部位;(3)剪取插条:所述砧木皮部与月季枝条愈合后,将月季枝条从环状贴皮的形态学下部剪下,修剪成10~15cm的插条;(4)插条处理:将环状贴皮嫁接好的月季插条的贴皮部分浸泡在生根溶液;(5)扦插:将插条带有环状贴皮的扦插端插入到扦插基质中;(6)插后管理:扦插完成后先浇一次透水,控制扦插基质湿度为75~85%;空气相对湿度为70~95%;在扦插后至未生根前控制温度为10~15℃,7~10天浇一次水;插条生根后,控制温度为20~25℃,3~5天浇一次水。优选的,所述环剥的深度至月季枝条的韧皮部和砧木枝条的韧皮部,且均不伤及木质部。优选的,所述环剥的长度为1.0~1.2cm,所述砧木皮部能够完全包覆月季枝条被环剥的部位。优选的,所述砧木枝条为无刺多花蔷薇、弯刺蔷薇、natebelay蔷薇或法国蔷薇的枝条,所述砧木皮部没有芽眼,所述月季枝条为‘金秀娃’月季枝条。优选的,剪取插条前,所述月季枝条不脱离月季植株,所述环剥和嫁接在活体月季枝条上进行。优选的,所述插条上保留2~3个芽,不留叶片或保留顶部复叶的2~3片小叶。优选的,所述生根溶液为abt2号生根粉溶液,浓度为45~55mg/kg,所述浸泡的时间为2~4h。优选的,所述扦插基质为蛭石。本发明提供的环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法,插条的成活率较高,生根情况良好,证明本发明的方法是可行的,且以无刺多花蔷薇为砧木的嫁接自然成活率达到90%,接后扦插平均生根率达到65.9%。本发明为扦插不易生根的月季品种提供了一种新型的无性繁殖方法,也为其他扦插生根困难的植物的无性繁殖提供参考。附图说明图1为环状贴皮嫁接示意图;图2为月季枝条剪取部位示意图;图3为五种供试材料的染色体倍性鉴定结果;a:无刺多花蔷薇2n=2x=14;b:natebelay蔷薇2n=2x=14;c:弯刺蔷薇2n=2x=14;d:法国蔷薇2n=2x=14;e:月季‘金秀娃’2n=4x=28;标尺=1μm;图4为四种嫁接组合扦插后得到的植株的染色体倍性鉴定结果;图5为以月季‘金秀娃’作砧木无刺多花蔷薇作接穗和以无刺多花蔷薇作砧木月季‘金秀娃’作接穗时的生根情况;a:无刺多花蔷薇/月季‘金秀娃’;b:月季‘金秀娃’/无刺多花蔷薇;标尺=1mm;图6为无刺多花蔷薇扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插16d;c:扦插17d;d:扦插20d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图7为无刺多花蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插16d;c:扦插18d;d:扦插20d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图8为natebelay蔷薇扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插14d;c:扦插16d;d:扦插20d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图9为natebelay蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插17d;c:扦插20d;d:扦插22d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图10法国蔷薇扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插15d;c:扦插18d;d:扦插20d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图11法国蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插18d;c:扦插20d;d:扦插23d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图12弯刺蔷薇扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插10d;c:扦插12d;d:扦插14d;e:扦插20d;f:扦插25d;标尺=1mm;图13弯刺蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插过程中不定根形成的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插12d;c:扦插14d;d:扦插20d;e:扦插25d;f:扦插30d;标尺=1mm;图14月季‘金秀娃’扦插过程中的形态学观察;a:扦插0d;b:扦插20d;c:扦插25d;标尺=1mm;图15无刺多花蔷薇插条的解剖结构观察;ph:韧皮部;xy:木质部;pi:髓;箭头表示根原基;标尺=1mm;a、c:4x;b、d、e、f:10x;图16无刺多花蔷薇嫁接月季‘金秀娃’插条的解剖结构观察;co:皮层;ph:韧皮部;xy:木质部;箭头表示根原基;标尺=1mm;a~d:4x;e~f:10x;图17弯刺蔷薇插条的解剖结构观察;ph:韧皮部;xy:木质部;pi:髓;箭头表示根原基;标尺=1mm;a、c、d:4x;b、e、f:10x;图18弯刺蔷薇嫁接月季‘金秀娃’插条的解剖结构观察;co:皮层;ph:韧皮部;vc:维管形成层;xy:木质部;箭头表示根原基;标尺=1mm;10x。具体实施方式本发明提供了一种环状贴皮嫁接扦插繁殖月季的方法,包括如下步骤:(1)环剥:环剥月季枝条和砧木枝条,收集砧木皮部;(2)嫁接:将收集的砧木皮部环状贴皮嫁接到月季枝条被环剥的部位;(3)剪取插条:所述砧木皮部与月季枝条愈合后,将月季枝条从环状贴皮的形态学下部剪下,修剪成长度为10~15cm的插条;(4)插条处理:将插条上环状贴皮的部分浸泡在生根溶液中;(5)扦插:将插条带有环状贴皮的扦插端埋入扦插基质中;(6)插后管理:扦插完成后先浇一次透水,控制扦插基质相对湿度为75~85%;空气相对湿度为70~95%;在扦插后至未生根前控制温度为10~15℃,7~10天浇一次水;插条生根后,控制温度为20~25℃,3~5天浇一次水。本发明采用环状贴皮嫁接,先环剥月季枝条和砧木枝条,收集砧木皮部。在本发明中,所述环剥的深度优选至月季枝条的韧皮部和砧木枝条的韧皮部,且均不伤及木质部。在本发明中,所述环剥的长度优选为1.0~1.2cm,进一步优选为1.0cm、1.1cm、1.2cm,再进一步优选为1.0cm。在本发明中,所述砧木枝条优选为无刺多花蔷薇、弯刺蔷薇、natebelay蔷薇或法国蔷薇的枝条,进一步优选为无刺多花蔷薇的枝条。砧木的选择对嫁接成功与否至关重要。若选择的砧木与接穗的亲和力较差或无亲和力,则会直接导致愈合部位生长不良、非正常生长、形成的接口愈合不良、后期无亲和性等问题。在本发明中,所述砧木皮部优选没有芽眼。在本发明中,所述月季枝条优选为‘金秀娃’月季。环剥月季枝条以及收集到砧木皮部后,进行环状贴皮嫁接,将砧木皮部环状贴皮嫁接到月季枝条被环剥皮部的部位,用绑带固定。在本发明中,所述砧木皮部优选能够完全包覆月季枝条被环剥的部位。因此,最好选择月季枝条和砧木枝条粗度一致的位置或砧木枝条略粗于月季枝条的位置进行环剥,保证环状贴皮嫁接后韧皮部能够很好愈合。待所述砧木皮部与月季枝条愈合后,将月季枝条从环状贴皮的形态学下部剪下,去除绑扎,修剪成10~15cm的插条。在本发明中,剪取插条前,优选所述月季枝条不脱离月季植株,所述环剥和嫁接优选在生长季节的活体月季枝条上进行。在本发明中,所述插条上优选保留2~3个芽,进一步优选保留2个芽;优选不留叶片或保留顶部复叶的2~3片小叶。在本发明中,采集插条的时间优选在早晨露水干后至气温大幅上升之前,采集后优选用湿布包裹,插条的加工优选在室内阴凉处进行。修剪好插条后,将插条上环状贴皮的部分浸泡在生根溶液中。在本发明中,所述生根溶液优选为abt2号生根粉溶液,浓度优选为45~55mg/kg,进一步优选为50mg/kg;所述浸泡的时间优选为2~4h,进一步优选为3h。浸泡完毕,尽快将插条带有环状贴皮的扦插端埋入到湿润的扦插基质中。在本发明中,优选预先在扦插基质中插出比插条直径大一点的洞,将插条插入洞中,避免损伤嫁接部位的组织。在本发明中,采用扦插床扦插,插条的间隔优选为3~5cm,进一步优选为4cm;扦插的深度优选为3~5cm,进一步优选为4cm。过深则不利于生根,多浅则插条不易固定,容易在后期浇水的过程中歪斜或倾倒。在本发明中,所述扦插基质优选为干净的粒状蛭石。在本发明中,扦插完成后先浇一次透水,在扦插后至未生根前控制温度为10~15℃,优选为10℃、12℃、15℃,进一步优选为12℃;该温度下愈伤组织形成的最快。在本发明中,优选7~10天浇一次水,进一步优选8天浇一次水。还要防止强光直射,光照过强会灼伤叶片,也会加剧蒸腾,导致插穗干枯。可以设置遮阳网,遮阳网的遮光率优选为50~80%,进一步优选为60%。在本发明中,插条生根后,控制温度为20~25℃,进一步优选为20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃,再进一步优选为20℃;温度超过25℃生根率会下降,超过35℃插条不会存活。在本发明中,插条生根、萌芽后需水量大,优选3~5天浇一次水,进一步优选4天浇一次水;控制扦插基质相对湿度为75~85%,优选为80%;空气相对湿度为70~95%,优选为80%。在本发明中,枝条生根后,需要2周浇灌一次营养液,所述营养液优选为ms液体培养基中的无机盐配方,所述无机盐配方基的体积浓度优选为1~3‰,进一步优选为2‰。下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。实施例1环剥贴皮硬枝扦插本实施例,在2013年8月份,分别以无刺多花蔷薇、弯刺蔷薇、natebelay蔷薇和法国蔷薇为砧木,以月季‘金秀娃’为接穗进行环状贴皮嫁接并扦插(本实施例的砧木和接穗材料均来自中国农业大学科技园),每种砧木嫁接120个,共嫁接480个。1.环剥和嫁接2013年8月,选取两年生、健壮、无病虫害的藤本月季枝条(不从月季植株上剪下来),在节间的部位,使用环割刀,将月季枝条韧皮部环剥1cm,环剥时不要伤及木质部,以免影响环状贴皮嫁接后枝条的正常生长。然后在环剥的部位贴上由当年生砧木枝条上环剥的大小一致的砧木皮部,剥下的砧木皮部应没有芽眼,随即用塑料布绑扎接口。环剥的位置为砧木枝条的中下段,容易剥离韧皮部。此外,砧木枝条环剥处的粗度应与接穗月季‘金秀娃’环状贴皮部位的粗度一致或者比月季枝条稍粗,以免韧皮部不能很好地结合,影响愈合与生长。月季枝条的环剥和嫁接的整个过程均在生长季节的活体月季植株上进行。环状贴皮嫁接示意图如图1所示。2.插条剪取、处理和扦插于2013年11月份去除绑扎,将月季枝条从环状贴皮的形态学下部剪下(如图2所示,扦插切口处的皮是套接上的砧木皮部,木质部是月季的木质部)。剪取月季枝条后,依节间的密度来调节插穗的长度,剪成插条,保持插条的长度在10~15cm的范围内,在插条上保留2个饱满芽,插条上剪口下的第一个芽较为重要,另一个芽备用,不留叶片。将abt2号生根粉配制成50mg/kg浓度的生根粉溶液,将插穗以30根为1捆,将环状贴皮的部分浸泡在生根溶液中3h。0℃沙藏,至2014年4月份,对沙藏的枝条进行扦插。扦插时,以蛭石为扦插基质,扦插前预先在湿润的扦插基质上插出比枝条直径大一点的孔,避免直接扦插伤到插条的嫁接部位。苗床上扦插时,插穗间距为4cm,扦插深度为4cm。3.插后管理扦插完成后先浇一次透水,保持扦插基质相对湿度为80%,空气相对湿度为80%;在扦插后至未生根前控制温度为15℃,每8天浇一次水,防止强光直射;插条生根、萌芽后,控制温度为20℃,每4天浇一次水,每两周浇一次体积浓度为0.02%的由ms液体培养基的无机盐配方配置的溶液作为营养液,以补充蛭石不能为枝条提供的营养。实施例2环剥贴皮绿枝扦插本实施例在2014年8月份分别以无刺多花蔷薇、弯刺蔷薇、natebelay蔷薇和法国蔷薇为砧木,以月季‘金秀娃’为接穗进行环状贴皮嫁接并扦插(本实施例的砧木和接穗材料均来自中国农业大学科技园),每种砧木嫁接120个,共嫁接480个。1.环剥和嫁接2014年8月份,选取当年生、健壮、无病虫害的藤本月季枝条(不从月季植株上剪下来),选取节间的茎段,使用环割刀,将月季枝条韧皮部进行1cm的环剥,环剥时不要伤及木质部,以免影响环状贴皮嫁接后枝条的正常生长发育。然后在环剥的部位贴上由当年生砧木枝条上环剥得来的大小一致的砧木皮部,用绑带固定,嫁接的砧木皮部没有芽眼,环剥的位置为砧木枝条的中下段,避免上部枝条过于幼嫩,不能剥离韧皮部。此外,砧木枝条环剥处的粗度应与接穗月季‘金秀娃’环状贴皮部位的粗度一致或者比月季枝条稍粗,以免韧皮部不能很好地接合,影响后期的生长发育。月季枝条的环剥和嫁接的整个过程均在活体的月季植株上进行。2.插条剪取、处理和扦插环状贴皮嫁接后20d,砧木皮部与月季枝条已经很好的愈合,有些甚至长出了白色或黄色的愈伤组织。解除绑带,将月季枝条从环状贴皮的形态学下部剪下。剪取月季枝条后,依节间的密度来调节插穗的长度,剪成插条,所有插条的长度在10~15cm的范围内,在插条上保留2个饱满芽,插条上剪口下的第一个芽较为重要,另一个芽备用,保留顶部1~2片小叶,避免插条中水份和养分的流失,利于扦插生根和枝叶生长。采穗时间一般为早晨露水干了以后至气温大幅度上升之前,采后用湿布包裹保湿,穗条加工在室内阴凉处进行。将abt2号生根粉配制成50mg/kg浓度的生根粉溶液,将插穗以80根为1捆,将环状贴皮的部分浸泡在生根粉溶液中3h。以蛭石为扦插基质,扦插前预先在扦插基质上插出比枝条直径大一点的洞,避免直接扦插伤到插条的嫁接部位,固定插条于洞中。扦插时行间隔为4cm,扦插深度为4cm。3.插后管理扦插完成后先浇一次透水,控制扦插基质相对湿度为80%,空气相对湿度为85%;在扦插后至未生根前控制温度为15℃,每8天浇一次水,防止强光直射;插条生根、萌芽后,控制温度为20℃,每4天浇一次水,每两周浇一次体积浓度为0.02%的由ms液体培养基的无机盐配方配置的溶液作为营养液,以补充蛭石不能为枝条提供的营养。对比例1本对比例选取无刺多花蔷薇、弯刺蔷薇、natebelay蔷薇、法国蔷薇和月季‘金秀娃’这五种植物当年生枝条,剪取插穗,并将插穗下端剪成45°斜面,插条长度、留芽、留叶数量、插条处理、扦插以及插后管理均与实施例2一致。扦插时间分别为2014年的4月和8月。对比例2将实施例2环剥下的月季皮部贴在无刺多花蔷薇被环剥部位,分别在2018年的4月和8月扦插,每次90个。其他步骤同实施例2。扦插后对实施例1和实施例2中四种嫁接组合和对比例1中五种供试材料进行调查统计:1.实施例1中2014年4月份扦插的四种嫁接组合的植株成活率实施例1中的植株是在2013年8月嫁接,11月剪取枝条贮藏,2014年4月扦插。统计结果见表1。由表1可以看出四种嫁接组合的成活率:月季‘金秀娃’/无刺多花蔷薇>月季‘金秀娃’/natebelay蔷薇>月季‘金秀娃’/法国蔷薇>月季‘金秀娃’/弯刺蔷薇,最高可达到90%。可见,无刺多花蔷薇和月季‘金秀娃’的嫁接成活率比其他蔷薇的高,愈合也较好;而natebelay蔷薇次之,弯刺蔷薇最弱,只有76.7%。表1四种嫁接组合的植株成活率嫁接组合嫁接数(个)接后成活数(个)嫁接成活率(%)月季‘金秀娃’/无刺多花蔷薇12010890.0月季‘金秀娃’/natebelay蔷薇12010083.3月季‘金秀娃’/法国蔷薇1209680.0月季‘金秀娃’/弯刺蔷薇1209276.72.统计对比例1和实施例1、实施例2中植株的生根率(1)对比例1中五种供试材料的扦插生根情况,统计结果如表2。从表2可以看出,四种蔷薇均较容易形成不定根,而月季‘金秀娃’只形成愈伤组织,不会形成不定根,且愈伤组织形成时间较晚;而在这四种蔷薇中,natebelay蔷薇在15d左右最早长出不定根,有的还会形成愈伤组织且生根率最高,达到90%;其次是无刺多花蔷薇,弯刺蔷薇的生根率最低,只有45.6%;不同月份的扦插生根率也有所不同,四月份硬枝扦插的生根率均高于八月份的绿枝扦插,并且在四月份时,弯刺蔷薇产生不定根的时间较早,与natebelay蔷薇的时间相同,均为14d。虽然这四种蔷薇第一条根形成的时间不同,但相差不超过四天。表2五种供试材料的扦插生根情况注:no.表示没有。(2)实施例1和实施例2中四种嫁接组合的扦插生根情况,统计结果见表3。通过表3可以看出四种嫁接组合中砧木的生根率从高到低依次为无刺多花蔷薇、natebelay蔷薇、法国蔷薇和弯刺蔷薇,最高可达66.4%,而最低只有46.2%;虽然弯刺蔷薇生根率较低,但是它形成第一条根的时间最短,为14天;法国蔷薇形成第一条根的时间最长,为23天;只有natebelay蔷薇和法国蔷薇会在扦插后一周之内形成愈伤组织,另外两种蔷薇不会形成愈伤组织。而与砧木自身扦插试验相比(表2),这四种蔷薇皮部嫁接在月季上以后的扦插生根率都有所下降,产生第一条不定根的时间也较晚,但是弯刺蔷薇产生不定根的时间变化不大。表3四种嫁接组合的扦插生根情况注:no.表示没有。3.染色体倍性鉴定(1)鉴定对比例1中五种供试材料的染色体倍性。典型结果如图3,蔷薇科植物的染色体基数为7(x=7)。在图3中a、b、c、d分别是无刺多花蔷薇、natebelay蔷薇、弯刺蔷薇、法国蔷薇这四种蔷薇的染色体倍性鉴定结果,结果表明这四种蔷薇均为二倍体(2n=2x=14),而月季‘金秀娃’则为四倍体(2n=4x=28)(图3e)。由于蔷薇和月季的染色体倍性存在很大的差异,用这四种蔷薇作为砧木环状贴皮嫁接月季‘金秀娃’扦插得到的植株,对其进行染色体倍性鉴定,可以很明确的判断出其倍性与砧木、接穗是否一致,或者是接穗与砧木的结合体。据此可确定环状贴皮嫁接后扦插生根的主导植株(砧木或接穗)。(2)分别对实施例1和实施例2中四种嫁接组合扦插后得到的植株进行染色体倍性鉴定,典型结果如图4。在图4中a~d结果都是二倍体,与砧木的倍性一致。由此可知,月季和蔷薇嫁接扦插后可以生根是由于嫁接在月季上的砧木皮部起了主导作用,不定根是从砧木皮部起源的。4.统计对比例2以月季‘金秀娃’作砧木,无刺多花蔷薇作接穗时的生根情况,并与实施例1和实施例2中,以无刺多花蔷薇作砧木,月季‘金秀娃’作接穗时相比,从图5中可以看出,以无刺多花蔷薇作砧木,月季‘金秀娃’作接穗时在嫁接部位产生了大量的不定根(图5a);以月季‘金秀娃’作砧木,无刺多花蔷薇作接穗时嫁接扦插苗在扦插切口处形成了愈伤组织,但是愈伤组织未分化成根,而是无刺多花蔷薇接穗在嫁接部位上方的部位发生了大量的蔷薇根(图5b)。由此进一步证明了环状贴皮嫁接扦插后的不定根发生是由砧木皮部主导的。5.不同植株的根系生长状况(1)五种供试材料的根系生长状况,结果如表4。由表4可知,natebelay蔷薇生根率和其他蔷薇存在较大差异,而平均根长和平均根数差异较小,月季‘金秀娃’的扦插生根率为0。表4五种供试材料的根系生长情况注:表中同列数据后小写字母表示0.05水平差异显著。(2)四种嫁接组合的植株根系生长情况,结果如表5。由表5可知,以无刺多花蔷薇和natebelay蔷薇作砧木时,两者的生根率没有显著差异,但这二者与另外两种蔷薇有显著性差异;除法国蔷薇作砧木时生根数量较少外,其余三种蔷薇生根数量大体一致。表5四种嫁接组合的植株根系生长情况注:表中同列数据后小写字母表示0.05水平差异显著。6.不同植株生根指标的相关性(1)natebelay蔷薇的生根指标相关性natebelay蔷薇扦插后的生根指标和natebelay蔷薇环状贴皮接月季‘金秀娃’后扦插的生根指标进行相关性分析。结果如表6。由表6可以看出,插条种类和生根率呈极显著的负相关,即环状贴皮嫁接后扦插的生根率比砧木自身直接扦插的生根率低,它们之间的相关系数为-0.997;砧木种类和生根数量为正相关,即环状贴皮嫁接后扦插的生根数量比砧木自身直接扦插的生根数量高,它们之间的相关系数为0.985,达到显著水平;环状贴皮嫁接后扦插的生根数量提高而生根率较低,砧木自身直接扦插的生根数量低但生根率较高,生根率和生根数量的相关系数为-0.988,达到显著水平。表6natebelay蔷薇的生根指标相关性插条种类生根率生根数量生根长度插条种类生根率-0.997**生根数量0.985*-0.988*生根长度0.802-0.8060.705(2)无刺多花蔷薇的生根指标相关性将无刺多花蔷薇扦插后的生根指标和无刺多花蔷薇环状贴皮嫁接月季‘金秀娃’后扦插的生根指标进行相关性分析,结果见表7。在生根率、生根数量、生根长度这几种指标中,只有插条种类和生根率有相关性,它们呈极显著的负相关,即环状贴皮嫁接后的扦插生根率比砧木自身直接扦插的生根率低,这二者之间的相关系数为-0.991。表7无刺多花蔷薇的生根指标相关性插条种类生根率生根数量生根长度插条种类生根率-0.991**生根数量0.457-0.542生根长度-0.7960.852-0.437(3)法国蔷薇的生根指标相关性将法国蔷薇扦插后的生根指标和法国蔷薇环状贴皮嫁接月季‘金秀娃’后扦插的生根指标进行相关性分析,结果见表8。在生根率、生根数量、生根长度这几个指标中,只有插条种类和生根率有负相关性,即环状贴皮嫁接后的扦插生根率比砧木自身直接扦插的生根率低,这二者之间的相关系数为-0.991,达到显著水平。表8法国蔷薇的生根指标相关性(4)砧木自身的生根指标相关性将natebelay蔷薇、无刺多花蔷薇、法国蔷薇、弯刺蔷薇这四种蔷薇扦插的生根指标进行相关性分析,结果见表9。由表9可以看出,在生根率、生根数量、生根长度这几种指标中,只有砧木种类与生根率呈极显著的负相关,即它们之间的相关系数为-0.973。表9不同植株的生根指标相关性砧木种类生根率生根数量生根长度砧木种类生根率-0.973**生根数量0.068-0.096生根长度-0.4060.501(5)嫁接后植株的生根指标相关性将natebelay蔷薇、无刺多花蔷薇、法国蔷薇、弯刺蔷薇这四种蔷薇分别环状贴皮接月季‘金秀娃’后扦插的生根指标进行相关性分析,结果见表10。由表10可以看出,在生根率、生根数量、生根长度这几种指标中,嫁接插条种类与生根率呈极显著的负相关,这两者之间的相关系数为-0.919。砧木间的差异较大。表10不同植株的生根指标相关性插条种类生根率生根数量生根长度插条种类生根率-0.919**生根数量-0.023-0.144生根长度-0.5560.2360.1397.扦插生根外部形态特征(1)无刺多花蔷薇嫁接前后扦插生根外部形态发生过程参见图6,在无刺多花蔷薇扦插不定根形成的过程中未发现愈伤组织,扦插17d的时候有的枝条会长出不定根(图6c),扦插20d后,大部分的植株会长出不定根(图6d),扦插30d时,会产生大量的不定根(图6f)。参见图7,无刺多花蔷薇环状贴皮接月季‘金秀娃’后扦插,开始形成不定根的时间较无刺多花蔷薇单独扦插时晚1~2天,且不定根产生的位置在嫁接砧皮上产生。在扦插18d的时候,开始有不定根生成(图7c),扦插25d的时候大部分植株都长出不定根(图7e),扦插30d时,有大量的不定根形成(图7f)。从形态学观察,可以看出,无刺多花蔷薇嫁接前后扦插形成的不定根除了形成时间早晚不同外,形态及长度均无明显差异。(2)natebelay蔷薇嫁接前后扦插生根外部形态发生过程参见图8,natebelay蔷薇进行扦插不定根形成的过程中有的插条会形成愈伤组织(图8b),扦插16d的时候有的枝条会产生不定根(图8c),扦插20d后,大部分植株均会产生不定根(图8d),扦插30d时,会产生大量的不定根(图8f)。参见图9,natebelay蔷薇皮环状贴皮接月季‘金秀娃’后扦插,开始形成不定根的时间较natebelay蔷薇单独扦插的晚1天,不定根产生的位置在嫁接口的下端(图9b)。扦插20d时,大部分植株都会长出不定根(图9c)。之后,不定根进一步生长发育,数量和长度均有所增加,且会形成大量的不定根(图9f)。从形态学观察,可以看出,natebelay蔷薇嫁接前后扦插形成的不定根除了形成时间早晚不同外,形态及长度均无明显差异。(3)法国蔷薇嫁接前后扦插生根外部形态发生过程参见图10,法国蔷薇进行扦插不定根形成的过程中有的插条会形成愈伤组织(图10b),扦插18d的时候有的枝条会产生不定根(图10c),扦插20d后,大部分的植株都会产生不定根(图10d)。之后,不定根的长度会延长,数量会增加,进而会产生大量的不定根(图10f)。参见图11法国蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插,开始形成不定根的时间较法国蔷薇单独扦插时晚2天,不定根产生的位置在砧皮上。扦插18d的时候,有的植株开始有不定根出现(图11b)。扦插23d时,大部分植株都长出不定根(图11d)。不定根进一步发育,数量和长度均有所增加,且会大量产生不定根(图11f)。形态学观察可见,法国蔷薇嫁接前后扦插形成的不定根形态及长度均无明显差异,但不定根形成时间早晚不同。(4)弯刺蔷薇嫁接前后扦插生根外部形态发生过程参见图12,弯刺蔷薇进行扦插不定根形成的过程中不会形成愈伤组织,扦插12d的时候有的枝条会长出不明显的不定根(图12c),扦插14d后,会形成明显的不定根(图12d),扦插25d后,不定根的长度会延长数量会增加(图12f)。参见图13,弯刺蔷薇嫁接月季‘金秀娃’后扦插,扦插12d后,有的插条在砧皮部有白色的突起,是不定根将要突破皮层,即内部已经产生了不定根(图13b),开始形成不定根的时间与弯刺蔷薇单独扦插时间相同,均为14d,不定根产生的位置在砧皮上(图13c),扦插20d以后,大部分植株都形成了不定根(图13d)。不定根进一步发育,数量和长度均有所增加,且会大量产生不定根(图13f)。形态学观察可见,弯刺蔷薇嫁接前后扦插形成的不定根形态及长度均无明显差异,但形成时间早晚不同。(5)月季‘金秀娃’扦插生根外部形态发生过程月季‘金秀娃’扦插过程中没有发现不定根的生成,在扦插20d时,在切口处(形态学下端)开始生成乳白色的愈伤组织(图14b),随着时间的推移,愈伤组织进一步膨大,逐渐呈圆环状排列在切口处(图14c)。8.通过对四种砧木环状贴皮接月季‘金秀娃’扦插生根的生长情况、外部形态学观察等进行分析,我们选取无刺多花蔷薇和弯刺蔷薇的插条进行解剖学观察。(1)无刺多花蔷薇嫁接前后扦插解剖结构观察无刺多花蔷薇嫩枝扦插解剖学观察结果如图15。生根部位茎的结构由外向里依次为表皮、韧皮部、木质部、髓。在扦插之前,茎的横切面上未发现根原始体,因此为诱发根原始体(图15a)。在木质部靠近髓射线的部位,有一团具有很强分裂能力的细胞,这些细胞即为原基原始细胞(图15b),这些细胞不断分裂并伸向韧皮部,成为根原基(图15c、d),之后继续向外延伸直至冲破表皮形成不定根(图15f)。不定根的发育方式属于内始式。无刺多花蔷薇嫁接月季‘金秀娃’嫩枝扦插解剖学观察结果如图16。生根部位茎的结构由外向里依次为表皮、皮层、韧皮部、维管形成层、木质部、髓。在扦插之前,茎的横切面上未发现根原始体,因此为诱发根原始体。在木质部与韧皮部之间的维管形成层,有一团具有很强分裂能力的细胞,这些细胞即为根原基原始细胞(图16b),这些细胞不断分裂并向外延伸到韧皮部,向内延伸到木质部(图16d)之后继续向外延伸直至冲破表皮形成不定根(图16f)。(2)弯刺蔷薇嫁接前后扦插生根解剖学观察弯刺蔷薇嫩枝扦插解剖学观察结果如图17。生根部位茎的结构由外向里依次为表皮、皮层、韧皮部、维管形成层、木质部、髓。在扦插之前,茎的横切面上未发现根原始体,因此为诱发根原始体。在木质部靠近髓的部位,有一团具有很强分裂能力的细胞,这些细胞即为根原基原始细胞(图17b),这些细胞不断分裂并伸向韧皮部,成为根原基(图17c、d),之后继续向外延伸直至冲破表皮形成不定根(图17e、f)。不定根的发育方式为内始式。弯刺蔷薇嫁接月季‘金秀娃’嫩枝扦插解剖学观察结果如图18。生根部位茎的结构由外向里依次为表皮、皮层、韧皮部、维管形成层、木质部、髓。在扦插之前,茎的横切面上未发现根原始体,因此为诱发根原始体。在韧皮部的位置,有一团具有很强分裂能力的细胞,这些细胞即为原基原始细胞(图18b),这些细胞不断分裂并向外延伸到皮层(图18c、d)之后继续向外延伸直至冲破表皮形成不定根(图18e)。由以上实施例可知:(1)通过嫁接后自然成活率以及嫁接后扦插成活率和根的生长指标统计结果,可以看出四种嫁接组合的插条成活率均较高,生根情况均良好,因此环状贴皮接后扦插的方法是可行的,为扦插不易生根的月季品种提供了一种新型的无性繁殖方法;其中无刺多花蔷薇在所选四种砧木中表现最好,其环状贴皮嫁接成活率为90%,嫁接后扦插生根率为65.9%;(2)对嫁接后扦插成活的月季植株进行根系染色体倍性鉴定,发现根系均为二倍体,与砧木倍性相同,表明贴皮嫁接部位的生根特性,由砧木种类的遗传特性所决定;(3)对无刺多花蔷薇和弯刺蔷薇植株进行解剖学结构观察,发现这两种蔷薇均为诱发型根原始体,不定根起源于木质部的髓射线;(4)对以无刺多花蔷薇和弯刺蔷薇作为砧木的植株进行解剖学结构观察,发现无刺多花蔷薇环状贴皮接月季‘金秀娃’和弯刺蔷薇环状贴皮接月季‘金秀娃’均为诱发型根原始体,前者不定根起源于维管形成层的薄壁细胞;后者不定根起源于韧皮部的薄壁细胞。而形成层细胞和韧皮部细胞主要源于砧木。以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出,对于本
技术领域:
的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。另外,凡利用本发明的理论和原理,在月季乃至其他植物上进行砧木贴皮嫁接扦插繁殖的,也均受该专利约束,为本发明的保护范围。当前第1页12
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