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金针菇液体菌种的培养方法与流程

来源:花匠小妙招 时间:2025-09-27 07:07

技术特征:

1.一种金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中,置于24-26℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为160-180r/min,通气量为:每分钟每1mL液体培养基通入0.2-0.3mL的气体,培养3~4d,得到摇瓶菌种;在培养1天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.05-0.08倍的第一添加剂;在培养2天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.10-0.17倍的第二添加剂;

(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照10-15%的体积比接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;在培养1天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.15-0.21倍的第一添加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.2-0.3倍的第三添加剂;在培养5天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.6-0.8倍的第四添加剂;

其中,液体培养基基包括如下重量份的各成分:碳源15-25、氮源9-16、维生素B 1-2、磷酸二氢钾0.1-0.5、过磷酸钙1-1.5、聚氧丙烯甘油醚2-4、水63-75;

所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1-2、氮源1-2;

所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:氮源1-2、氯化锌0.2-0.4;

所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:氯化锌1-2、谷胱甘肽0.1-0.2;

所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源2-3、谷胱甘肽0.2-0.4、氯化锌0.5-0.7。

2.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述碳源为重量份数比为5:8的玉米淀粉和红薯粉的混合物。

3.如权利要求1或2所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述氮源为重量份数比为2:3的花生壳酶解液和冷榨黄豆饼粉的混合物。

4.如权利要求3所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述花生壳酶解液的制备方法如下:取花生壳洗净晾干,粉碎后加入到花生壳重量20倍的枸缘酸钠水溶液中,升温至80-90℃搅拌1h后降温至35-45℃得混合溶液,向混合溶液中加入等重量的纤维素酶和胰蛋白酶混合物,35-45℃搅拌12-14h,然后离心收集上清液,即得所述花生壳酶解液。

5.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(2)的具体培养条件如下:培养第1~2天,保证Ph值为4.5-4.7,通气量为2.7-2.9L/min,温度为26-28℃;培养第3~4天,保证Ph值为4.8-5.3,通气量为3.5-4.1L/min,温度为21-25℃;培养第5~6天,保证Ph值为6.5-7.5,通气量为3.2-4.0L/min,温度为20-23℃。

6.如权利要求1-5任一所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(1)中,通气方式如下:培养第1d连续通入5-7h氧气,培养第2d间隔通入,每隔40min通入20min氧气,累积通入氧气的时间为5-7h,培养第3~4d间隔通入,每隔2h通入30min氧气,累积通入氧气的时间为3-5h,剩余时间通入空气。

7.如权利要求1-5任一所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(2)中,通气方式如下:培养的第2和第4~6天按照2h的间隔分批通入20min氧气,累积通入时间为2-3h,剩余时间通入空气。

8.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述第一添加剂还包括重量份数为0.5-1的臭氧生理盐水。

9.如权利要求8所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述臭氧生理盐水为现配制的,配制方法为:向生理盐水中通入臭氧气体至臭氧在生理盐水中的浓度为10-20ug/mL。

10.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述培养方法还包括一级液体菌种培养前对金针菇初始母种进行培养得到金针菇母种溶液,具体培养工艺为:将金针菇初始母种接入斜面培养基中,于26-28℃中培养5-6天,所述斜面培养基包括如下重量份的各成分:麦芽糖醇0.5-1.5、泛酸钙4-7、氯化铵0.3-1.1、月桂酰肌氨酸1-2、玉米渣15-19、硫酸铁0.5-1.5、琼脂0.5-1.5、水64-77。

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