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发明

用于检测蜜源植物的组合物、试剂盒、检测方法及应用

2023-06-07 22:12:26 发布于四川 0

申请专利号：CN202211483421.5 公开（公告）日：2023-03-07 公开（公告）号：CN115747373A 申请人：铜仁市林业科学院

摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种用于检测蜜源植物的组合物，所述组合物制备包括实时荧光PCR反应的反应体系总体积25μL，荧光PCR预混液2×Mix12.5μL，模板DNA3μL，引物对各1μL、探针(10μmol/L)0.5μL和ddH2O7μL。扩增程序为，95℃预变性5min；95℃变性15s，60℃退火60s，共进行50个循环，每个循环结束后收集荧光信号，CT≤45为阳性。本发明的实时荧光PCR检测方法可采用完全闭管检测，无需PCR后处理，避免了交叉污染和假阳性。本发明的方法巧妙地运用了PCR技术的DNA高效扩增、核酸杂交的特异性和荧光检测技术的快速和敏感性，具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。使用本发明的实时荧光PCR检测方法，其简单、快速、特异且灵敏的特点适合用于国内外市场上蜂蜜蜜源植物的检测。

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专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 115747373 A (43)申请公布日 2023.03.07 (21)申请号 202211483421.5 (22)申请日 2022.11.24 (71)申请人 铜仁市林业科学院 地址 554399 贵州省碧江区东太大道368号 (72)发明人 代忠迪　李思颖　代松　 (74)专利代理机构 北京国坤专利代理事务所 (普通合伙) 11491 专利代理师 赵红霞 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895 (2018.01) C12Q 1/686 (2018.01) C12N 15/11 (2006.01) 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 (54)发明名称 用于检测蜜源植物的组合物、试剂盒、检测 方法及应用 (57)摘要 本发明属于生物技术领域，公开了一种用于 检测蜜源植物的组合物，所述组合物制备包括实 时荧光PCR反应的反应体系总体积25μL，荧光 PCR预混液2 ×Mix12.5μL，模板DNA3μL，引物对 各1μL、探针(10μmol/L)0.5μL和ddH O7μL。 2 扩增程序为，95℃预变性5min；95℃变性15s，60 ℃退火60s，共进行50个循环，每个循环结束后收 集荧光信号，CT≤45为阳性。本发明的实时荧光 PCR检测方法可采用完全闭管检测，无需PCR后处 理，避免了交叉污染和假阳性。本发明的方法巧 妙地运用了PCR技术的DNA高

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