小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法
本申请涉及植物种植,具体涉及小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法。
背景技术:
1、小花吊兰(chlorophytum laxum)属百合科吊兰属,多年生草本植物,也称三角草、疏花吊兰、山韭菜和土麦冬等,喜欢在海拔较低的湿润林下和草地中生长,主要分布于两广和海南地区。小花吊兰叶片排列成两列,中间主脉明显,根细长,簇生或散生。小花吊兰是中药材三角草的基源植物,以全草入药,是华南地区常用的地方草药。其性凉、味甘而微苦、有毒,具有抗炎、镇痛、改善微循环、清热解毒、消肿止痛的功效,在广东中山、江门地区常用来治疗毒蛇咬伤和跌打损伤。三角草的药用成分包括甾体皂苷、黄酮类、多酚类化合物等,如三角草苷a(chlorophytosidea)、海可皂苷元、4’,5,7-三羟基-6,8-二甲基黄酮、豆甾烯醇、棕榈酸、胡萝卜苷、谷甾醇、异荭草苷和异牡荆素等。其中,小花吊兰根中的甾体皂苷25-r-spirosta-3,5-dien-12β-ol(1),对人类鼻咽癌细胞具有较高的细胞毒性。而chloromalosidea具抗人体癌细胞毒性较广,如肺癌、上皮癌和乳癌细胞等。小花吊兰提取物还具有抗氧化能力。
2、随着小花吊兰生药学研究的不断深入,将进一步推动其在临床中应用。目前小花吊兰还没有规模化种植,产量有限。主要由于小花吊兰的胚乳较小、种皮坚硬,发芽率低,种子繁殖困难。加之,小花吊兰处于野生状态,随着农业生产中除草剂大量使用,导致小花吊兰资源稀少,无法满足现市场需求。
技术实现思路
1、本申请的主要目的在于提供小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,旨在解决现有种植技术无法满足市场对小花吊兰的需求的问题。
2、为实现上述目的,本申请的实施例采用的技术方案如下:
3、小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,包括以下步骤:
4、s1、选取健康的小花吊兰植株作为母株,洗净植株后,展开叶片剪除,完全清除根,保留带有茎基部,作为外植体;对所述外植体进行两次消毒处理,消毒完毕后,获得无菌外植体;
5、s2、将所述无菌外植体接触消毒液的茎段的两端进行切除后,将茎段按生物学下端向下的方向,插入28±2℃的培养箱中的诱导培养基中先黑暗培养2-3d,再每天16h/8h的光照/黑暗交替培养5-7d,有新叶萌发后,获得初代材料;
6、s3、取所述初代材料,切掉新抽出的叶片,将无菌外植体接种于丛芽增殖培养基进行继代培养20-25d,母茎周围长出侧芽;当新生叶片7cm长时,进行继代培养,剪去叶片,保留茎基部,继续接种至丛芽增殖培养基培养20-25d;
7、s4、当增殖芽的叶片顶住培养瓶盖时,从丛芽上切下单个不定芽,保留2-3cm长的叶片,将其生物学底端向下,直立插入生根培养基中;15-20d后,获得小花吊兰再生植株;
8、s5、取根长至1-2cm左右、苗高7cm以上的小花吊兰再生植株进行炼苗、假植;待叶片老熟,并长出新的根系,即可移栽至大田。
9、进一步地,所述步骤s1中,对所述外植体进行两次消毒处理的过程包括:
10、第一次消毒:先用70%-75%酒精浸泡30s;再用无菌水浸泡洗涤3次,浸泡时,用无菌的镊子搅拌,每次5min,在无菌纸巾上晾干;再转入含有吐温的0.1%的升汞溶液中浸泡5-11min,浸泡时,用无菌的镊子搅拌,消毒充分,将外植体用无菌水浸泡洗涤3-5次,每次3min;
11、第二次消毒:将第一次消毒的外植体晾干后,继续用500mg/l的特美町和0.1mg/lga溶液浸泡20min。
12、进一步地,所述步骤s2中,所述诱导培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有3.0mg/l的6-ba、0.5mg/l的iba和0.5mg/l的葡萄糖。
13、进一步地,所述步骤s2中,所述光照度为1900-2100lx。
14、优选地,所述步骤s1中,第一次消毒时所述用酒精浸泡的酒精浓度为70%,浸泡时间为30s;所述含有吐温的0.1%的升汞溶液中浸泡的时间为7-9min。
15、进一步地,所述取根长至1-2cm左右、苗高7cm以上的小花吊兰再生植株进行炼苗、假植的步骤,包括:
16、取根长至1-2cm左右、苗高7cm以上的小花吊兰再生植株放入培养瓶中,打开培养瓶的瓶盖,在室内炼苗5-7d;将组培苗取出,用水洗净根部的培养基,不要损伤根系;再将植株浸泡在含有0.1%多菌灵的溶液中10min,最后将组培苗假植在按3:1混合的泥炭土和园土中,每天早晚喷水,保持环境的湿度。
17、进一步地,所述丛芽增殖培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有1.0mg/l-5.0mg/l的6-ba和0mg/l-0.5mg/l的iba。
18、优选地,所述丛芽增殖培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有3.0mg/l的6-ba和0.1mg/l的iba。
19、进一步地,所述生根培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有0mg/l-0.5mg/l的naa和0mg/l-0.5mg/l的iba。
20、优选地,所述生根培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有0.3mg/l的naa和0.2mg/l的iba。
21、与现有的技术相比,本申请深入研究了小花吊兰在组织培养和快速繁殖过程中所面临的主要限制因素。通过对这些制约因素的详细分析和研究,我们成功建立了一套高效的小花吊兰种苗组织培养繁育技术体系。这一技术体系不仅提高了小花吊兰种苗的生产效率,还确保了种苗的质量和生长速度。为了验证该技术体系的实际应用效果,我们进行了中间试验。试验结果表明,该方法能够在短时间内大量生产小花吊兰种苗,从而有效缓解当前市场上对小花吊兰种苗的需求压力。这一成果不仅为小花吊兰的规模化生产提供了技术支持,还为相关产业的发展带来了新的机遇。
技术特征:
1.小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤s1中,对所述外植体进行两次消毒处理的过程包括:
3.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤s2中,所述诱导培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有3.0mg/l的6-ba、0.5mg/l的iba和0.5mg/l的葡萄糖。
4.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤s2中,所述光照度为1900-2100lx。
5.根据权利要求2所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤s1中,第一次消毒时所述用酒精浸泡的酒精浓度为70%,浸泡时间为30s;所述含有吐温的0.1%的升汞溶液中浸泡的时间为7min-9min。
6.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述取根长至1-2cm左右、苗高7cm以上的小花吊兰再生植株进行炼苗、假植的步骤,包括:
7.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述丛芽增殖培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有1.0mg/l-5.0mg/l的6-ba和0mg/l-0.5mg/l的iba。
8.根据权利要求7所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述丛芽增殖培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有3.0mg/l的6-ba和0.1mg/l的iba。
9.根据权利要求1所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述生根培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有0mg/l-0.5mg/l的naa和0mg/l-0.5mg/l的iba。
10.根据权利要求9所述小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述生根培养基包括ms培养基,所述ms培养基中含有0.3mg/l的naa和0.2mg/l的iba。
技术总结
本申请的实施例公开了小花吊兰的离体培养与快速繁殖方法,涉及植物种植技术领域,所述方法包括:选取健康的小花吊兰植株作为母株,获得外植体;对所述外植体进行两次消毒处理后进行茎段培养和增殖处理,处理完成后,进行生根培养、炼苗、假植;待叶片老熟,并长出新的根系,即可移栽至大田。与现有的技术相比,本申请成功建立了一套高效的小花吊兰种苗组织培养繁育技术体系,不仅提高了小花吊兰种苗的生产效率,还确保了种苗的质量和生长速度。该技术能够在短时间内大量生产小花吊兰种苗,从而有效缓解当前中药材市场上对小花吊兰的需求压力。
技术研发人员:王继华,徐世强,顾艳
受保护的技术使用者:广东省农业科学院作物研究所
技术研发日:
技术公布日:2025/5/12
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