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一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂及其制备方法.pdf

来源：花匠小妙招时间：2025-05-19 14:03

一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物及农药领域，特别是涉及一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂
及其制备方法。

背景技术

根结线虫是寄生植物的主要线虫之一，体形微小，在土壤中或植物幼根中生活，主
要靠土、苗、灌水等途径传播。其寄主主要为番茄、芹菜、莴笋、菜豆、茄子、苦瓜多种蔬菜，还
可危害烟草、生姜、山药、花生等多种农作物。随着我国农业生产和农村经济的发展，保护地
蔬菜播种面积和复种指数不断提高，而由于种植品种单一，耕地面积有限，造成轮作和倒茬
困难，根结线虫病危害日趋严重，每年造成的危害轻者可减产10％～20％，重者60％以上甚
至绝产，严重影响了蔬菜的产量和质量。此外，花生和烟草也因根结线虫危害，给生产带来
较大不利影响。

目前，根结线虫病通常以防为主，采用化学剂杀虫。化学剂虽见效快，但成本高，严
重污染环境，对人、畜不安全。而生物防治能够有效防治根结线虫病，且不污染环境，具有很
大的发展潜力，通过将真菌、细菌等微生物引入有害线虫生活环境，借助竞争、捕食、寄生、
拮抗等作用机制控制线虫。但单一生物菌在田间应用中防效不稳，混和菌剂对植物病原物
不同阶段发生作用的、具多种方式和作用位点的生防菌，可在植物不同生育期发挥作用的
生防菌可能是解决上述问题的一个重要途径。但纯生物制剂虽防效显著，同样存在对发病
作物杀虫效果不佳，且菌种混合不当亦会使防效下降等缺点，因此，获得新的、防治结合的、
效果稳定的根结线虫微生物制剂，具有重要的实际意义。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中存在的上述不足，提出一种防治蔬菜根结线虫
的微生物制剂，以提高对植物根结线虫的防治效果。

同时，本发明还提供了上述防治蔬菜根结线虫的微生物制剂的制备方法。

本发明技术方案如下：

一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂，原料重量份组成包括：抗生素菌渣70-80、豆类
丝核菌发酵液45-50、绿色木霉5-10、海洋放线菌N331 5-10、伊维菌素10-15、中药浓缩液
10-15、钙镁磷肥50-60、羧甲基淀粉钠8-15、泥炭土15-20、粘土10-15。

所述的抗生素菌渣为氨基糖甙类菌渣、大环内酯类菌渣和喹诺酮类菌渣中的一种
或几种混合。

所述的豆类丝核菌发酵液制备方法为：菌种在液体培养基中培养5-7天，打散菌丝
并摇碎摇匀，然后继续培养5天，期间每隔8h摇动一次，培养结束后滤除菌丝，滤液加热至
75-80℃保温2h，得豆类丝核菌发酵液；

所述的液体培养基组分为：土豆浸出液 200g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠 1g/L， KH2PO4
2g/L，MgSO4 0.25g/L，FeSO4 1g/L，CaCl2 0.1g/L，MnSO4 5mg/L，VB1 5mg/L，酒石酸铵0.2g/
L。

所述的中药浓缩液：其中药原料重量份组成为蓖麻25-30、万寿菊15-18、紫草15-
18、夹竹桃8-10、孔雀草5-8、青蒿5-8、胜红蓟5-8；

所述的中药浓缩液制备方法为：取蓖麻、万寿菊、紫草、夹竹桃、孔雀草、青蒿和胜红蓟，
粉碎后混合，加入药材2倍体积的水，浸泡2h，过滤，得滤液A，滤渣按1-2％质量浓度的添加
量加入乳化剂 T-20，然后采用水蒸气蒸馏法，用挥发油提取器提取6h，得提取物，剩余固体
以体积浓度85％的乙醇水溶液，70℃浸提3-4h，每隔0.5h超声5min，过滤，滤液与滤液A和提
取物合并，浓缩至相对密度为1.25，得中药浓缩液；

所述的泥炭土为低位泥炭土，有机质含量多为60-70%，pH值6.0-7.0；

上述防治蔬菜根结线虫的微生物制剂的制备方法，步骤包括：

1）取抗生素菌渣，雾化喷淋同体积的浓度为95%的双氧水，搅拌均匀，密封静置5-6h，调
节含水量为65%后注入臭氧并搅拌30min，使臭氧与抗生素菌渣充分混合，搅拌过程臭氧浓
度保持1.5g/m3，加热至50-60℃保温2h，降至室温，通风放置10-15天后，调节含水量至
40%，加入蛋白水解酶，加入浓度为0.8-1.0g/m3，28-32℃发酵7天，再次加热至50-60℃保温
2h，杀菌烘干，备用；

2）抗生素菌渣、豆类丝核菌发酵液混合均匀，表面喷洒占混合料重量5%的酵母菌发酵
液，密封，35-37℃厌氧发酵15-20天，100℃的蒸汽常压灭菌，烘干，备用；

3）将所有原料混合、造粒、干燥，得防治蔬菜根结线虫的微生物制剂。

步骤1）中，所述的蛋白水解酶为丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金
属蛋白酶中的一种或几种混合。

步骤2）中，所述的酵母菌发酵液中酵母菌质量浓度为0.4-0.5%。

本发明防治蔬菜根结线虫的微生物制剂，通过抗生素菌渣、豆类丝核菌发酵液、绿
色木霉、海洋放线菌、伊维菌素、中药浓缩液等混用，不仅提高了杀根结线虫毒力，因微生物
药剂对线虫的穿透性，更有利于植物吸收，提高了蔬菜根部对线虫的防御能力，增效更为显
著。抗生素菌渣经预处理后，失活变性，可完全去除抗生素效价，解决了药残问题对人体伤
害的难题，充分利用其高蛋白、高能量的同时，还具有很好的抗病和抗线虫能力。豆类丝核
菌(Rhizoctonia leguminicola)发酵代谢产物中含有生物碱、苦马豆素等成分，配合海洋
放线菌N331、中药浓缩液等，可抑制根结线虫的胚胎发育与胚后发育，并通过抑制根结线虫
的乙酰胆碱酯酶活性，阻碍线虫生长与繁殖，对根结线虫有极强的毒杀活性，上述原料复配
得到微生物制剂将能够有效提高防治根结线虫的效果，可明显提高经济和社会效益。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发
明进一步详细说明。

下述实施例所用微生物菌种可自行分离得到，或通过购买得到。

实施例1

一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂，原料重量份组成包括：抗生素菌渣75、豆类丝核
菌发酵液48、绿色木霉7、海洋放线菌N331 8、伊维菌素14、中药浓缩液13、钙镁磷肥55、羧甲
基淀粉钠12、泥炭土18、粘土12；抗生素菌渣为氨基糖甙类菌渣；泥炭土为低位泥炭土，有机
质含量多为60-70%，pH值6.0-7.0。

防治蔬菜根结线虫的微生物制剂制备方法，步骤包括：

1）制备豆类丝核菌发酵液：豆类丝核菌菌种在液体培养基中培养6天，打散菌丝并摇碎
摇匀，然后继续培养5天，期间每隔8h摇动一次，培养结束后滤除菌丝，滤液加热至75-80℃
保温2h，得豆类丝核菌发酵液；液体培养基组分为：土豆浸出液 200g/L，葡萄糖20g/L，乙酸
钠 1g/L， KH2PO4 2g/L，MgSO4 0.25g/L，FeSO4 1g/L，CaCl2 0.1g/L，MnSO4 5mg/L，VB1 5mg/
L，酒石酸铵 0.2g/L；

2）制备中药浓缩液：取重量份组成为蓖麻30、万寿菊18、紫草18、夹竹桃10、孔雀草8、青
蒿8、胜红蓟8的中药原料，粉碎后混合，加入药材2倍体积的水，浸泡2h，过滤，得滤液A，滤渣
按1-2％质量浓度的添加量加入乳化剂 T-20，然后采用水蒸气蒸馏法，用挥发油提取器提
取6h，得提取物，剩余固体以体积浓度85％的乙醇水溶液，70℃浸提4h，每隔0.5h超声5min，
过滤，滤液与滤液A和提取物合并，浓缩至相对密度为1.25，得中药浓缩液；

3）取抗生素菌渣，雾化喷淋同体积的浓度为95%的双氧水，搅拌均匀，密封静置6h，调节
含水量为65%后注入臭氧并搅拌30min，使臭氧与抗生素菌渣充分混合，搅拌过程臭氧浓度
保持1.5g/m3，加热至50-60℃保温2h，降至室温，通风放置12天后，调节含水量至40%，加入
蛋白水解酶，加入浓度为1.0g/m3，28-32℃发酵7天，再次加热至50-60℃保温2h，杀菌烘干，
备用；所述的蛋白水解酶为质量比1:1的丝氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶混合；

4）抗生素菌渣、豆类丝核菌发酵液混合均匀，表面喷洒占混合料重量5%的酵母菌发酵
液，密封，35-37℃厌氧发酵16天，100℃的蒸汽常压灭菌，烘干，备用；所述的酵母菌发酵液
中酵母菌质量浓度为0.4-0.5%；

5）将所有原料混合、造粒、干燥，得防治蔬菜根结线虫的微生物制剂。

实施例2

一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂，原料重量份组成包括：抗生素菌渣70、豆类丝核
菌发酵液45、绿色木霉5、海洋放线菌N331 5、伊维菌素10、中药浓缩液10、钙镁磷肥50、羧甲
基淀粉钠8、泥炭土15、粘土10；抗生素菌渣为大环内酯类菌渣；泥炭土为低位泥炭土，有机
质含量多为60-70%，pH值6.0-7.0。

防治蔬菜根结线虫的微生物制剂制备方法，步骤包括：

1）制备豆类丝核菌发酵液：同实施例1；

2）制备中药浓缩液：中药原料重量份组成为蓖麻25、万寿菊15、紫草15、夹竹桃8、孔雀
草5、青蒿5、胜红蓟5，方法同实施例1；

3）取抗生素菌渣，雾化喷淋同体积的浓度为95%的双氧水，搅拌均匀，密封静置5h，调节
含水量为65%后注入臭氧并搅拌30min，使臭氧与抗生素菌渣充分混合，搅拌过程臭氧浓度
保持1.5g/m3，加热至50-60℃保温2h，降至室温，通风放置10天后，调节含水量至40%，加入
蛋白水解酶，加入浓度为0.8g/m3，28-32℃发酵7天，再次加热至50-60℃保温2h，杀菌烘干，
备用；所述的蛋白水解酶为质量比1:1:1的丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶混
合；

4）抗生素菌渣、豆类丝核菌发酵液混合均匀，表面喷洒占混合料重量5%的酵母菌发酵
液，密封，35-37℃厌氧发酵15天，100℃的蒸汽常压灭菌，烘干，备用；所述的酵母菌发酵液
中酵母菌质量浓度为0.4-0.5%；

5）将所有原料混合、造粒、干燥，得防治蔬菜根结线虫的微生物制剂。

实施例3

一种防治蔬菜根结线虫的微生物制剂，原料重量份组成包括：抗生素菌渣80、豆类丝核
菌发酵液50、绿色木霉10、海洋放线菌N331 10、伊维菌素15、中药浓缩液15、钙镁磷肥60、羧
甲基淀粉钠15、泥炭土20、粘土15；抗生素菌渣为氨基糖甙类菌渣、大环内酯类菌渣和喹诺
酮类菌渣混合；泥炭土为低位泥炭土，有机质含量多为60-70%，pH值6.0-7.0。

防治蔬菜根结线虫的微生物制剂制备方法，步骤同实施例1：

2）中药原料重量份组成为蓖麻30、万寿菊18、紫草18、夹竹桃10、孔雀草8、青蒿8、胜红
蓟8；

3）蛋白水解酶为同质量的丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶的
混合。

田间土壤栽培条件下杀根结线虫试验：

蔬菜品种：番茄、土豆、黄瓜、生姜。

供试土壤事消毒，经检查无线虫存活，每个蔬菜品种地块随机分为5组，实验组1-
3，对照组1-2。

供试药物：实验组1-3，本发明实施例1-3微生物制剂，用量为2-3kg /667m2；对照
组1，噻唑磷，参照正常用量；对照组2杜邦克安勃，参照正常用量。使用方法为：在番茄、黄
瓜、和生姜等蔬菜种植期，施于种植沟或种植穴中，然后移栽或播种即可。

供试线虫为分别为番茄根结线虫、南方根结线虫、北方根结线虫的二龄幼虫。

不同种类的根结线虫按每类线虫100条/1000克土壤的比例接种到土壤中。温室温
度为线虫生长的适宜温度28℃，施药3天后检查土壤和作物根部的线虫虫密度，计算相对防
效，实验结果见表1。

表1 田间土壤栽培条件下杀根结线虫试验药效

通过表1可以发现，本发明微生物制剂对结线虫2龄幼虫具有较高的毒力，对番茄根结
线虫的幼虫作用十分显著。

大棚蔬菜或露地蔬菜田间试验证明，防治根结线虫病，用本发明制成的微生物制
剂，用量为2-3kg /667m2，对根结线虫的防治效果均可达90%以上，于番茄、黄瓜等移栽时
撒施于移栽穴（沟）内，可完全控制根结线虫危害，且对蔬菜生长无不利影响。