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一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用.pdf

来源：花匠小妙招时间：2025-01-05 14:59

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810184064.X (22)申请日 2018.03.07 (83)生物保藏信息 CGMCC No. 14676 2017.09.26 (71)申请人山东新禾丰作物营养有限公司地址 251100 山东省德州市齐河县经济开发区金能大道 (72)发明人季玥秀牛赡光孙淑建张薇纪乐光 (74)专利代理机构济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 代理人韩百翠 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/00(2006.01) A。

2、01N 63/02(2006.01) A01P 5/00(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用 (57)摘要本发明公开了一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用。该菌株为金橙黄微小杆菌(Exiguobacteriumaurantiacum)菌株 8220605，是从山东省济宁市南四湖湖泥中分离获得的，已于2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为 CGMCCNo.14676。试验结果表明：金橙黄微小杆菌菌株8220605生物防治制剂防治番茄。

3、根结线虫效果显著，防治效果达到74.25，且番茄长势良好，无药害产生。权利要求书1页说明书9页序列表1页 CN 108102992 A 2018.06.01 CN 108102992 A 1.金橙黄微小杆菌(Exiguobacterium aurantiacum)菌株8220605，所述菌株的保藏编号为CGMCC No.14676。 2.权利要求1所述的金橙黄微小杆菌菌株8220605在防治番茄根结线虫中的用途。 3.一种生物防治制剂，包括权利要求1所述的金橙黄微小杆菌菌株8220605。 4.如权利要求3所述的生物防治制剂的制备方法，其特征是，包括以下步骤： (1)。

4、制备金橙黄微小杆菌菌株8220605的种子液； (2)将步骤(1)制备的种子液接种到固体培养基中， 2527下恒温培养； (3)将步骤(2)培养的培养物加入无菌水混合，过滤，将滤液接种至大量发酵培养基，在室温2527、相对湿度85以上的发酵室中进行发酵培养。 5.如权利要求4所述的生物防治制剂的制备方法，其特征是，所述步骤(2)中的固体培养基包括固料和无机盐，所述固料和无机盐的质量比为98.5 0.5；所述固料按质量比计为稻壳玉米粉豆粕粉麸皮55 25 12 8；所述无机盐的组分及质量比为：磷酸二氢钾25，硫酸镁5，硫酸铵5，轻质碳酸钙65；步骤(3)中的。

5、大量发酵培养基同步骤(2)的固体培养基。 6.如权利要求5所述的生物防治制剂的制备方法，其特征是，包括以下步骤： (1)将金橙黄微小杆菌菌株8220605的孢子移植到LB液体培养基， 2527摇床振荡培养35d得到种子液； (2)将步骤(1)制备的种子液按质量比10的比例接种到固体培养基中， 2527下振荡培养35d； (3)将步骤(2)培养的培养物加入无菌水按质量比1 15的比例混合，用灭菌纱布过滤，将滤液按体积比1 6的比例接种至大量发酵培养基，在室温2527、相对湿度85以上的发酵室中发酵培养89d。 7.权利要求3所述的生物防治制剂在防治番茄根结线虫中的用途。 8.一。

6、种生物防治方法，其特征是，向具有根结线虫的番茄植株施用权利要求1所述的金橙黄微小杆菌菌株8220605或者权利要求3所述的生物防治制剂。权利要求书 1/1 页 2 CN 108102992 A 2 一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用技术领域 0001 本发明属于植物病害生物防治技术领域。具体而言，本发明涉及一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用，以及采用该金橙黄微小杆菌制备的生物防治制剂。背景技术 0002 根结线虫危害是番茄作物生产过程中的主要危害之一，可造成番茄减产30以上，甚至绝收。近年来，我国日光温室等保护地蔬菜的种植面积不断扩大。

7、，日光温室温湿适宜，加上常年连作，造成根结线虫逐年加重。到目前为止，已报道的根结线虫有80多种，其中南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、北方根结线虫 (M.hapla)和花生根结线虫(M.arenaria)因其广分布性和多寄生性，是最重要的植物寄生线虫种类。在中国，这四种根结线虫在大多数省(区)均有发生，侵染农作物达百种以上，大田作物、蔬菜、果树、花卉、药用植物等几乎每种作物均可受到侵染。蔬菜根结线虫病是国内外最为严重的植物病害之一。由植物寄生线虫侵袭寄生引起的植物病害，受害植物可因。

8、侵入线虫吸收体内营养而影响正常的生长发育；线虫代谢过程中的分泌物还会刺激寄主植物的细胞和组织，导致植株畸形，使农产品减产和质量下降；此外，还可以通过线虫危害，加剧其它病害的发生，尤其是保护地蔬菜，致使寄主常年减产155，有时达70以上，严重地制约了大棚蔬菜、果树、花卉等作物的生产和出口创汇，有的甚至到了无法种植的地步。据估计，我国农作物的生产每年因根结线虫的为害而遭受的经济损失达亿元以上。 0003 由于根结线虫病害属于土传病害，所以防治较为困难。目前，人们主要采取有机磷类化学杀线虫剂、选种抗病作物品种、实施轮作、建立无病种苗基地和对进出口。

9、农作物进行严格的检疫来控制根结线虫病害的发生。化学杀线虫剂虽防效显著，但其选择性差，破坏农作物的生态环境；不易降解，高残留，对人畜极不安全；破坏土壤结构，造成土壤沙化；抗药性问题日益突出。这些因素使得化学杀虫剂的使用范围已受到严格的限制。因此，非化学性防治措施目前已成为农作物根结线虫病治理的核心，而生物防治则为其中最有前途的方法。 0004 微小杆菌属(Exiguobacterium spp.)分布范围广，生存环境多样，具有多种独特的性质，包括耐/嗜冷、耐/嗜热性、耐/嗜碱性、耐/嗜盐性，并且具有分解复杂有机污染物、转化重金属、促生作用等。

10、极具实用价值的功能。此外，微小杆菌属含有多种耐热、耐冷、耐碱性的蛋白及活性酶，可以应用到生物技术、生物修复、环境监测、工业、农业生产等诸多领域，这些丰富宝贵的生物资源亟待进一步发掘和利用。发明内容 0005 本发明的目的是提供一种用于高效防治番茄根结线虫的新的微生物金橙黄微小杆菌8220605。本发明的金橙黄微小杆菌菌株具有生长速度快、抗逆性强，在植物(尤其是番茄)表面能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。说明书 1/9 页 3 CN 108102992 A 3 0006 本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明所提供的菌株为金橙黄微。

11、小杆菌(Exiguobacterium aurantiacum)菌株8220605，是从山东省济宁市南四湖湖泥中分离获得的，已于2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为 CGMCC No.14676。其具有以下生物学特性：在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基或LB(Luria- Bertani)培养基上，该菌株呈点状小菌落，圆形扁平，表面光滑，边缘齐整，金橙黄，不透明；前期菌体呈细长、不规则的杆状，后期杆状缩短，呈现球状，无明显的杆球变换周期；。

12、无芽孢形成。在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上， 28下培养两天后，镜检，菌体细胞呈杆状，无运动性。经革兰氏染色呈阳性(以大肠杆菌为对照)。 0007 本发明的金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605的培养方法或繁殖方法包括： 0008 (1)普通培养保存采用LB培养基，配方为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠 10g，琼脂1520g，蒸馏水1000mL， pH调至7.17.3。 0009 (2)实验室液体培养采用LB液体培养基，配方为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL， pH调至7.17.3。 001。

13、0 (3)固体培养基配方：包括固料和无机盐，所述固料和无机盐的质量比为98.5 0.5；所述固料按质量比计为稻壳玉米粉豆粕粉麸皮55 25 12 8；所述无机盐的组分及质量比为：磷酸二氢钾25，硫酸镁5，硫酸铵5，轻质碳酸钙65。 0011 (4)大量发酵培养配方：同(3)中固体培养基配方。 0012 本发明还提供一种用于防治番茄根结线虫的生物防治制剂，所述生物防治制剂包括所述的金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605。 0013 并且，本发明还提供了一种用于防治番茄根结线虫的生物防治方法，所述生物防治方法包括向具有根结线虫的番茄植株施。

14、用上述金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株 8220605或者上述生物防治制剂。 0014 本发明也提供了上述金橙黄微小杆菌菌株或者上述生物防治制剂在防治番茄根结线虫中的用途。 0015 本发明所述的生物防治制剂的制备方法，包括以下步骤： 0016 (1)制备所述金橙黄微小杆菌菌株8220605的种子液； 0017 (2)将步骤(1)制备的种子液接种到固体培养基中， 2527下恒温培养； 0018 (3)将步骤(2)培养的培养物加入无菌水混合，过滤，将滤液接种至大量发酵培养基，在室温2527、相对湿度85以上的发酵室中进行发酵培养。 0019 在本发明的一个具体实施方。

15、案中，所述制备方法包括以下步骤： 0020 (1)将所述金橙黄微小杆菌菌株8220605的孢子移植到LB液体培养基， 2527摇床振荡培养35d得到种子液； 0021 (2)将步骤(1)制备的种子液按质量比10的比例接种到固体培养基中， 2527 下振荡培养35d； 0022 (3)将步骤(2)培养的培养物用无菌水按质量比1 15的比例混合，用灭菌纱布过滤，将滤液按体积比1 6的比例接种至大量发酵培养基，在室温2527、相对湿度85以上的发酵室中发酵培养89d。说明书 2/9 页 4 CN 108102992 A 4 0023 其中，步骤(1)中的LB液体培养基，配方为：。

16、胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠 10g，蒸馏水1000mL， pH调至7.17.3。 0024 步骤(2)中的固体培养基包括固料和无机盐，所述固料和无机盐的质量比为98.5 0.5；所述固料按质量比计为稻壳玉米粉豆粕粉麸皮55 25 12 8；所述无机盐的组分及质量比为：磷酸二氢钾25，硫酸镁5，硫酸铵5，轻质碳酸钙65。 0025 步骤(3)中的大量发酵培养基同步骤(2)的固体培养基。 0026 实验表明，本发明的金橙黄微小杆菌菌株具有生长速度快、抗逆性强，在植物表面能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。由该金橙黄微小杆菌制备的生物。

17、防治制剂，不仅能够高效的防治番茄根结线虫害，还能有效促进番茄生长，是一种极具应用前景的生物防治制剂。该微生物制剂可以作为生物农药或生物肥料，防治番茄根结线虫。试验结果表明：金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605固体发酵培养物防治番茄根结线虫效果显著，防治效果达到74.25，且番茄长势良好，无药害产生。具体实施方式 0027 下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是示例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明。

18、技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均在本发明的保护范围内。 0028 实施例1 0029 1、金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)8220605的分离与纯化 0030 本发明的金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)8220605是从湖泥中采用稀释平板法和平板划线法分离获得的，分离方法为： 0031 (1)微小杆菌的分离 0032 湖泥样品于2014年4月15日采集自山东省济宁市南四湖。称取1g湖泥于100mL无菌水中，置于30摇床中150rpm震荡10min，然后置于60水浴锅中孵育30min，取100 L 10-2、 10-3、 10-4稀。

19、释液涂布于LB培养基平板上，每个梯度涂布三个平行，在30培养2d后挑取LB 培养基上的不同形态的微生物菌落于LB培养基平板上进行划线，定时观察菌落生长情况。然后采用平板划线法，纯化微小杆菌菌株，并编号保存。 0033 (2)番茄根结线虫高效拮抗微小杆菌的筛选 0034 初筛 0035 A.根结线虫二龄幼虫悬浮液的制备 0036 从番茄根部挑取新鲜卵块，置于自制孵化装置中进行孵化， 24h后开始收集幼虫，每天收集一次，共收集一周。线虫液稀释为100条/mL， 4保存待用。 0037 B.金橙黄微小杆菌对南方根结线虫二龄幼虫的作用 0038 吸取菌悬液2mL，加入直径为7.5。

20、cm的灭菌培养皿中，再加入2mL二龄幼虫的悬浮液，以清水作对照，各处理3次重复， 25培养。分别在12h、 24h、 36h、 48h和60h后观察线虫的活力。 0039 C.金橙黄微小杆菌对南方根结线虫卵块孵化的作用 0040 吸取菌悬液2mL，加入直径为7.5cm的灭菌培养皿中，再加入10粒卵块，以清水作对说明书 3/9 页 5 CN 108102992 A 5 照，各处理3次重复， 25培养。分别在24h、 48h和60h后观察幼虫的孵化情况。 0041 复筛 0042 将筛选到的具有高效拮抗活性的微小杆菌菌株进行复筛，主要是经过耐温性、耐酸碱性、耐药性试。

21、验，筛选到耐性较好的微小杆菌菌株，进行盆栽防治试验和田间试验，并对筛选得到的菌株8220605进行鉴定。 0043 本发明人通过大量筛选工作得到一株能够高效防治番茄根结线虫病的金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)8220605。实验证明，该金橙黄微小杆菌固体发酵培养物在防治番茄根结线虫病中显示出非常高效的防治效果，使得番茄长势良好。因而，本发明的金橙黄微小杆菌是具有广泛应用前景的金橙黄微小杆菌新菌株，可以用于制备防治番茄根结线虫病的生物防治制剂。 0044 2、菌株鉴定 0045 (1)微生物学特性：在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基或LB(Luria-Berta。

22、ni)培养基上，该菌株呈点状小菌落，圆形扁平，表面光滑，边缘齐整，金橙黄，不透明；前期菌体呈细长、不规则的杆状，后期杆状缩短，呈现球状，无明显的杆球变换周期；无芽孢形成。在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上， 28下培养两天后，镜检，菌体细胞呈杆状，无运动性。经革兰氏染色呈阳性(以大肠杆菌为对照)。 0046 (2)分子生物学特性 0047 该菌株的16s rDNA基因序列测定结果如下(SEQ-1)： 0048 CCGACTTCGGGTGTTGCAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGACCCGGGAACGTATTCACCGCAGTAT。

23、 GCTGACCTGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGCAGGCGAGTTGCAGCCTGCAATCCGAACTGAGAACGGCTTTC TGGGATTGGCTCCACCTCGCGGCTTCGCTGCCCTTTGTACCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAACTCATAAGG GGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCCCTAGAGTGCCCAACCAAATGC TGGCAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTG。

24、ACGACAACCATG CACCACCTGTCACCCCTGCCCCCGAAGGGGAAGGTACATCTCTGTACCGGTCAGGGGGATGTCAAGAGTTGGTAAGG TTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGTCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCC TTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTTCAGCACTGAAGGGCGGAAACCCTCCAACACCTAG CACTCATCGTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCA。

25、CGCTTTCGCGCCTCAGCGTCAGTT ATAGGCCAGAGAGTCGCTTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTACAC TCTTCTCTCCTATACTCAAGCCTCCCAGTTTCCAATGGCCCTCCCCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTA AGAGGCCGCCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACATACGTATTACCGCGGCTGCTGGC ACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTCGCAAGGTACCGTCAAGGT。

26、GCCGCCATCGCCTGCGGCACTTGTTCTTCCCTTACA ACAGAACTTTACGACCCGAAAGCTTTCATCGTTCACGGGGCGTTGCTCCATCAGACTTTCGTCCATTGTGGAAGATT CCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTAT GCATTGTCGCCTTGGTGGGCCGTTACCCCACCAACTAGCTAATGCACCGCAAAGCCATCCATGGGCGACGCCGGAGC GCCTTTCATCAGCGGACCATGCGGTCCGA。

27、TGACACATCCGGTATTAGCCCCGATTTCTCGTGGTTACCCCAGACCTA TGGGCAGGTTCTTTACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTCATTCCGCCGTCGTCCCCCCGAAGGGTTCAGACTGGTT CCTGCGCTCGACTGCATGTAA。 0049 (3)细胞形态和理化实验结果说明书 4/9 页 6 CN 108102992 A 6 0050 表1金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)8220605的生理生化实验结果 0051 0052 该菌株8220605鉴定为金橙黄微小杆菌(Exiguobacterium aurantia。

28、cum)，已于 2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.14676。 0053 实施例2 0054 1、金橙黄微小杆菌菌株发酵过程 0055 LB液体培养基配方为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL， pH 调至7.17.3。 0056 固体培养基由固料、无机盐和水组成，所述固料和无机盐的质量比为98.5 0.5；所述固料按质量比计为稻壳玉米粉豆粕粉麸皮55 25 12 8；所述无机盐的组分及质量比为：磷酸二氢钾25，硫酸镁5，硫酸铵5，轻质碳酸钙65。配制方法：加。

29、入适量的水 (10-15倍质量)溶解无机盐，得到无机盐溶液；无机盐溶液与固料混合，并加入水最终调整固体培养基的含水量为40-60，以将固体培养基攥在手中，指缝中有水但不会滴落为宜。 0057 大量发酵培养基同固体培养基。 0058 金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605大量固体发酵过程： 0059 菌种种子液培养 0060 将金橙黄微小杆菌菌株(E.aurantiacum)8220605从试管斜面中挑取少量孢子，移至LB液体培养基中， 26摇床振荡培养35d，此为种子液。 0061 固体生产菌种的培养 0062 将种子液按10的比例接种到固体培养基(5。

30、00mL三角瓶)中， 26恒温培养3 5d，中间多次振荡。 0063 大量固体发酵 0064 将中固体培养的培养物用无菌水按1 15比例稀释，并用灭菌纱布过滤，除去粗渣，即为生产菌液，接种比例按1 6接种于大量发酵培养基。将接种的原料置于发酵室(26 和相对湿度85以上)中发酵培养89d，活性菌8亿/g。 0065 为了明确金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605固体发酵培养物对番茄说明书 5/9 页 7 CN 108102992 A 7 根结线虫的防治效果，为其推广应用提供依据。我们于2016年10月12月在山东省聊城市莘县进行试验，现将试验结。

31、果报告如下： 0066 1供试材料及方法 0067 1.1供试药剂 0068 按本发明实施例2发酵方法生产的金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605 固体发酵培养物(8亿/g)； 1.8阿维菌素乳油(河南绿野之星作物保护有限公司生产，市售)。 0069 1.2试验材料与防治对象 0070 试验材料为番茄，品种为西粉3号；防治对象为番茄根结线虫病(Meloidogyne spp.)。 0071 1.3试验地情况 0072 试验地设在山东省聊城市莘县十八里镇宁塘村冬暖大棚。该地区由于连续种植番茄，番茄根结线虫病的发生也日益严重，特别是在温室条件下四季连续发病，。

32、其毁苗种植事件经常发生，产量损失达2040，严重的甚至绝收。试验土壤类型为潮土，有机质含量为1.21， pH值为7.8，所有试验小区栽培条件及管理措施一致，施药时番茄根结线虫处于发病初期。 0073 1.4试验设计及安排 0074 本试验共3个处理，分别为金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605固体发酵培养物20倍液、 1.8阿维菌素乳油1000倍液、不施药清水作对照，每个处理4次重复，每个处理60株。于发病初期对病株及其附近植株灌根，连续2次，每次每病株灌药液250ml。于 2016年10月16日和12月15日各灌根一次。 007。

33、5 1.5试验调查及计算方法 0076 1.5.1气象条件 0077 第1次施药(10月16日)当日多云，风力3级，最高气温为22，最低气温为13，相对湿度为70。第2次施药(12月15日)，当日晴，风力3级，最高气温为7，最低气温为-4，相对湿度为69。 0078 1.5.2药效及安全性调查 0079 药效调查：最后一次施药后14d进行调查。调查30株，调查病株及根系受侵染程度，记录病情级数并计算病情指数。 0080 安全性调查：于第一次施药后7d和14d观察番茄的安全性，如有药害发生，详细描述药害症状并按药害程度分级标准确定药害程度。 0081 番茄根。

34、结线虫分级标准： 0082 0级：根系上无根结。 0083 1级：轻度感染，仅有少量的小根结，根结率在3以下。 0084 2级：根结率为325。 0085 3级：根结较多，根结率为2550。 0086 4级：在根瘤上有再次根结， 5075根系有根结。 0087 5级：根结相互连接成根结团块， 75以上根系有根。 0088 1.5.3药效计算方法说明书 6/9 页 8 CN 108102992 A 8 0089 防治效果按式(1)、 (2)计算： 0090 0091 0092 式中： CK0空白对照区施药前病情指数； 0093 CK1空白对照区施药后病情指数； 0094 PT。

35、0 药剂处理前施药前病情指数； 0095 PT1 药剂处理后施药后病情指数。 0096 1.5.4对番茄的直接影响 0097 观察药剂对番茄有无药害，记录药害的类型和程度。此外，也要记录对番茄长势的影响。 0098 用下列方式记录药害： 0099 (a)如果药害能被测量或计算，要用绝对值表示，例如株高。 0100 (b)在其他情况下，可以按下列两种方法估计药害程度和频率： 0101 按照药害分级方法记录每小区的药害程度，以、 +、 +、 +、 +表示。 0102 药害分级方法： 0103 ：无药害； 0104 +：轻度药害，不影响植物生长； 0105 +：中度药害，可。

36、复原，不会降低植物生物量； 0106 +：中度药害，影响植物正常生长，对植物生物量造成一定程度的降低； 0107 +：严重药害，植物生长受阻，植物生物量降低严重。 0108 将药剂处理区与空白对照区比较，评价其药害百分率。同时，要准确描述植物的药害症状(矮化、褪绿、畸形等)。 0109 2结果 0110 2.1供试药剂对番茄根结线虫的防治效果 0111 供试药剂对番茄根结线虫的防治效果如表2-3所示。表3结果显示，金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605固体发酵培养物和1.8阿维菌素乳油对番茄根结线虫病均具有较好的防治效果，其中前者的防。

37、治效果达到70以上。 0112 从番茄根结线虫田间试验的病情指数来看(表3)，最后一次施药后14d，金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)8220605防治效果为74.25，明显高于1.8阿维菌素乳油 52.72的防治效果。 0113 表2三种药剂处理前番茄根结线虫病害情况说明书 7/9 页 9 CN 108102992 A 9 0114 0115 表3三种药剂处理对番茄根结线虫的防治效果 0116 0117 0118 2.2番茄安全性调查 0119 经施药7d和14d观察，各药剂处理区与对照区相比，番茄生长正常，无药害产生，说说明书 8/9 页 10 CN 1081。

38、02992 A 10 明金橙黄微小杆菌固体发酵培养物对番茄安全。 0120 3小结 0121 3.1从病情指数和防治效果来看，金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605 (保藏号CGMCC No.14676)对番茄根结线虫具有较好的防治效果，最后一次施药后14d其防治效果达到70以上。 0122 3.2从番茄长势看，金橙黄微小杆菌(E.aurantiacum)菌株8220605对番茄具有促进生长效果，没有药害，安全可靠。说明书 9/9 页 11 CN 108102992 A 11 SEQUENCE LISTING 山东新禾丰作物营养有限公司一株金橙黄微小杆。

39、菌及其在防治番茄根结线虫中的应用 0 1 PatentIn version 3.3 1 1407 DNA 金橙黄微小杆菌（Exiguobacterium aurantiacum）菌株8220605的16s rDNA基因序列 1 ccgacttcgg gtgttgcaaa ctctcgtggt gtgacgggcg gtgtgtacaa gacccgggaa 60 cgtattcacc gcagtatgct gacctgcgat tactagcgat tccgacttca tgcaggcgag 120 ttgcagcctg caatccgaac tgagaacggc tttctgggat 。

40、tggctccacc tcgcggcttc 180 gctgcccttt gtaccgtcca ttgtagcacg tgtgtagccc aactcataag gggcatgatg 240 atttgacgtc atccccacct tcctccggtt tgtcaccggc agtctcccta gagtgcccaa 300 ccaaatgctg gcaactaagg acaagggttg cgctcgttgc gggacttaac ccaacatctc 360 acgacacgag ctgacgacaa ccatgcacca cctgtcaccc ctgcccccga aggggaagg。

41、t 420 acatctctgt accggtcagg gggatgtcaa gagttggtaa ggttcttcgc gttgcttcga 480 attaaaccac atgctccacc gcttgtgcgg gtccccgtca attcctttga gtttcagcct 540 tgcgaccgta ctccccaggc ggagtgctta atgcgttagc ttcagcactg aagggcggaa 600 accctccaac acctagcact catcgttacg gcgtggacta ccagggtatc taatcctgtt 660 tgctccccac gct。

42、ttcgcgc ctcagcgtca gttataggcc agagagtcgc tttcgccact 720 ggtgttcctc cacatctcta cgcatttcac cgctacacgt ggaattacac tcttctctcc 780 tatactcaag cctcccagtt tccaatggcc ctccccggtt gagccggggg ctttcacatc 840 agacttaaga ggccgcctgc gcgcgcttta cgcccaataa ttccggacaa cgcttgccac 900 atacgtatta ccgcggctgc tggcacgtag t。

43、tagccgtgg ctttctcgca aggtaccgtc 960 aaggtgccgc catcgcctgc ggcacttgtt cttcccttac aacagaactt tacgacccga 1020 aagctttcat cgttcacggg gcgttgctcc atcagacttt cgtccattgt ggaagattcc 1080 ctactgctgc ctcccgtagg agtctgggcc gtgtctcagt cccagtgtgg ccgatcaccc 1140 tctcaggtcg gctatgcatt gtcgccttgg tgggccgtta ccccaccaac tagctaatgc 1200 accgcaaagc catccatggg cgacgccgga gcgcctttca tcagcggacc atgcggtccg 1260 atgacacatc cggtattagc cccgatttct cgtggttacc ccagacctat gggcaggttc 1320 tttacgtgtt actcacccgt ccgccgctca ttccgccgtc gtccccccga agggttcaga 1380 ctggttcctg cgctcgactg catgtaa 1407 序列表 1/1 页 12 CN 108102992 A 12 。