女贞子的成分分析和鉴定.doc

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女贞子的成分分析及鉴定 胡红 （阿坝师范高等专科学校 08化教 学 【摘要】目的为女贞子药材的质量评价提供科学依据。方法： 以固相萃取（SPE）进行样品供试液的前处理，采用RPHPLC法，分别测定齐墩果酸与熊果酸的含量，色谱柱：Kromasil KR1005 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：［乙腈甲醇（体积比1∶1）水（体积比90∶10）］；流速：0.8 mL/min；检测波长：210 nm；柱温25 ℃；进样量：2 μL。结果 样品中齐墩果酸与熊果酸得到较好的分离；齐墩果酸在0.108～3.24 μg的范围内、熊果酸在0.060～1.800 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率分别为100.50％、98.05％；11批次样品中齐墩果酸的含量为0.639～1.340 mg/g，熊果酸的含量为0.168～0.377 mg/g。结论 采用SPE进行供试品溶液前处理，能够有效消除女贞子药材中杂质成分对末段吸收波长的干扰，所建立的方法具有简便、稳定、可重复的特点，可用于女贞子药材的质量控制。固相萃取（SPE）是一种新兴的样品前处理技术，近年来已经应用于中药含量测定方法研究［6-10］，但还未见有将此方法应用于女贞子的含量测定中。本文报道采用此技术进行女贞子药材样品的前处理，结合反相高效液相色谱法，消除了样品中杂质对齐墩果酸、熊果酸在紫外末端测定的干扰，使样品中齐墩果酸与熊果酸在同一色谱条件下较好地得到了分离，并进行了多批次样品的含量比较，以期为女贞子药材的质量评价提供更稳定可靠的方法。 【关键词】女贞子；齐墩果酸；对羟基苯乙醇苷类和裂环环烯醚萜苷类；挥发油类；多糖；磷脂；微量元素；其它；含量测定；固相萃取；HPLC 1概述 女贞子为常用中药，具有滋补肝肾、明目乌发的功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等证［1］724。女贞子中主要含有三萜类成分，其中齐墩果酸为主要的代表性成分，此外尚含有熊果酸等。有关女贞子药材及含女贞子中药复方制剂的质量多以齐墩果酸的含量作为评价指标［1］728。中国药典2005年版（一部）［3］收载女贞子的含量测定方法为薄层扫描法测定齐墩果酸的含量。近年来，亦有文献采用HPLCUV方法［4］以及HPLCELSD方法［5］测定本??中两成分的含量，但由于HPLCUV测定波长在末端吸收，不能有效排除供试品中的杂质对测定结果准确度的影响；而ELSD检测器还未能普遍应用。因此上述方法都有一定的局限性。 2成分分析 2.1齐墩果酸 荣勇等用双波长扫描法对女贞子中有效成分齐墩果酸进行了含量测定，将女贞子粗粉加油醚回流提取、脱脂，再用氯仿提取。刘亚红等用薄层一比色测定法，用酸水解氯仿提取法，乙醇提取法，石油醚脱脂，氯仿提取法同等条件下测定齐墩果酸含量分别为1．76、1．63、1．钾，CV(％)为2．45、3．06、3．19。可见，采用酸水解氯仿萃取同步法提取女贞子中齐墩果酸的效果最佳。程晓芳等自女贞子醇提物的乙酸乙酯部分以低压硅胶柱层析的方法进行分离纯化，得到齐墩果酸。张兴辉等将女贞子醇提液用乙酸乙酯萃取，经反复硅胶柱层析分离和纯化，分离得到齐墩果酸(Oleanolic?acid)。 2.2对羟基苯乙醇苷类和裂环环烯醚萜苷类 国外学者从女贞子及日本女贞的果实中分离得到女贞苷(nuezhenide)、10一羟基橄榄苦苷(10一hvdmxy．?oleumpein)、橄榄苦苷(oleuropein)、Ligustroside，10一hv—?droxyligustroside、新女贞苷(neonuezhenide)、oleuropeinic?acid、ligustrosidic?acid等裂环环烯醚萜苷类化合物。另有报道从日本女贞(Ligustrum?japonicum)的果实中分离鉴定了对羟基苯乙醇一口一D一葡萄糖苷(p—hydrox—?yphenethyl—β—D—glucoside)以及methyl?glueoleside、8一epikingiside、ligustalosides?A和ligustalosides?B等裂环环烯醚萜苷类化合物。石力夫等从女贞子水溶性部位分离得到对羟基苯乙醇一p—D一葡萄糖苷(p—hydmxyphenethyl—β一D—ducoside)、对羟基苯乙醇一a—D一葡萄糖苷(p—hy—?droxyphenethyl—a—D—glucoside)，又分离得到2种新的裂环环烯醚萜苷、特女贞子苷(specnuezhenide)和女贞苦苷(neuzhengalaside)。 2.3挥发油类 李开辉等将成熟的女贞子洗净，晒干后进行水蒸气蒸馏，蒸馏液用乙醚萃取，回收得女贞子挥发油。应用GC—MS—DS对女贞子挥发油进行分析，

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