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一种女贞子药材的梯度全信息薄层鉴别方法与流程

来源：花匠小妙招时间：2025-05-12 15:59

本发明涉及一种女贞子药材的梯度全信息薄层鉴别方法。即，按脂溶性、中极性和水溶性的梯度顺序，以薄层鉴别的形式，检视女贞子药材中从脂溶性到水溶性全部信息成分斑点。

背景技术：

所谓的中药材梯度全信息薄层鉴别，顾名思义就是将高效液相梯度洗脱的内涵，引申到中药薄层鉴别领域，将中药材中的脂溶性、中极性以及水溶性成分，依据相似相容的溶解定律，按脂溶性、中极性、极性的顺序，在各自极性不同的展开溶剂中，通过反复地吸附与解吸附，将药材中具有检测信息的大部分有效成分，按着极性大小，在极少数的薄层板上，不同的检视条件下，获得尽可能全的斑点信息图谱，由此组成一套从脂溶性到水溶性成分的全信息薄层色谱图和鉴别方法，提供不同来源的女贞子药材进行整体质量评价与监督；以及多种工艺制备的复方制剂，作为不同极性成分的薄层鉴别参考。

所谓的全信息系指在脂溶性成分的检测部分，其薄层板的最前沿，已经无任何信息斑点呈现，而在水溶性成分的检测部分，在薄层板的基线处，也不再有明显的斑点残痕，说明所有的信息斑点都已经包括在梯度的薄层展开范围内，再配合多种检视条件，使能检视到的信息斑点，在不同的展开剂与检视条件下全部都呈现出来，获取到从脂溶性到水溶性全信息量。

中药女贞子为中国药典历版所收载品种，具有滋补肝肾，明目乌发之功效，用于肝肾阴虚，眩晕耳鸣，腰膝酸软，须发早白，目暗不明，内热消渴，骨蒸潮热。是一种临床上常用的滋补中药材。目前从女贞子分离到的化学成分主要为三萜类，环烯醚萜类，苯乙醇类和黄酮类等。三萜类是女贞子中含量较多成分，其中齐墩果酸含量最大。其次还有坡模酸，2α-羟基齐墩果酸等，水溶性较大的女贞子苷，特女贞苷，橄榄苦苷等单环烯醚萜化合物。其薄层鉴别中国药典2015年版一部【1】，采用以齐墩果酸为对照，将样品和对照品点于硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（40∶1∶1）为展开剂，展开后，喷以10%硫酸乙醇溶液显色，检视齐墩果酸的颜色斑点。信息斑点单一，检测的是脂溶性成分。如若药材经水煎煮之后，依据相似相容的提取原理，脂溶性成分提取到的很少，鉴别就无法进行。

也有以特女贞苷为对照，进行的薄层鉴别文献报道【2】，方法是：取女贞子粉末10g，加70%的乙醇100ml，回流提取1.5小时，滤过，滤渣再加70%的乙醇100ml，回流提取1.5小时，滤过，合并2次滤液，回收乙醇，水溶液通过已处理好的d101大孔树脂柱，装柱体积为70ml，静置12小时，然后分别用15倍体积的水，7倍体积的10%乙醇和6倍体积的45%乙醇溶液洗脱，收集45%乙醇洗脱部分，减压浓缩并蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。应用硅胶h板，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（6∶3∶1∶1）为展开剂，以1%香草醛硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热显色，可见光下检视。由该操作程序可见方法较繁琐、费时，检测1批饮片，需花费时间9～10小时，有机溶剂1000余ml，展开的薄层板上仅呈现了2个主斑点。

目前未查阅到女贞子的其他薄层鉴别方法，也未见有关梯度全信息薄层鉴别方法报道。

为多信息全面控制女贞子药材质量，并为不同提取工艺制备的复方制剂提供薄层鉴别参考方法，本着简便、快捷、低成本、高效率、无环境污染的宗旨，对女贞子药材进行了专题多信息梯度薄层鉴别研究。获得了一套简便、快捷、无环境污染的全息女贞子薄层鉴别方法及图谱。

技术实现要素：

用甲醇超声提取，得到供试品与对照药材溶液，采用同一供试品溶液，以3种不同极性的展开剂，在3块薄层板上，多种检视条件下，检视了女贞子药材的约36种信息斑点。各成分相互交叉，但在各自的检视条件下，互不干扰，都能呈现出清晰的荧光斑点或颜色斑点。完成该梯度薄层鉴别只需药材和对照药材各0.2g、提取溶剂4ml、展开剂30ml、时间1.5小时。简便、快捷、高效，是目前已报道方法都不具备的。适用于女贞子药材的多信息快速质量监督与评价；并为其组方的复方制剂提供了不同极性成分的薄层鉴别参考。

本发明解决其技术问题所采用的方案为：

（1）女贞子药材脂溶性成分薄层鉴别取女贞子药材0.2g，研细，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取女贞子对照药材0.2g，同法制备对照药材溶液；再取齐墩果酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各5～6μl，分别点于同一高效硅胶gf254薄层板上，以体积比为4∶1∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的红色荧光斑点；喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色荧光主斑点；再置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

（2）女贞子药材中极性成分薄层鉴别吸取（1）项下的供试品溶液和对照药材溶液各5～6μl，分别点于同一高效硅胶gf254薄层板上，以体积比为1∶5∶1∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

（3）女贞子药材水溶性成分薄层鉴别吸取（1）项下的供试品溶液和对照药材溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以体积比为5∶1∶0.2∶0.3的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置暗室内，透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

本发明的原理如下：

依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再采用不同极性的展开剂，进行展开，各种化学成分就会随着不同的展开剂，依据吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的能力不同，而在各自的薄层板上得以良好分离。再借助各种极性近似的有效成分，在同一块薄层板上，不同的检视条件下，虽然重叠，但在不同的层次上，互不干扰，呈现出各自不同的斑点颜色，获得多信息的薄层色谱图。按展开剂的极性大小，将各薄层板上分离良好的多信息梯度薄层色谱图，从非极性到极性连接起来，就形成一套全息薄层色谱图。

本发明的创新点及有益效果如下：

1.女贞子药材以体积比为4∶1∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，将脂溶性成分展开后，将薄层板置紫外光灯365nm下检视到2个红色荧光斑点（图1）；置紫外光灯254nm下检视无任何信息斑点；喷雾10%硫酸显色后，置紫外光灯365nm下检视到13个不同颜色荧光斑点（图2），颜色鲜艳，斑点清晰；再置暗室内透过灯光检视到13个色泽不一的颜色斑点（图3）。同一块薄层板在3种检视条件下，依据其rf值重合情况对比分析，共检出互不重合的脂溶性成分斑点15个。同一块薄层板上同时检测女贞子的15种脂溶性成分，目前还未见相关报道。

2.女贞子药材以体积比为1∶5∶1∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开中极性成分，置紫外光灯365nm下检视到2个荧光斑点，1个是亮蓝色的，1个是浅粉色的（图4）；置紫外光灯254nm下检视到4个棕褐色斑点（图5）；喷雾10%硫酸乙醇溶液显色后，置紫外光灯365nm下检视，呈现出9个不同颜色荧光斑点（图6）；再将显色的薄层板置暗室内透过灯光检视到10个颜色深浅不一的棕褐色斑点（图7）；在不同的检视条件下，做到了不同成分斑点的互补，做到了同一块薄层板上，4种检视条件下，共检出互不重合的中极性成分斑点10个。

3.女贞子药材以体积比为5∶1∶0.2∶0.3的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开水溶性成分，置紫外光灯365nm下检视到颜色不一、强度不一的荧光斑点7个（图8）；置紫外光灯254nm下检视到6个棕褐色斑点（图9）；喷雾10%硫酸乙醇溶液显色后，置紫外光灯365nm下检视到颜色不一、强度不一的荧光斑点11个（图10）；再将显色的薄层板置暗室内透过灯光检视到颜色深浅不一的棕褐色斑点11（图11）；从其rf值分析，在不同的检视条件下，同一块薄层板上，4种检视条件下，共检出互不重合的水溶性成分斑点11个。

4.采用同一供试品溶液和对照药材溶液，以3种不同极性的展开剂，在3块薄层板上，多种检视条件下，共检视到女贞子药材的信息斑点36个。除去中极性和水溶性成分，在衔接的时候，有4～5个重叠的成分斑点，在3块薄层板上检出的不同成分斑点约为30个左右。非常实用于简便、快捷、多信息对女贞子药材进行质量评价；也适用于不同组方的复方制剂，进行薄层鉴别时，作为排除干扰参考。

5.36种信息斑点基本涵盖了女贞子从脂溶性到水溶性的全部信息量，与目前已报道的只检测齐墩果酸或特女贞子苷的方法相比，检测的信息量大幅度提升，而且操作简便、快捷、高效，无环境污染，经济实用性强。完成该梯度薄层鉴别只需药材和对照药材各0.2g、提取溶剂4ml、展开剂30ml、时间1.5小时。该梯度全信息薄层鉴别方法还未见相同报道，具有新颖性、创造性和实用性。

附图说明

图1为女贞子药材脂溶性成分在紫外光灯365nm下的薄层tlc图。

图2为女贞子药材脂溶性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，紫外光灯365nm下检视的薄层tlc图。

图3为女贞子药材脂溶性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，暗室内透过灯光检视的薄层tlc图。

图4为女贞子药材中极性成分在紫外光灯365nm下的薄层tlc图。

图5为女贞子药材中极性成分在紫外光灯254nm下的薄层tlc图。

图6为女贞子药材中极性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，紫外光灯365nm下检视的薄层tlc图。

图7为女贞子药材中极性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，透过灯光检视的薄层tlc图。

图8为女贞子药材水溶性成分在紫外光灯365nm下的薄层tlc图。

图9为女贞子药材水溶性成分在紫外光灯254nm下的薄层tlc图。

图10为女贞子药材水溶性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，紫外光灯365nm下检视的薄层tlc图。

图11为女贞子药材水溶性成分用10%硫酸乙醇溶液显色后，透过灯光检视的薄层tlc图。