芦荟多糖的纯化工艺与体外抗肿瘤活性

芦荟多糖的纯化工艺与体外抗肿瘤活性

皮文霞“２，丁辉１，程爱斌１，谭仁祥”

１南京大学功能生物分子研究所．南京２１０【）９３２南京中医药走学药学院，南京２１００４２

【摘要】目的：研究芦荟多榜的提取、纯化工艺厦体外抗肿瘤活性，为芦茎的产业化开发提供实验依据。

方法：采用水提醇沉，三氯乙酸法除蛋白．ＤＥＡＢ５２离子交换色谱分离。用＆ｐｈａｃ川ｓ＿４００凝胶柱层析纯化并确

定芦荟多糖的相对分子量，ＨＰＭ法检测纯度，Ｇｃ法鉴别单糖组成厦分子摩尔比。以ｍＴ法观察其体外抗肿瘤

活性等。结果：从中华芦萎（舭Ｍｔ嗽Ｌ－ｏ盯．蒯脚括（Ｈａｗ．）＆ｒ龄ｒ．）凝殷冻干粉中提取分离得到纯多糖ＡｖＰ，经

Ｈ眦检测为单一对称峰，相对分子量为８６０００，由甘露糖和葡萄糖组成，摩尔比为１０，３：１．ｏ。ＡｖＰ对人肝癌细

胞（ｓＭＭｃ７７２１）、人胃癌细胞（ＢＧ０８２３）厦人肺癌细胞（Ａ５４９）的增殖均有抑制作用。结论：谊法分离的芦荟多糖Ａ、甲纯度好，收率高达３．６％，可用于进一步的研究和开发，提高芦荟的资源利用率。

【关键词】芦萎多糖；纯化工艺；ＨＰＬｃ检剥；体外抗肿瘤活性ｆ中国分类号】Ｒ２８幸．２

【文献标识码】＾

【文章编号】

１６７２—３６５Ｉ（２∞７）睢０４２５一∞

芦荟为百合科芦荟属多年生肉质草本植物，已有几千年的药用历史，广泛应用于医药、食品、日用和美容等领域，被称为“万能良药”。芦荟有５００多个品种，药用的就达５０余种。我国适宜种植芦荟的地域辽阔，资源相当丰富。现代研究证明芦荟多糖

司；ＤＥＡＥ＿５２，ＷＩｌａⅡ脚１；Ｓｅｐｈａｃ州Ｓ４００，ＡＩｌｌｅ出锄；

苯酚、浓硫酸、三氯乙酸、蓝色葡聚糖、口甘露糖、口葡萄糖、口半乳糖、厶鼠李糖、口阿拉伯糖、肌醇、二甲亚砜等，上海生化试剂公司；ＲＰＭＩ．１６４０培养基，Ｇｉｂｃｏ；胰蛋白酶，Ｍｅｒｃｋ；噻唑蓝（Ｍ１．ｒ），ｓ咄．

是其主要有效成分之一，具有杀菌消炎、抗病毒、抗

胃溃疡、抗肿瘤和免疫调节等作用”。“。

ｍ；小牛血清、人肝癌细胞（ｓＭＭｃ．７７２１）、人胃癌细

胞（ＢＧｃ－８２３）、人肺癌细胞（Ａ５４９），中科院上海细胞所。１．２仪器

本研究从中华芦荟（Ａｋ

ｔｚｍ

Ｌ．Ｍ－．ｃ肮Ｍ括

（｝ｈｗ．）Ｂｅ噼ｒ，）凝胶冻干粉中提取分离得到一种纯多糖ＡＶＰ，其ＨＰＩｃ图谱为单一对称峰。对ＡｖＰ

进行了体外抗肿瘤活性的初步实验。一般从原植物中提取芦荟多糖的得率小于ｌ％，且步骤繁杂，纯度低”３，难以满足芦荟多糖的进一步研究与开发（如合成衍生物等）。而本文采用的提取纯化方法易操作，纯多糖得率达３％以上，为芦荟多糖的深入研究奠定了实验基础。１材料１．１药品与试剂

芦荟凝胶冻干粉，苏州赛恩生物工程有限公

Ｊ２高速离心机，Ｂｅｃｋｒ啪；ｃＲ

２２Ｅ离心机，埘ｔａ－

ｃ１１ｉ；冷冻干燥机，ｈｂｃｏｎｃ０ｕｓ＆；Ｕ－３０００型分光光度计，Ｈｉｔａｃｈｉ；Ｂｓ玉１００自动部分收集器，上海沪西分

析仪器厂；｝踟１１００，Ａ百ｌｅｎｔ；ｓｈｉｒｌｌａｄｚＩｌＧｃ－９Ａ；全

自动酶标光度计，Ｂ胁ＲＡＤ，ｕｓＡ。

２方法与结果２．１；糖的提取

称取５０Ｒ芦荟凝胶冻干粉，加３００ｒＩｌＬ蒸馏水超声溶解，加入医用酒精至醇浓度达７０％，静置１２ｈ后离心，沉淀真空干燥得粗多糖。２．２多糖的纯化２，２．１除蛋白

【收稿日期】卿—０９—３０

【＋通讯作者】谭仁祥：长江学者．救授，博导，１Ｈ：晒—８３５９２９４５

称取１．２ｇ粗多糖，加１

０００ｍＬ

Ｅ．ｍｍｌ：ｒｍ＠ｎ¨曲，∞

蒸馏水超声溶解，加入三氯乙酸至浓度为３％，低温静置８ｈ，抽滤，滤液稀释后用分光光度计检测，

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