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厚朴花药材的UPLC特征图谱的构建方法及检测方法与流程

来源：花匠小妙招时间：2025-04-24 16:32

本发明涉及中药质量分析检测的技术领域，特别涉及一种厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法以及一种鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法。

背景技术：

厚朴花为木兰科植物厚朴magnoliaofficinalisrehd.etwils.或凹叶厚朴magnoliaofficinalisrehd.etwils.var.bilobarehd.etwils.的干燥花蕾。其性苦，微温。归脾、胃经。芳香化湿，理气宽中。临床主要用于脾胃湿阴气滞，胸脘痞闷胀满，纳谷不香。厚朴作为我国传统用材和名贵中药材树种，属国家ⅱ级重点保护野生植物，是国家二级濒危保护植物，国家二级中药材，也是我国特产。

据文献报道，厚朴花主要成分为木脂素类化合物、倍半萜类化合物等，其中质量控制研究主要集中在厚朴酚与和厚朴酚两种指标成分含量测定，但是中年药材成分组成受基源、采收季节、产地以及产地加工方式等影响较大，因此建立和推广中药材特征图谱的整体检测技术，以提升能够表征中药有效性的检测水平，成为亟待解决的问题。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法，重现性良好，准确可靠，通过所建立的uplc特征图谱可以有效控制厚朴花药材质量，并实现对厚朴花药材及其伪品山玉兰鉴别。

本发明所要解决的技术问题还在于，提供一种鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法，检测方法简单，能快速、方便地鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰，结果精准。

为达到上述技术效果，本发明对不同产地的厚朴花的特征图谱进行研究，建立了厚朴花药材的特征图谱，提升该药材质量控制水平。本发明提供了一种厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法，包括：

(1)取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成含厚朴酚、和厚朴酚的混合溶液，制得参照物溶液；

(2)取厚朴花药材，利用65％-75％甲醇进行提取，制得供试品溶液；

(3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，建立厚朴花药材的uplc特征图谱。

其中，所述梯度洗脱按下述程序进行：

0～3min，流动相a为8％，流动相b为92％；

3～19min，流动相a从8％→13％，流动相b从92％→87％；

19～22min，流动相a从13％→13.5％，流动相b从87％→86.5％；

22～25min，流动相a从13.5％→60％，流动相b从86.5％→40％；

25～32min，流动相a为60％，流动相b为40％；

32～33min，流动相a从60％→8％，流动相b从40％→92％；

33～40min，流动相a为8％，流动相b为92％。

优选的，所述参照物溶液由下述方法制得：

取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含厚朴酚60μg、和厚朴酚40μg的混合溶液，制得参照物溶液。

优选的，所述供试品溶液由下述方法制得：

取厚朴花药材粗粉1.0-2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10-20ml，称定重量，超声处理20-30分钟，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

进一步优选的，所述供试品溶液由下述方法制得：

取厚朴花药材粗粉1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，超声处理30分钟，超声处理的功率为300w，频率为40khz，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

优选的，所述厚朴花药材的uplc特征图谱由下述方法建立：

分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.8μm；以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，流速为每分钟0.35ml，柱温为30℃，检测波长为300nm。

优选的，所述厚朴花药材的uplc特征图谱包括5个特征峰，分别为峰1、峰2、峰3、峰4和峰5，其中，与和厚朴酚参照物相对应的峰4为s峰，峰1、峰2、峰3与s峰的相对保留时间应该在规定值的±10％之内，所述规定值包括：峰1为0.37、峰2为0.52、峰3为0.64。

相应的，本发明还提供了一种用于鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法，包括：

(1)取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成含厚朴酚、和厚朴酚的混合溶液，制得参照物溶液；

(2)取厚朴花药材，利用65％-75％甲醇进行提取，制得供试品溶液；

(3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，建立厚朴花药材的uplc特征图谱；

(4)取预设量的供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，得到供试品色谱；

(5)对供试品色谱和厚朴花药材的uplc特征图谱进行比较，通过供试品色谱的各特征峰的相对保留时间，来判定厚朴花药材及其伪品山玉兰。

优选的，所述厚朴花药材的uplc特征图谱包括5个特征峰，分别为峰1、峰2、峰3、峰4和峰5，其中，与和厚朴酚参照物相对应的峰4为s峰；

计算特征峰1，峰2，峰3与s峰的相对保留时间，若峰1、峰2、峰3与s峰的相对保留时间在规定值的±10％之内，所述规定值包括：峰1为0.37、峰2为0.52、峰3为0.64，则判断为厚朴花药材；

若峰4和峰5的相应保留时间位置无色谱峰，则判定为伪品山玉兰。

优选的，所述梯度洗脱按下述程序进行：

0～3min，流动相a为8％，流动相b为92％；

3～19min，流动相a从8％→13％，流动相b从92％→87％；

19～22min，流动相a从13％→13.5％，流动相b从87％→86.5％；

22～25min，流动相a从13.5％→60％，流动相b从86.5％→40％；

25～32min，流动相a为60％，流动相b为40％；

32～33min，流动相a从60％→8％，流动相b从40％→92％；

33～40min，流动相a为8％，流动相b为92％。

现阶段，厚朴花药材的鉴别主要从性状、含量测定、薄层色谱、紫外光谱等方面，而这些方面特征性不强，差异不大，本发明采用超高效液相(uplc)色谱分析技术，控制厚朴花药材的整体质量的问题，弥补了现有质量控制技术的不足。本发明建立了厚朴花药材的uplc特征图谱，具有以下有益效果：

(1)本发明利用65％-75％甲醇对厚朴花药材进行提取，并注入液相色谱仪，该液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b，按规定进行梯度洗脱，建立了厚朴花药材的uplc特征图谱。所述厚朴花药材的uplc特征图谱可充分展示厚朴花药材的化学成分的特征，特征峰信息量丰富，该方法重现性良好，准确可靠，稳定性好，通过所建立的uplc特征图谱可以实现对厚朴花药材进行有效的鉴别，能区分厚朴花药材及其伪品山玉兰，有效把控厚朴花药材的质量。

(2)本发明利用厚朴花药材的uplc特征图谱，通过计算供试品色谱的各特征峰的相对保留时间，能够有效鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰，检测方法简单，能快速、方便的获得检测结果，且结果精准。

附图说明

图1是本发明一种厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法的流程图。

图2是本发明一种用于鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法的流程图。

图3是本发明建立的厚朴花药材对照特征图谱。

图4是厚朴花伪品山玉兰对照特征图谱。

图5是厚朴花药材检测波长的的地骨皮药材吸收光谱。

图6是不同水相的厚朴花特征图谱。

图7是不同色谱柱的厚朴花特征图谱。

图8是不同流速的厚朴花特征图谱。

图9是不同柱温的厚朴花特征图谱。

图10是不同提取溶媒的厚朴花特征图谱。

图11是不同提取时间的厚朴花特征图谱。

图12是本发明实施例1中15批厚朴花药材特征图谱叠加图。

图13是本发明实施例2中3批厚朴花伪品山玉兰特征图谱叠加图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步地详细描述。

如图1所示，本发明采用uplc-uv技术，提供了一种厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法，包括：

s101、取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成含厚朴酚、和厚朴酚的混合溶液，制得参照物溶液；

其中，厚朴酚与和厚朴酚的含量比为(2-4):2。

优选的，所述参照物溶液由下述方法制得：

取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含厚朴酚60μg、和厚朴酚40μg的混合溶液，制得参照物溶液。

s102、取厚朴花药材，利用65％-75％甲醇进行提取，制得供试品溶液；

优选的，所述供试品溶液由下述方法制得：

更佳的，所述供试品溶液由下述方法制得：

s103、分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，建立厚朴花药材的uplc特征图谱。

本发明以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b，流动相b优选为0.1％甲酸溶液，该种流动相组合一方面能够保护色谱柱，同时又能最大限度地将厚朴花中的化学成分实现良好的色谱分离。

优选的，所述厚朴花药材的uplc特征图谱由下述方法建立：

分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.8μm；以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b进行按表1进行梯度洗脱，流速为每分钟0.35ml，柱温为30℃，检测波长为300nm。理论板数按和厚朴酚峰计算应不低于10000。

表1梯度洗脱表

本发明以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b，并采用特定的梯度洗脱程序，能够使厚朴花中的特征性成分实现良好的色谱分离，能高效地进行厚朴花的鉴别。而且，300nm波长下各色谱峰的峰面积较大，

本发明获得的厚朴花药材的uplc特征图谱包括5个特征峰，如图3所示，分别为峰1、峰2、峰3、峰4和峰5，其中峰4、5分别与参照物溶液中的和厚朴酚、厚朴酚保留时间相同，以与和厚朴酚参照物相对应的峰4为s峰，峰1、峰2、峰3与s峰的相对保留时间应该在规定值的±10％之内，所述规定值包括：峰1为0.37、峰2为0.52、峰3为0.64，以此鉴别为厚朴花药材。

如图4所示，厚朴花伪品山玉兰色谱图中，与和厚朴酚峰、厚朴酚峰相应保留时间位置无色谱峰。由此可区分厚朴花药材与其伪品山玉兰。

因此，本发明厚朴花药材的uplc特征图谱可充分展示厚朴花药材的化学成分的特征，特征峰信息量丰富，该方法重现性良好，准确可靠，稳定性好，通过所建立的uplc特征图谱可以实现对厚朴花药材进行有效的鉴别，能区分厚朴花药材及其伪品山玉兰，有效把控厚朴花药材的质量。

相应的，如图2所示，本发明还提供了一种用于鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法，包括：

s201、取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成含厚朴酚、和厚朴酚的混合溶液，制得参照物溶液；

s202、取厚朴花药材，利用65％-75％甲醇进行提取，制得供试品溶液；

s203、分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，建立厚朴花药材的uplc特征图谱；

s204、取预设量的供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，甲酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，得到供试品色谱；

s205、对供试品色谱和厚朴花药材的uplc特征图谱进行比较，通过供试品色谱的各特征峰的相对保留时间，来判定厚朴花药材及其伪品山玉兰。

所述厚朴花药材的uplc特征图谱包括5个特征峰，分别为峰1、峰2、峰3、峰4和峰5，其中，与和厚朴酚参照物相对应的峰4为s峰；

若峰4和峰5的相应保留时间位置无色谱峰，则判定为伪品山玉兰。

本发明利用厚朴花药材的uplc特征图谱，通过计算供试品色谱的各特征峰的相对保留时间，能够有效鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰，检测方法简单，能快速、方便的获得检测结果，且结果精准。

需要说明的是，用于鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰的检测方法中，其厚朴花药材的uplc特征图谱的建立方法同上所述，在此不再赘述。

进一步，本发明结合下述实验数据论证所述厚朴花药材的uplc特征图谱的构建方法，具体如下：

1、仪器与试药

1.1、仪器：超高效液相色谱仪

2、色谱条件的考察

2.1波长的选择

本发明实验选择294nm、300nm、310nm作为厚朴花(厚朴)标准汤剂样品的检测波长，并进行全波扫描，记录样品在190～400nm范围内的吸收光谱，结果见下图5。

图5的结果表明，300nm波长下各色谱峰的峰面积较大，因此，选择300nm作为建立厚朴花(厚朴)标准汤剂特征图谱的检测波长。

2.2水相的考察

本次实验选取0.1％甲酸溶液、0.1％磷酸溶液、0.1％乙酸溶液三种流动相进行比较，筛选最佳的水相。

图6中，曲线1为0.1％甲酸溶液对应的色谱图，曲线2为0.1％磷酸溶液对应的色谱图，曲线3为0.1％乙酸溶液对应的色谱图。

图6的结果显示，通过对比3种不同流动相的色谱图，选用0.1％乙酸溶液作为水相时，峰的信息不完整；选用0.1％磷酸溶液作为水相时，部分峰的分离度较差，当选用0.1％甲酸溶液时，峰的信息完整，峰的分离度较优，故选取0.1％甲酸溶液作为建立厚朴花特征图谱的水相。

2.3色谱柱的考察

本次实验选取了watershsst3(2.1mm×100mm，1.8μm)、watersbehc18(2.1m×100mm，1.7μm)、agilentsbc18(2.1m×100mm，1.8μm)3种色谱柱进行比较，筛选最佳的色谱柱。

图7中，曲线1为watershsst3对应的色谱图，曲线2为watersbehc18对应的色谱图，曲线3为agilentsbc18对应的色谱图。

图7的结果显示，通过对比3种不同色谱柱的色谱图，当选用watershsst3色谱柱时，峰信息较完整，watershsst3色谱柱的峰分离度更佳，因此选取watershsst3色谱柱(2.1mm×100mm，1.8μm)作为建立厚朴花特征图谱的色谱柱。

2.4流速的考察

本次实验选取每分钟0.25ml、每分钟0.30ml、每分钟0.35ml三种流速进行比较，筛选最佳的流速。

图8中，曲线1为流速每分钟0.30ml对应的色谱图，曲线2为流速每分钟0.25ml对应的色谱图，曲线3为流速每分钟0.35ml对应的色谱图。

图8的结果显示，通过对比3种不同流速的色谱图，选取每分钟0.30ml、每分钟0.25ml作为流速时，峰的信息较完整；当流速为每分钟0.35ml时，峰的信息完整，分离效果优于每分钟0.30ml、每分钟0.25ml，故选取每分钟0.35ml作为建立厚朴花特征图谱的流速。

2.5柱温的考察

本次实验选取25℃、30℃、35℃三种柱温进行比较，筛选最佳的柱温。

图9中，曲线1为柱温30℃对应的色谱图，曲线2为柱温35℃对应的色谱图，曲线3为柱温25℃对应的色谱图。

图9的结果表明：通过对比3种不同柱温的色谱图，选取25℃、30℃、35℃作为柱温时，当柱温为30℃时，峰的信息完整，分离效果优于25℃、35℃，故选取30℃柱温作为建立厚朴花特征图谱的柱温。

2.6色谱条件的确定

色谱条件：色谱柱为watershsst3(2.1mm×100mm，1.8μm)；进样量为1μl；流速为每分钟0.35ml，柱温为30℃；以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速为0.35ml/min，检测波长：300nm，柱温：30℃。

表2-1梯度洗脱表

3、参照物溶液的制备

参照2015年《中国药典》项下对照品溶液的制备方法，取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含和厚朴酚40μg、厚朴酚60μg的混合溶液，即得对照品混合对照品参照物溶液。

4、供试品溶液前处理方法考察

对厚朴花药材的提取溶剂、提取时间、提取方式进行考察，确定厚朴花药材特征图谱的样品前处理方法。

4.1提取溶剂考察

本次实验考察了不同提取溶剂对厚朴花药材特征图谱的影响，选取70％甲醇、甲醇、70％乙醇、乙醇作为提取溶剂，通过观察暂定的4个特征峰的峰型和分离效果，并计算4个特征峰的“总峰面积/称样量”来比较不同提取溶剂对厚朴花特征图谱的影响，选择最佳提取溶剂。

取厚朴花药材粗粉(g1806107)约1.0g，精密称定，平行4组，每组2份，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇、70％乙醇、70％甲醇、乙醇10ml，称定重量，超声处理(功率300w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，再用相应的溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。精密吸取1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。实验结果见下表4-1和图10。

表4-1厚朴花药材特征图谱不同提取溶媒比较

图10中，曲线1为提取溶剂为70％甲醇对应的色谱图，曲线2为提取溶剂为甲醇对应的色谱图，曲线3为提取溶剂为70％乙醇对应的色谱图，曲线4为提取溶剂为乙醇对应的色谱图。

表4-1和图10的结果显示，通过对比4种提取溶剂的特征图谱可发现，乙醇溶剂的特征峰对称性较差，响应较低。当提取溶剂为70％甲醇、70％乙醇时，其“总特征峰面积/取样量”无差异，均高于甲醇溶剂，故选取70％甲醇作为厚朴花(厚朴)药材特征图谱的提取溶媒。

4.2提取方式考察

本次实验分别考察了不同提取方式对厚朴花药材特征图谱的影响，选取超声、回流作为提取方式，通过暂时确定的5个色谱峰“总峰面积/称样量”及色谱图比较不同提取方式特征图谱结果。

取厚朴花药材粗粉(g1806107)约1.0g，精密称定，平行2组，每组2份，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，分别超声处理(功率250w，频率40khz)30分钟、加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。精密吸取1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。实验结果见下表4-2。

表4-2厚朴花药材特征图谱不同提取方式比较

表4-2的结果显示，通过对比超声提取和回流提取发现，不同提取方式对厚朴花药材特征图谱影响不大，为了与标准汤剂一致，选择超声处理作为提取方式。

4.3提取时间考察

本次实验分别考察了不同提取时间对厚朴花药材特征图谱的影响，选取考察20分钟、30分钟和40分钟三个不同提取时间，通过暂时确定的5个色谱峰“总峰面积/称样量”及色谱图比较不同提取时间特征图谱结果。

取厚朴花药材粗粉(g1806107)约1.0g，精密称定，平行3组，每组2份，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，分别超声处理(功率300w，频率40khz)20分钟、30分钟、40分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。精密吸取1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

表4-3厚朴花药材特征图谱不同提取时间比较

图11中，曲线1为超声20min对应的色谱图，曲线2为超声30min对应的色谱图，曲线3为超声40min对应的色谱图。

表4-3和图11的结果显示：通过对比不同提取时间对厚朴花药材特征图谱影响发现，不同的提取时间对厚朴花药材特征图谱影响并不大，为保证提取完全，选择超声处理30分钟。

4.4供试品溶液制备方法的确定

根据上述实验结果，厚朴花药材特征图谱样品前处理方法可确定为：

取厚朴花药材粗粉约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，超声处理(功率300w，频率40khz)30分钟，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

5、测定方法

分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

下面以实施例进一步阐述本发明

实施例1：

(1)样品信息表

表515批厚朴花药材信息表

15批厚朴花药材均符合中国药典2015年版厚朴花药材项下规定。

(2)特征图谱方法：

色谱条件色谱柱：watershsst3色谱柱(2.1*100mm，1.8μm)，以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b，按表1中的规定进行梯度洗脱，流速为0.35ml/min，检测波长：300nm，柱温：30℃。

参照物溶液的制备取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含和厚朴酚40μg、厚朴酚60μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备取厚朴花(厚朴)药材粗粉约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，超声处理(功率300w，频率40khz)30分钟，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1.0μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

(3)结果

如图12所示，图12是15批厚朴花药材特征图谱叠加图，以4号峰和厚朴酚为参照，计算其余各特征峰的相对保留时间及相对峰面积，实验结果见下表6、表7所示。

表615批厚朴花药材特征图谱各特征峰的相对保留时间

表715批厚朴花药材特征图谱各特征峰的相对峰面积

由表6和表7可知，15批厚朴花药材特征图谱均呈现出5个特征峰，其中峰4、5分别与参照物溶液中的和厚朴酚、厚朴酚保留时间相同，以峰4和厚朴酚峰为s峰，5个特征峰相对保留时间rsd值在0.02％～0.29％；相对峰面积rsd值在47.07％～117.02％，结果表明不同产地厚朴花药材的特征峰对应成分含量存在一定差异。峰1相对峰面积范围为0.149～0.821，峰2相对峰面积范围为0.035～3.937，峰3相对峰面积范围为0.074～1.665，峰5相对峰面积范围为0.275～1.433。

表815批厚朴花药材相似度

对15批厚朴花药材特征图谱进行相似度评价，各产地厚朴花药材特征图谱相似度较好，表明该药材物质成分组成无明显的产地特异性。有个别批次药材相似度值小于0.9，存在一定差异性。推测原因，可能是由于采收时间或产地加工方式差异而影响各成分组成比例，从而导致部分批次与对照特征图谱相似性较差。

实施例2

(1)样品信息表

表915批厚朴花药材信息表

(2)特征图谱方法：

参照物溶液的制备取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含和厚朴酚40μg、厚朴酚60μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备取厚朴花伪品山玉兰粗粉约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10ml，称定重量，超声处理(功率300w，频率40khz)30分钟，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1.0μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

(3)结果

如图13所示，图13显示了3批厚朴花伪品山玉兰特征图谱叠加图。在厚朴花伪品山玉兰色谱图中，与和厚朴酚峰、厚朴酚峰相应保留时间位置无色谱峰。

因此，根据上述实验结果可知，本发明确定厚朴花药材特征图谱，各产地厚朴花药材特征图谱相似度较好，表明该药材物质成分组成无明显的产地特异性；同时本发明方法能有效鉴别厚朴花真伪，通过峰4和峰5的相应保留时间位置有无色谱峰，既可以鉴别厚朴花药材及其伪品山玉兰，完善厚朴花药材质量评价体系。