一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法
本发明属于植物,具体涉及一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法。
背景技术:
1、多肉植物种类繁多,形状各异,颜色也多,是室内植物种植的较佳选择,需求量大,所以建立一套快速繁殖方法尤为必要。组培再生体系建立是短时间大量培养植物的一个关键措施,该方法直接利用植物组织进行繁殖,繁殖系数高,繁殖速度快,有利于植物种质资源的繁殖与保存,可满足科研与市场需求。
2、现有技术中,景天多肉植物的再生体系建立方法包括外植体的选择、消毒,诱导培养、增殖培养和生根培养等步骤,培养基成分和培养条件成为影响景天多肉植物再生体系成功率的关键,细胞分裂素(6-ba,6-苄氨基嘌呤)与iba(吲哚丁酸)在诱导培养阶段进行刺激,以促进愈伤组织的形成和不定芽的分化,但是如果在生根培养阶段不添加营养剂,则会导致其根系长势差,因此,需要提供一种能促进景天多肉植物根系长势的再生体系建立方法。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题,本发明提供了一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法。
2、本发明的目的是提供一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,包括以下步骤:
3、步骤1,外植体的获得;
4、步骤2,愈伤组织及不定芽分化;
5、步骤3,不定芽增殖;
6、步骤4,生根培养
7、将增殖培养结束的植物体转移至生根培养基中培养,生根后,获得可移栽的无菌苗;
8、生根培养基配方如下:1l ms培养基、0.4-2mg生根因子、6-7g琼脂、25-30g蔗糖,ph5.8-6.0;
9、所述生根因子为iba或景天花粉。
10、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,包括以下步骤:
11、步骤1,外植体的获得:选取植株健壮、生长整齐的多肉植物的外植体,消毒后备用;
12、步骤2,愈伤组织及不定芽分化
13、将外植体接种在装有诱导培养基的器皿中,诱导培养至产生愈伤组织,在继代培养基中继代培养,直至由愈伤组织再分化为不定芽;
14、步骤3,不定芽增殖
15、当不定芽长至1-2cm时,在无菌环境下切下,然后转接至所述增殖培养基中;
16、步骤4,生根培养
17、将增殖培养结束的植物体转移至生根培养基中培养,生根后,获得可移栽的无菌苗,·也就是成功建立了多肉植物再生体系;
18、生根培养基配方如下:1l ms培养基、0.4-2mg生根因子、6-7g琼脂、25-30g蔗糖,ph5.8-6.0。
19、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,所述景天为大花红景天。
20、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,当生根因子为iba时,其在ms培养基中的添加量为0.4-0.6mg·l-1;
21、当生根因子为景天花粉时,其在ms培养基中的添加量为0.6-2.1mg·l-1,景天花粉使用前置于干燥容器中,然后于100℃中放置10-20min,进行灭活。
22、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,步骤1中,所述外植体采用多肉植物的叶片。
23、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,外植体取从茎尖往下数第3至6片完全叶。
24、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,步骤1中,外植体的消毒方法是:放在通风干燥处晾晒1-2d,用洗涤剂和软毛刷洗去植株表面附着的尘土和杂质后,用流水冲洗20-30min,无菌环境下,用体积分数75%乙醇浸泡10-30s,接着用2g·l-1升汞溶液浸泡4-5min,轻轻摇晃,使其消毒充分,最后用无菌水冲洗3-5次,用无菌干燥的滤纸吸干外植体表面水分,得到无菌外植体。
25、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,步骤1中,无菌条件下,将叶片切割为(0.3-0.4)×(0.3-0.4)cm2大小的组织块,将组织块保持形态学上端朝上,形态学下端朝下接种培养基中。
26、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,所述诱导培养基配方如下:1lms培养基、0.5mg 6-ba、0.6mg naa、7g琼脂、30g蔗糖,ph 5.8-6.0;
27、所述继代培养基配方如下:1l ms培养基、1.0mg 6-ba、0.4mg naa、7g琼脂、30g蔗糖,ph 5.8-6.0;
28、所述增殖培养基的成分与所述继代培养基的成分相同。
29、优选的,上述多肉植物组培再生体系的繁殖方法,诱导培养、继代培养、增殖培养与生根培养的条件均为:温度为20-24℃,环境湿度为70-80%,光周期12h光照/12h黑暗,光照强度50μmol·m-2·s-1。
30、与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
31、本发明研究了不同成分培养基对于多肉植物再生体系培养效果的影响,结果显示,在诱导培养愈伤组织以及不定芽分化阶段,采用ms+6-ba+naa的组合可以提高愈伤组织分化率,以及不定芽的分化,并且愈伤组织诱导率为46.43%,且愈伤组织颜色翠绿,生长情况较好;不定芽分化的最适培养基为ms+1.0mg·l-1 6-ba+0.4mg·l-1naa;在生根培养阶段,采用ms+iba(吲哚-3-丁酸)/大花红景天花粉,可促进根系的长势,具体表现为提高生根率、根数和根长。景天科多肉植物,如静夜、乌木、罗密欧、薄叶蓝鸟、吉娃莲、雪莲等均适用于本发明的方法来构建再生体系。
32、本发明本着以物养物的原则,用类似生物向形态的植物花粉促生根,对于对肉类植物而言,景天花粉的促生根效果良好,而景天花粉的促生根效果不明显。
技术特征:
1.一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,具体如下:
3.根据权利要求2所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,所述景天为大花红景天。
4.根据权利要求3所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,当生根因子为iba时,其在ms培养基中的添加量为0.4-0.6mg·l-1;
5.根据权利要求2所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,步骤1中,所述外植体采用多肉植物的叶片。
6.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,外植体取从茎尖往下数第3至6片完全叶。
7.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,步骤1中,外植体的消毒方法是:放在通风干燥处晾晒1-2d,用洗涤剂和软毛刷洗去植株表面附着的尘土和杂质后,用流水冲洗20-30min,无菌环境下,用体积分数75%乙醇浸泡10-30s,接着用2g·l-1升汞溶液浸泡4-5min,最后用无菌水冲洗3-5次,用无菌干燥的滤纸吸干外植体表面水分,得到无菌外植体。
8.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,步骤1中,无菌条件下,将叶片切割为(0.3-0.4)×(0.3-0.4)cm2大小的组织块,将组织块保持形态学上端朝上,形态学下端朝下接种培养基中。
9.根据权利要求2所述的多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在于,所述诱导培养基配方如下:1l ms培养基、0.5mg 6-ba、0.6mg naa、7g琼脂、30g蔗糖,ph 5.8-6.0;
10.根据权利要求9所述的多肉植物组培再生体系的繁殖方法,其特征在
技术总结
本发明属于植物技术领域,具体涉及一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法,包括外植体的获得,愈伤组织及不定芽分化,不定芽增殖,生根培养,其中,生根培养所用的培养基是MS+0.4‑2.1mg·L<supgt;‑1</supgt;生根因子、6‑7g·L<supgt;‑1</supgt;琼脂、25‑30g·L<supgt;‑1</supgt;蔗糖,pH 5.8‑6.0,所述生根因子为IBA或景天花粉。另外,本发明所用诱导培养基成分如下:MS+0.5mg·L<supgt;‑1</supgt; 6‑BA、0.6mg·L<supgt;‑1</supgt;NAA、7g·L<supgt;‑1</supgt;琼脂、30g·L<supgt;‑1</supgt;蔗糖,pH 5.8‑6.0;所用继代培养基成分如下:MS+1.0mg·L<supgt;‑1</supgt; 6‑BA、0.4mg·L<supgt;‑1</supgt;NAA、7g·L<supgt;‑1</supgt;琼脂、30g·L<supgt;‑1</supgt;蔗糖,pH 5.8‑6.0。本发明的方法可以提高愈伤组织分化率以及不定芽的分化,景天花粉可促进多肉植物根系的长势。
技术研发人员:李佩玲,朱振飞,熊婷婷,缪百灵,张弛,王志勇,岳建华
受保护的技术使用者:信阳农林学院
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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