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一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方法.pdf

来源:花匠小妙招 时间:2024-12-13 20:30

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610254751.5 (22)申请日 2016.04.22 (71)申请人 中国热带农业科学院热带作物品种 资源研究所 地址 571737 海南省儋州市宝岛新村 (72)发明人 李志英 徐立 符运柳 李克烈 黄碧兰 (74)专利代理机构 海口翔翔专利事务有限公司 46001 代理人 莫臻 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方 法 (57)摘要 本发明属植物栽培技术领域, 涉及一种通过 悬浮培养。

2、快速繁育铁兰种苗的方法, 包括愈伤组 织诱导及增殖、 胚性愈伤组织液体悬浮、 胚状体 萌发不定芽、 不定芽诱导生根、 移栽和管理过程。 本发明工艺流程简单, 以铁兰叶片为材料进行组 织培养, 可以在短时间内获得大量可用于生产栽 培的种苗, 前期培养周期短, 且所得种苗的生理 年龄一致, 生长整齐, 占地面积小, 成本低, 适合 工厂化育苗和规模化栽培, 为铁兰人工种植产业 的发展提供技术支持。 权利要求书2页 说明书7页 CN 105900837 A 2016.08.31 CN 105900837 A 1.一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方法, 其特征在于, 包括愈伤组织诱导及增 殖、 胚性。

3、愈伤组织液体悬浮、 胚状体萌发不定芽、 不定芽诱导生根、 移栽和管理过程, 其步骤 如下: 1)、 愈伤组织诱导及增殖 取铁兰无菌苗叶片, 切段后接种于愈伤组织诱导培养基上, 培养4050d, 叶片基部分 化出易碎的愈伤组织; 将愈伤组织与叶片分离后, 接种到新鲜的愈伤组织诱导培养基上继 续培养, 愈伤组织增殖分化, 形成淡黄色的大量疏松易碎的胚性愈伤组织; 培养条件: 培养 温度2529, 光照培养, 光照时间1012h/d, 光照强度2030 molm-2s-1; 所述愈伤 组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加6-BA 2.03.0mg/L、 NAA 0.02mg/L、 蔗糖。

4、30g/L、 卡拉胶6.5g/L, pH为5.8; 2)、 胚性愈伤组织液体悬浮 将疏松易碎的胚性愈伤组织块轻轻压碎, 接种到继代培养基 中进行黑暗悬浮培养, 温 度25, 转数90rpm, 每7d继代1次, 3次后, 形成胚状体; 更换为继代培养基, 培养条件不 变, 延长继代周期至每14d继代1次; 所述继代培养基 是以MS培养基为基本培养基, 并添加 2,4-D 0.1mg/L; 所述继代培养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加2,4-D 0.1mg/L、 KT 0.05mg/L; 3)、 胚状体萌发不定芽 将经过继代培养得到的胚状体, 接种到不定芽诱导培养基上培养, 2530下暗培养。

5、, 胚状体开始逐渐变绿, 发生毛状体, 培养90d后, 萌发形成无根不定芽丛; 所述不定芽诱导培 养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加6-BA 1.0mg/L、 NAA 0.01mg/L、 蔗糖30g/L、 卡拉胶 6.5g/L, pH 5.8; 4)、 不定芽诱导生根 待不定芽伸长到23cm时, 将不定芽丛进行单株分离, 接种到生根培养基上, 2530 下暗培养, 培养40d后, 在不定芽的基部形成棕色的根, 根上有根毛, 部分分叉; 所述生根培 养基是以1/2MS培养基为基本培养基, 并添加NAA 1.0mg/L、 IBA 0.5mg/L、 蔗糖20g/L、 卡拉 胶6.5g/L, p。

6、H 5.8; 5)、 移栽和管理过程 A.出瓶方法: 将生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗, 一周后将苗移出培养瓶外, 洗净小 苗根部的培养基, 进行移栽; B.基质制作: 分别取草炭土、 椰糠和河沙, 按体积比计: 草炭土: 椰糠: 河沙35: 2 4: 1的比例配成基质, 提前浇透水, 并覆盖薄膜保湿; C.移栽方法: 将已经湿透的基质进行浅翻, 然后耙平, 并用竹棒打孔, 孔深0.5cm, 将小 苗根部轻轻放到孔中, 并用周围的基质填充, 稍压实, 并用喷雾的方法淋定根水; D.管理方法: 移栽后710d, 覆盖薄膜保湿, 基质湿度保持8090, 然后逐渐降低 到70; 空气湿度保持90以上。

7、, 遮阴度6070, 然后逐渐减少到30; 1520d后幼苗 生新根, 30d后可见新叶抽出, 以后平均每2025d抽生1片新叶, 2年时株高20cm, 叶片数40 50片时, 自然开花; E.施肥方法: 1520d后, 晴天上午采用0.20.3尿素溶液喷雾后, 并用清水淋洗, 每7d施肥1次, 半年后改为花多多9号, 按说明施用; 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 105900837 A 2 F.病虫害防治方法: 利用500倍多菌灵、 500倍百菌清、 800倍甲霜灵复合防病, 利用菊酯 类杀虫剂除虫。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 105900837 A 3 一种通过悬。

8、浮培养快速繁育铁兰种苗的方法 技术领域 0001 本发明属植物栽培技术领域, 涉及一种铁兰种苗的繁殖方法, 具体是一种利用铁 兰叶片诱导形成的愈伤组织, 诱导胚性愈伤组织及胚状体, 通过悬浮培养胚状体增殖, 再经 胚状体萌发、 不定芽生长、 不定芽生根诱导、 无菌苗移栽等过程, 获得大量种苗的繁育方法。 背景技术 0002 铁兰(Tillandsia cyanea), 又称扇凤梨, 属于凤梨科(Bromeliaceae)铁兰属, 是 多年生单子叶植物, 原产美洲热带及亚洲热带地区, 约有500多个原生种, 园艺栽培观赏的 约60种。 铁兰茎短, 植株相对来说比较矮小, 总苞片可观赏数月, 属迷。

9、你型观赏性植物, 具有 很强的净化空气的能力, 可用于美化环境, 适于盆栽装饰室内, 摆放于阳台、 窗台、 书桌等, 也可悬挂在客厅、 茶室、 还可做插花陪衬材料。 0003 铁兰通常用分株法繁殖, 即在花后萌发的吸芽发育到一定大小时, 从母株分离栽 种, 获得新的植株。 这种方法繁育种苗非常缓慢, 繁殖系数很低, 不能作为铁兰种苗批量繁 育的方法。 0004 利用组织培养技术繁育铁兰种苗是目前较为常用的方法, 均通过不定芽增殖途径 获得批量种苗。 该方法周期相对较长, 从取材到批量出苗需要2-3年时间, 繁育过程中需要 投入相对较多的人力和物力进行多次批量继代, 才能获得批量种苗, 效率低,。

10、 成本高。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方法, 以铁兰叶片为 材料进行组织培养, 可以在短时间内获得大量可用于生产栽培的种苗, 所得种苗的生理年 龄一致, 生长整齐, 前期培养周期短(每14d一代), 占地面积小, 成本低, 适合工厂化育苗和 规模化栽培。 0006 本发明所采用的技术方案: 0007 一种通过悬浮培养快速繁育铁兰种苗的方法, 包括愈伤组织诱导及增殖、 胚性愈 伤组织液体悬浮、 胚状体萌发不定芽、 不定芽诱导生根、 移栽和管理过程, 其步骤如下: 0008 1、 愈伤组织诱导及增殖 0009 取铁兰无菌苗叶片, 切段后接种于愈伤组织诱。

11、导培养基上, 培养4050d, 叶片基 部分化出易碎的愈伤组织; 将愈伤组织与叶片分离后, 接种到新鲜的愈伤组织诱导培养基 上继续培养, 愈伤组织增殖分化, 形成淡黄色的大量疏松易碎的胚性愈伤组织。 培养条件: 培养温度2529, 光照培养。 光照时间1012h/d, 光照强度2030 molm-2s-1。 所述 愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加6-BA 2 .03 .0mg/L、 NAA 0.02mg/L、 蔗糖30g/L、 卡拉胶6.5g/L, pH为5.8。 0010 2、 胚性愈伤组织液体悬浮 0011 将疏松易碎的胚性愈伤组织块轻轻压碎, 接种到继代培养基 中进。

12、行黑暗悬浮培 养, 温度25, 转数90rpm, 每7d继代1次, 3次后, 形成胚状体; 更换为继代培养基, 培养条 说 明 书 1/7 页 4 CN 105900837 A 4 件不变, 延长继代周期至每14d继代1次。 所述继代培养基 是以MS培养基为基本培养基, 并 添加2,4-D 0.1mg/L; 所述继代培养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加2,4-D 0.1mg/ L、 KT 0.05mg/L。 0012 3、 胚状体萌发不定芽 0013 将经过继代培养得到的胚状体, 接种到不定芽诱导培养基上培养, 2530下暗 培养, 胚状体开始逐渐变绿, 发生毛状体, 培养90d后, 萌。

13、发形成无根不定芽丛。 所述不定芽 诱导培养基是以MS培养基为基本培养基, 并添加6-BA 1.0mg/L、 NAA 0.01mg/L、 蔗糖30g/L、 卡拉胶6.5g/L, pH 5.8。 0014 4、 不定芽诱导生根 0015 待不定芽伸长到23cm时, 将不定芽丛进行单株分离, 接种到生根培养基上, 25 30下暗培养, 培养40d后, 在不定芽的基部形成棕色的根, 根上有根毛, 部分分叉。 所述生 根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基, 并添加NAA 1.0mg/L、 IBA 0.5mg/L、 蔗糖20g/L、 卡拉胶6.5g/L, pH 5.8。 0016 5、 移栽和管理过程。

14、 0017 A.出瓶方法: 将生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗, 一周后将苗移出培养瓶外, 洗 净小苗根部的培养基, 进行移栽; 0018 B.基质制作: 分别取草炭土、 椰糠和河沙, 按体积比计: 草炭土: 椰糠: 河沙35: 24: 1的比例配成基质, 提前浇透水, 并覆盖薄膜保湿; 0019 C.移栽方法: 将已经湿透的基质进行浅翻, 然后耙平, 并用竹棒打孔, 孔深0.5cm, 将小苗根部轻轻放到孔中, 并用周围的基质填充, 稍压实, 并用喷雾的方法淋定根水; 0020 D.管理方法: 移栽后710d, 覆盖薄膜保湿, 基质湿度保持8090, 然后逐渐 降低到70; 空气湿度保持90以上。

15、, 遮阴度6070, 然后逐渐减少到30; 1520d后 幼苗生新根, 30d后可见新叶抽出, 以后平均每2025d抽生1片新叶, 2年时株高20cm, 叶片 数4050片时, 自然开花; 0021 E.施肥方法: 1520d后, 晴天上午采用0.20.3尿素溶液喷雾后, 并用清水 淋洗, 每7d施肥1次, 半年后改为花多多9号, 按说明施用; 0022 F.病虫害防治方法: 利用500倍多菌灵、 500倍百菌清、 800倍甲霜灵复合防病, 利用 菊酯类杀虫剂除虫。 0023 本发明工艺流程简单, 以铁兰叶片为材料进行组织培养, 可以在短时间内获得大 量可用于生产栽培的种苗, 前期培养周期短,。

16、 且所得种苗的生理年龄一致, 生长整齐, 占地 面积小, 成本低, 适合工厂化育苗和规模化栽培, 为铁兰人工种植产业的发展提供技术支 持。 具体实施方式 0024 下面结合实施例, 对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。 以下实施例用于 说明本发明, 但不用来限制本发明的范围。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常 按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。 0025 一、 铁兰种苗繁殖 0026 实施例一 说 明 书 2/7 页 5 CN 105900837 A 5 0027 1、 愈伤组织诱导及增殖 0028 取铁兰无菌苗叶片, 切成0.5-1cm的小段50段, 接种于愈伤组织诱导。

17、培养基(MS+6- BA 2.0mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8), 培养30d后, 接种外植体基 部出现小突起, 培养4050d后, 逐渐形成易碎的愈伤组织; 将愈伤组织与叶片分离后, 接种 到新鲜的愈伤组织诱导培养基上继续培养, 每40d继代一次, 愈伤组织增殖分化, 形成淡黄 色的大量疏松易碎的胚性愈伤组织。 培养条件: 培养温度25, 光照培养。 光照时间10h/d, 光照强度23 molm-2s-1。 0029 2、 胚性愈伤组织液体悬浮 0030 将疏松易碎的胚性愈伤组织块轻轻压碎为约2mm2mm的小块40块, 接种到继代培 养。

18、基 (MS+2,4-D 0.1mg/L, pH 5.8)中进行黑暗悬浮培养, 温度25, 转数90rpm, 每7d继代1 次, 3次后, 形成胚状体; 更换为继代培养基(MS+2,4-D 0.1mg/L+KT 0.05mg/L, pH 5.8)中 继续培养, 培养条件不变, 延长继代周期至每14d继代1次。 0031 3、 胚状体萌发不定芽 0032 将经过继代增殖培养得到的胚状体, 接种到不定芽诱导培养基(MS+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.01mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上培养, 25下暗培养, 胚状体开始逐 渐变绿, 发生毛状体, 培养90d后。

19、, 萌发形成无根不定芽丛。 0033 4、 不定芽诱导生根 0034 待不定芽伸长到23cm时, 将不定芽丛进行单株分离, 取300株接种到生根培养基 (1/2MS+NAA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上, 25下暗培养, 培养40d后, 在不定芽的基部形成棕色的根, 根上有根毛, 部分分叉。 0035 5、 移栽和管理过程 0036 A.出瓶方法: 将200株生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗, 一周后将苗移出培养瓶 外, 洗净小苗根部的培养基, 进行移栽; 0037 B.基质制作: 分别取草炭土、 椰糠和河沙, 按体积比计: 草炭。

20、土: 椰糠: 河沙3: 2: 1 的比例配成基质, 提前浇透水, 并覆盖薄膜保湿; 0038 C.移栽方法: 将已经湿透的基质进行浅翻, 约23cm深, 然后耙平, 并用竹棒打孔, 孔深0.5cm, 将小苗根部轻轻放到孔中, 并用周围的基质填充, 稍压实, 并用喷雾的方法淋定 根水; 0039 D.管理方法: 移栽后8d, 覆盖薄膜保湿, 基质湿度保持8090, 然后逐渐降低 到70; 空气湿度保持90以上, 遮阴度6070, 然后逐渐减少到30; 1520d后幼苗 生新根, 30d后可见新叶抽出, 以后平均每2025d抽生1片新叶, 2年时株高20cm, 叶片数40 50片时, 自然开花; 。

21、0040 E.施肥方法: 1520d后幼苗生新根, 晴天上午采用0.20.3尿素溶液喷雾 后, 并用清水淋洗, 每7d施肥1次, 半年后改为花多多9号, 按说明施用; 0041 F.病虫害防治方法: 利用500倍多菌灵、 500倍百菌清、 800倍甲霜灵复合防病, 利用 菊酯类杀虫剂除虫。 0042 实施例二 0043 1、 愈伤组织诱导及增殖 0044 取铁兰无菌苗叶片, 切成0.5-1cm的小段50段, 接种于愈伤组织诱导培养基(MS+6- 说 明 书 3/7 页 6 CN 105900837 A 6 BA 2.5mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, p。

22、H 5.8), 培养30d后, 接种外植体基 部出现小突起, 培养4050d后, 逐渐形成易碎的愈伤组织; 将愈伤组织与叶片分离后, 接种 到新鲜的愈伤组织诱导培养基上继续培养, 每40d继代一次, 愈伤组织增殖分化, 形成淡黄 色的大量疏松易碎的胚性愈伤组织。 培养条件: 培养温度27, 光照培养。 光照时间12h/d, 光照强度27 molm-2s-1。 0045 2、 胚性愈伤组织液体悬浮 0046 将疏松易碎的胚性愈伤组织块轻轻压碎为约2mm2mm的小块40块, 接种到继代培 养基 (MS+2,4-D 0.1mg/L, pH 5.8)中进行黑暗悬浮培养, 温度27, 转数100rpm,。

23、 每7d继代 1次, 3次后, 形成胚状体; 更换为继代培养基(MS+2,4-D 0.1mg/L+KT 0.05mg/L, pH 5.8) 中继续培养, 培养条件不变, 延长继代周期至每14d继代1次。 0047 3、 胚状体萌发不定芽 0048 将经过继代增殖培养得到的胚状体, 接种到不定芽诱导培养基(MS+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.01mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上培养, 28下暗培养, 胚状体开始逐 渐变绿, 发生毛状体, 培养90d后, 萌发形成无根不定芽丛。 0049 4、 不定芽诱导生根 0050 待不定芽伸长到23cm时, 将不定芽。

24、丛进行单株分离, 取300株接种到生根培养基 (1/2MS+NAA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上, 28下暗培养, 培养40d后, 在不定芽的基部形成棕色的根, 根上有根毛, 部分分叉。 0051 5、 移栽和管理过程 0052 A.出瓶方法: 将200株生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗, 一周后将苗移出培养瓶 外, 洗净小苗根部的培养基, 进行移栽; 0053 B.基质制作: 分别取草炭土、 椰糠和河沙, 按体积比计: 草炭土: 椰糠: 河沙4: 3: 1 的比例配成基质, 提前浇透水, 并覆盖薄膜保湿; 0054 C.移栽方法。

25、: 将已经湿透的基质进行浅翻, 约23cm深, 然后耙平, 并用竹棒打孔, 孔深0.5cm, 将小苗根部轻轻放到孔中, 并用周围的基质填充, 稍压实, 并用喷雾的方法淋定 根水; 0055 D.管理方法: 移栽后10d, 覆盖薄膜保湿, 基质湿度保持8090, 然后逐渐降低 到70; 空气湿度保持90以上, 遮阴度6070, 然后逐渐减少到30; 1520d后幼苗 生新根, 30d后可见新叶抽出, 以后平均每2025d抽生1片新叶, 2年时株高20cm, 叶片数40 50片时, 自然开花; 0056 E.施肥方法: 1520d后幼苗生新根, 晴天上午采用0.20.3尿素溶液喷雾 后, 并用清水。

26、淋洗, 每7d施肥1次, 半年后改为花多多9号, 按说明施用; 0057 F.病虫害防治方法: 利用500倍多菌灵、 500倍百菌清、 800倍甲霜灵复合防病, 利用 菊酯类杀虫剂除虫。 0058 实施例三 0059 1、 愈伤组织诱导及增殖 0060 取铁兰无菌苗叶片, 切成0.5-1cm的小段50段, 接种于愈伤组织诱导培养基(MS+6- BA 3.0mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8), 培养30d后, 接种外植体基 部出现小突起, 培养4050d后, 逐渐形成易碎的愈伤组织; 将愈伤组织与叶片分离后, 接种 说 明 书 4/7 页 7。

27、 CN 105900837 A 7 到新鲜的愈伤组织诱导培养基上继续培养, 每40d继代一次, 愈伤组织增殖分化, 形成淡黄 色的大量疏松易碎的胚性愈伤组织。 培养条件: 培养温度29, 光照培养。 光照时间10h/d, 光照强度30 molm-2s-1。 0061 2、 胚性愈伤组织液体悬浮 0062 将疏松易碎的胚性愈伤组织块轻轻压碎为约2mm2mm的小块40块, 接种到继代培 养基 (MS+2,4-D 0.1mg/L, pH 5.8)中进行黑暗悬浮培养, 温度25, 转数100rpm, 每7d继代 1次, 3次后, 形成胚状体; 更换为继代培养基(MS+2,4-D 0.1mg/L+KT 。

28、0.05mg/L, pH 5.8) 中继续培养, 培养条件不变, 延长继代周期至每14d继代1次。 0063 3、 胚状体萌发不定芽 0064 将经过继代增殖培养得到的胚状体, 接种到不定芽诱导培养基(MS+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.01mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上培养, 2530下暗培养, 胚状体开 始逐渐变绿, 发生毛状体, 培养90d后, 萌发形成无根不定芽丛。 0065 4、 不定芽诱导生根 0066 待不定芽伸长到23cm时, 将不定芽丛进行单株分离, 取300株接种到生根培养基 (1/2MS+NAA 1.0mg/L+IBA 0.5m。

29、g/L+蔗糖20g/L+卡拉胶6.5g/L, pH 5.8)上, 30下暗培养, 培养40d后, 在不定芽的基部形成棕色的根, 根上有根毛, 部分分叉。 0067 5、 移栽和管理过程 0068 A.出瓶方法: 将200株生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗, 一周后将苗移出培养瓶 外, 洗净小苗根部的培养基, 进行移栽; 0069 B.基质制作: 分别取草炭土、 椰糠和河沙, 按体积比计: 草炭土: 椰糠: 河沙5: 3: 1 的比例配成基质, 提前浇透水, 并覆盖薄膜保湿; 0070 C.移栽方法: 将已经湿透的基质进行浅翻, 约23cm深, 然后耙平, 并用竹棒打孔, 孔深0.5cm, 将小苗。

30、根部轻轻放到孔中, 并用周围的基质填充, 稍压实, 并用喷雾的方法淋定 根水; 0071 D.管理方法: 移栽后7d, 覆盖薄膜保湿, 基质湿度保持8090, 然后逐渐降低 到70; 空气湿度保持90以上, 遮阴度6070, 然后逐渐减少到30; 1520d后幼苗 生新根, 30d后可见新叶抽出, 以后平均每2025d抽生1片新叶, 2年时株高20cm, 叶片数40 50片时, 自然开花; 0072 E.施肥方法: 1520d后幼苗生新根, 晴天上午采用0.20.3尿素溶液喷雾 后, 并用清水淋洗, 每7d施肥1次, 半年后改为花多多9号, 按说明施用; 0073 F.病虫害防治方法: 利用5。

31、00倍多菌灵、 500倍百菌清、 800倍甲霜灵复合防病, 利用 菊酯类杀虫剂除虫。 0074 二、 种苗繁殖效果鉴定 0075 1.铁兰无菌苗叶片愈伤组织诱导效果鉴定 0076 为鉴定铁兰叶片愈伤组织诱导效果, 对上述实施例的愈伤组织诱导情况进行观 察, 统计愈伤组织诱导数, 计算诱导率, 结果见表1。 0077 表1铁兰无菌苗叶片愈伤组织诱导情况 0078 项目接种块数诱导出愈伤组织的块数诱导率 说 明 书 5/7 页 8 CN 105900837 A 8 实施例一504896 实施例二504998 实施例三504692 0079 上述铁兰叶片愈伤组织诱导效果表明, 本发明以改良的MS培养。

32、基进行诱导分化愈 伤组织, 分化率达90以上, 具有较好的分化效果。 0080 2.铁兰胚性愈伤组织增殖效果鉴定 0081 为鉴定铁兰胚性愈伤组织增殖效果, 对上述实施例的铁兰胚性愈伤组织增殖情况 进行观察, 统计增殖数, 计算增值系数, 结果见表2。 0082 表2铁兰胚性愈伤组织悬浮培养增殖情况 0083 0084 上述胚性愈伤组织增殖效果表明, 本发明以改良的MS培养基对愈伤组织进行悬浮 增殖培养, 获得的悬浮培养物均为胚性愈伤组织, 具有较好的增殖效果和较高的增殖系数。 0085 3.铁兰胚状体分化效果鉴定 0086 为鉴定铁兰胚状体分化效果, 对上述实施例的分化情况进行观察, 统计铁。

33、兰胚状 体分化数, 计算分化率, 结果见表3。 0087 表3铁兰胚状体分化情况 0088 项目胚状体数不定芽分化数分化率不定芽质量 实施例一403792.5健壮 实施例二403895健壮 实施例三403690健壮 0089 上述胚状体分化效果表明, 本发明以改良的MS培养基(MS+6-BA+NAA+蔗糖+卡拉 胶)进行诱导分化不定芽, 分化率可达90以上, 且分化的不定芽健壮, 具有较好的分化率。 0090 4.铁兰不定芽生根效果鉴定 0091 为鉴定铁兰不定芽的生根效果, 对上述实施例的不定芽生根情况进行观察, 统计 生根数, 计算生根率, 结果见表4。 0092 表4铁兰不定芽的生根情况。

34、 0093 说 明 书 6/7 页 9 CN 105900837 A 9 0094 上述不定芽生根效果表明, 本发明以改良的1/2MS培养基(1/2MS+NAA+IBA+蔗糖+ 卡拉胶)对铁兰不定芽进行诱导生根, 在短时间内诱导出完整根系, 生根率达90以上。 0095 5.生根苗苗圃移栽效果鉴定 0096 为鉴定生根苗的移栽成活效果, 对上述实施例的生根苗苗圃移栽生长情况进行观 察, 统计成活数, 计算生根率, 结果见表5。 0097 表5铁兰生根苗的移栽生长情况 0098 项目生根苗数成活数成活率 实施例一20019899.0 实施例二20019597.5 实施例三20019698.0 0099 上述移栽效果表明, 本发明以诱导出良好根系的生根苗进行苗圃移栽, 以草炭土、 椰糠和河沙的混合物为栽培基质, 具有较高的生根苗移栽成活率, 达到95以上, 可以满足 批量种苗繁殖, 为铁兰人工种植提供支持。 0100 以上所述仅是本发明的优选实施方式, 应当指出, 对于本技术领域的普通技术人 员来说, 在不脱离本发明技术原理的前提下, 还可以做出若干改进和润饰, 这些改进和润饰 也应视为本发明的保护范围。 说 明 书 7/7 页 10 CN 105900837 A 10 。

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