首页分享剪秋罗组织培养及多倍体诱导的初步研讨.pdf

剪秋罗组织培养及多倍体诱导的初步研讨.pdf

来源：花匠小妙招时间：2024-12-09 18:03

剪秋罗组织培养及多倍体诱导的初步研究陈利萍·，王艳菊 0029) (浙江大学园艺系杭州31 摘要：剪秋罗是一种珍稀的草本宿根观赏花卉。由于种子发芽率很低，我们用GA，处理种子，提高了种子的发芽率．得到最高发芽率为194％。但经处理的发芽率仍达不到商品化生产的要求。为丫实现剪秋罗商品化生产．我们建立了剪秋罗离体快繁体系。以带叶芽茎段为外植体，筛选最佳快繁和生根培养基。芽数虽多的培养基配方：MS+5m酬BA+0．5mg／lNAAt芽最高的培养基配方：MS+0,5mg／lBA+0．05 mg／l NAA。最佳生根培养基：1／2MS+0．5 m鲫NAA，生根率逃91．7％。移栽到温室植株生长良好，有些开花。经显微镜观察种子苗和快繁苗的染色体数相等2n=2x=24。经秋水仙素诱导获得了四倍体植株，移栽温室进行植物学观察。关键词：多倍体诱导，快繁，染色体观察，剪秋罗剪秋罗是石竹科剪秋罗属多年生草本宿根花卉，原产中国，浙江省临安市天目山有分布“]。剪秋罗特殊的生长习性和环境威胁到该物种的生存和生长，属稀有植物。剪秋罗是一种珍贵观赏植物，花桔红色。但一直没有得到中国植物学家和园艺学家的重视，其原因与剪秋罗生存环境的局限性和生产力低有关。自然界中，剪秋罗主要是通过种子和多年生根茎繁殖。根据我们初步试验，剪秋罗种子需要5--6个月才能萌发，无论组织培养还是田问播种其发芽率都很低。而且由于其根茎的生长速度慢，也不可能通过营养繁殖进行商品化生产。因此，为了剪秋罗的保存和持续利用，需要建立一套离体再生体系。 and 剪秋罗的染色体数基数为n=122n=24【2】，然而，日本报道的剪秋罗具有36条染色体，日本科学家认为该三倍体来源于中国【3，“。本文研究的目的是通过组织培养改善种子发芽率，建立一套离体再生体系。并对种子苗和再生苗进行染色体观察，鉴定其倍性。由于剪秋罗植株瘦弱、易倒伏，而多倍体具有茎粗、植株高大、叶片宽的特点，本文利用秋水仙素处理进行多倍体诱导研究，获得了4倍体植株。 1．材料和方法 1，1材料采白天目山(海拔1506米)的野生剪秋罗种子在4℃储存，采收6个月内进行试验。 1．2离体发芽通过组织培养发芽，获取无菌种子苗，从而获得试验所需的无菌外植体。对贮藏1～6个月的种子分别用GA3处理并测定其发芽率。接种前，需将种子用250mg／1GA3处理24小时，然后对种子进行如F消毒：先用流水冲洗30分钟，然后用75％酒精进行表面消毒1分钟，再用1％次氯酸钠溶液加两滴洗洁精消毒15分钟，然后在超净台上用无菌蒸馏水洗涤5次。消毒后的种子接种在1／2MS培养基上放在25C下暗培养，待发芽后进行光照培养，光周期为16小时，光强为84m～s～。本试验共 gmol 设5个处理，每处理三次重复。 1．3怏繁和生根 BA+0．05 将种子苗茎段剪下接种在MS+0．1mg／1 mg／lNAA培养基上，培养五周产生不定芽。选择生长势一致的不定芽，取带一对腋芽的茎段作为外植体，进行快繁培养基的筛选。所用培养基激素为 BA和NAA，BA的浓度梯度为：0．5，1，3，5mgn，NAA为：0．05，0．1，0．5，1mg／l，共组成16个浓度组合。培养四周后，记录芽数、叶片数及芽高。取快繁获得的再生芽，进行生根培养基的筛选。选择生长势较一致的再生芽，去除根部留四片叶 0,01，o．1，0．5，1．0，1．5m鲫。待接种苗培养四周，统计生子进行生根培养。生根培养基激素分别为NAA 根率及根长。 1．4移栽大田选生根较好的苗，先移栽到含有跖石和珍珠岩1：1的基质中练苗4天，然后移栽到温室，进行植