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兰花育种研究现状及进展

来源：花匠小妙招时间：2024-09-03 12:17

1、收稿日期: 2007- 02- 01 基金项目: 海南省自然科学基金项目 ( 30401) 作者简介: 郭丽霞 (1980- ) ,女 ,广西平果人 ,在读硕士 ,主要研究方向为细胞工程与种质创新。 * 为通讯作者。兰花育种研究现状及进展郭丽霞 ,莫饶* (华南热带农业大学农学院 ,海南儋州 571737) 摘要: 兰花是珍贵的观赏花卉 ,开展兰花育种研究具有重要的意义。文章主要就兰花资源概况、资源保护繁育以及杂交育种、组织培养、分子标记和基因工程在育种上的应用作了扼要综述 ,表明 ,种质资源是兰花育种的基础 , 需加以保护 ;种间及属间的远缘杂交仍是兰花育种的主要手段;组织培养、分子

2、标记及基因工程技术可加快育种进程。目前仍需加强野生兰花资源的收集、保存和创新利用工作 ,为兰花育种奠定良好的基础。关键词: 兰花;种质资源 ;育种;保护中图分类号: s682. 31 文献标识码: a 文章编号: 1002 8161(2007) 03- 0303- 07 current status and advances in orchids breeding research guo li-xia, mo rao * (agricultural college, south china university of tropical agriculture, danzhou, ha

3、inan 571737, china) abstract : the orchid is a rare ornamental flower and it is of important significance to study the breeding of or- chid.in the paper,the general situation,protection and breeding of orchid resources were summarized as well as the application of crossbreeding, tissue culture, mole

4、cular marker and genetic engineering on the orchid breeding. it pointed out that the germplasm resources of orchid are the basis of breeding, and need to be protected. the dis- tant hybridization of inter-genera and inter-genera is still the main way of breeding.breeding process could be ac- celerat

5、ed by using tissue culture,molecule-maker and genetic engineering.at present,collection,conversation and innovating utilization of orchid resources should be strengthened to provide the favorable basis for orchid breeding. key words:orchid;germplasm resources;breeding;conservation 广义的兰花是兰科植物 ( orchi

6、daceae )的总称。现代兰花产业迅速发展 ,如何在保护好兰花资源的同时 ,可持续地利用和开发兰花资源已成为研究者关注的重点和热点。传统的育种方法已培育出一大批兰花新品种 ,这仍是今后兰花育种的主要手段。但日益成熟的生物技术 ,尤其是组织培养、分子标记、基因工程的应用给兰花育种提供了全新的思路 , 展现出广阔的前景。 1 兰花种质资源 1. 1 世界兰花资源概况全世界兰科植物约有 700 800属 , 2. 55 3. 0 万个原生种。 2006年在 (英国 )皇家园艺学会网站的国际散氏兰花杂种登记目录 ( sander s list of orchid hybrids

7、)中正式登记的兰科植物人工杂交种已超过 11万种 ,而且每年将以 3000种的数目增加。兰科植物分布相当广泛 ,自北纬 72 延伸到南纬 52 ,其中 80 % 90 % 的种类生长在以赤道为中心的热带、亚热带地区 1。受气候和环境的限制 ,每一类兰花都有一定的分布区域。常见栽培的卡特兰、蝴蝶兰、虎头兰、兜兰、万代兰和石斛兰等属原生种 ,分布在美洲的热带、亚洲的热带及亚热带地区。而非洲的热带地区 ,由于大部分地区气候干燥 ,兰花生长受到限制 ,多生长在海岸地带和有森林的山区。每种兰花的生态环境有较大的差异 ,有些生长在雨量稀少的沙漠地带 ,有些分布在沼泽地带或高山

8、区。栽培的附 303 广西农业科学 2007年第 38卷第 3期生种类热带兰大多产于热带和亚热带林区;兰属类主要产于亚洲的亚热带 ,尤其中国亚热带林区。由于自然和人为因素 ,野生兰受到严重威胁。受高山峡谷等地形地势影响 ,其分布范围极其狭窄 ,故资源蕴藏总量有限 ,极易因乱采滥挖遭到灭绝;因兰花种子发育不全 ,野生兰自我繁殖能力极其有限;随着原始森林急剧消失 ,兰花赖以生存的环境也遭到急剧破坏。因此 ,早在 1975年兰科植物已被列入野生动植物濒危物种国际贸易公约的保护范围 ,占该公约应保护植物的 90 %以上。 1. 2 我国兰花资源概况我国是野生兰花资源大国 ,约

9、有 173属 1200多种兰花原生种。在过去 20多年中 ,中国科学院植物研究所进行了野生花卉资源的调查、引种驯化、栽培繁殖、筛选评估和种质资源保存等研究 ,迁地保护了兰属、兜兰属等资源 ,其他学者和植物保护工作者也对野生兰花资源进行调查研究 1 9。我国已在广西乐业县雅长林场建立全国第一个兰科植物自然保护区。在深圳市梧桐山苗圃总场建立了兰科植物种质资源保护中心 ,收集并保存了我国极度濒危和有重要开发价值的兰科植物原生种 500多种 ,其中兜兰属、兰属、槽舌兰属更是收集了世界所有种 ,同时还成立了中国野生植物保护协会兰科植物保育委员会。中国热带农业科学院品资所

10、10、华南热带农业大学农学院热带兰研究开发中心和海南尖峰岭热林站植物园也各自收集和保存海南兰科植物原生种。 1. 3 兰花种质资源的保护对野生兰花资源的保护 ,目前主要采取两种形式: 原境保护和异境保护。原境保护形式主要为建立自然保护区。异境保护形式主要有建立植物园、种质资源圃 ,离体保存 ,种子保存 ,利用保存等。 1. 3. 1 自然保护区、植物园及种质圃自然保护区是国家或地方政府为保护野生生物物种和自然生态系统而划定的一片区域。据 world resources 2000- 2001 统计 ,全世界已建成 iucn ( international union for c

11、onservation of nature) i v级自然保护区 28 442处。全世界拥有的植物种质资源 8. 7 %是以种质圃的形式保存的。现有的植物、园林、园艺等研究机构及各种兰圃中以异境保护形式保存野生兰花种质资源 ,并有计划地繁殖珍稀、濒危、特有种类 ,以免因过度采挖野生兰而造成物种的灭绝。我国已在广西乐业县雅长建立全国第一个兰科植物自然保护区 ,在深圳市梧桐山苗圃总场建立了兰科植物种质资源保护中心。 1. 3. 2 离体保存利用组织培养技术进行大规模繁殖、离体保存 , 可减轻对野生兰科植物的采集压力。目前 ,大约已有 60余属数百种兰花可以通过组织培养进行繁殖

12、。我国在 20世纪 70年代末开始进行兰属植物组织培养研究 ,取得了阶段性成果 ,但尚未广泛应用于种质保存。国内已报道的利用种子萌发技术获得组培苗的野生兰有 50多个种 ,笔者所在单位也获得 25种海南原生兰组培苗 (未发表 )。常用的保存方法有离体快繁、常温离体保存、低温离体保存及超低温离体保存。 hanako 和 ya- sunori 11研究一套高效快速微繁殖技术 ,对日本著名濒危野生杓兰属的一个种 ( cypripedium macranthos var. rebunense )进行异境保护。史永忠等 12以铁皮石斛试管苗为材料 ,探讨适宜种

13、质资源离体保存的条件 ,结果显示 ,在普通培养室条件 ( 25 2 )下 ,连续保存 12个月 ,存活率达 100 %。 mar- tin和 pradeep 13以印度喀拉拉邦高止山脉西部地方特有的濒危种 ( ipsea malabarica ( reichb. f. ) j. d. hook)兰花为材料 ,建立了一套简单、廉价、无污染、长期、高效的试管苗离体保存方案。低温离体保存研究起步较晚 , homes等首先报道了兰属植物原球茎低温保存的研究情况。近年来 ,这方面的报道迅速增多。除兰属和石斛兰属外 ,还对香荚兰属、苞舌兰属、万代兰属、白及属和杂交种巴索特兰等开展了种

14、质资源的离体保存研究 14。史永忠等14研究在低温条件下铁皮石斛种质资源的保存方法和影响因素。张治国 15、王君晖等16分别进行了铁皮石斛种子、原球茎超低温保存研究。试管苗种质保存的主要缺点是: 有些材料的再生能力弱;继代培养过程中逐渐丧失分化能力 ;发生染色体畸变 ,难以保持原有的遗传基础。 1. 3. 3 兰花种子保存目前 ,美国、英国、澳大利亚、玻利维亚和新西兰已建立兰花种子库 ,我国尚未建立。 nikishina等 17 以 5种热带兰及 1种属间杂交种子为材料 ,在液氮 (- 129 )下保存 ,后解冻播种 ,试验表明部分热带兰成熟种子可经液氮保存 ,为建立兰花种

15、子库提供了依据。台湾糖业研究所建立的种子贮存技术 18 ,使蝴蝶兰种子在 4 下贮存 6个月后仍具有发芽力 ,有效解决了实生苗生产过于集中的问题。 whigham 等 19首次大规模研究兰花自然生境地下是否存在 304 广西农业科学 2007年第 38卷第 3期聚积着有生活力种子的种子库 ,发现部分种种子在土壤中埋藏几年后仍保持生活力 ,且能够萌发 ,暗示着近年来兰花已消亡的地方 ,最终有可能通过种子库中有活力种子的萌发而恢复群体。 1. 3. 4 利用保存在传统育种基础上应用基因工程技术 ,可获得传统方法不能实现的性状改良 ,缩短育种周期 ,所得到的变异品种也比自然界的

16、天然突变品种要丰富得多。繁殖技术的进步 ,育种技术的革新 ,可减轻对野生兰科植物资源的采集压力 ,从而有力地保护自然野生兰花资源。在发现种质资源的利用价值后 ,及时用于育成品种或中间育种材料是一种对种质资源有效的保存方式。蝴蝶兰品种系列、卡特兰品种系列、石斛兰品种系列和文心兰品种系列就是极好的例子。 2 远缘杂交在兰花育种中的应用兰科植物多为异花授粉 ,在原产地大多有昆虫为其授粉。但在引种驯化中 ,野生兰没有特定昆虫授粉 ,难以结实。即使有 ,也难以模拟原产地授粉环境而达到授粉目的 ,需人工授粉。因此 ,过去只能利用野生兰自然变异进行选择育种。目前栽培较多

17、的兰花 ,如卡特兰、蝴蝶兰、石斛兰、文心兰等 ,很多是由 2 个或更多种属间杂交选育而成的。因此远缘杂交是兰花育种的主要手段。目前 ,兰科人工杂交属已达 473个 20。卡特兰属约有 65种 ,由于属间容易杂交 ,产生大量杂交种 ,且与近缘种进行 2属、 3属和 4属间杂交 ,杂交品种接近 1000种 ,形成庞大的卡特兰家族。例如 bui. buiara是由巴索拉兰卡特兰柱瓣兰蕾丽兰丑角兰杂交而得。深为国人推崇的红花系大花蕙兰均为杂交种 ,染色体倍性呈多样性 ,有二倍体、三倍体、四倍体 ,甚至六倍体 ,它们作为亲本与其他兰花杂交 ,育出了多种在国际上获得奖项的植株。

18、近年美国、日本、新西兰等的育种者将大花蕙兰与建兰、纹瓣兰等杂交 ,培育出一些早花 (秋冬开花 )、微香、短叶型或垂花型大花蕙兰品种 , 很受消费者的喜爱 21。利用墨兰或春兰等与大花蕙兰杂交 ,也选育出一些杂交后代 22。国内一些属的杂交育种已获得成功。中科院昆明、华南植物研究所、四川农科院等单位已育成许多杂种。除不同属间杂交 23 , 还有一些在引进国外杂交品种的基础上进行杂交 ,得到了一些新的杂交品种。如兰属与安舌兰属 ( ansellia)、双柄兰属 (bif renaria)、克劳兰属 (clowesia)、龙须兰属 (catas

19、etum )、斑被兰属 (grammatophyllum ) 和鹤顶兰属 (phaius) 等 6个属进行远缘杂交 ,已登录了 23个杂交种 24。同属不同种间杂交涉及兰属 (cymbidium)、兜兰属 ( paphiopedilum)、鹤顶兰属 ( phaius) 25、虾脊兰属 (calanthe)、火焰兰属 ( renanthera) 26 等 ,有些已在国际上登录。近年仅兰属种间远缘杂交并对杂交种进行胚培养及繁育研究的就有 68个杂交组合 ,杂交后获得蒴果的组合有 32 个 , 经无菌播种获得后代植株的组合有 18 个 27 34。华南热带农业大

20、学农学院对部分海南野生兰进行远缘杂交 ,获得近 40个组合杂交种 ,离体培养已萌发的有 20个 (未发表 )。兰花杂交属和集体杂种的国际认可登录机构是国际兰花杂种登录权威机构 ( international regis- tration authority for orchid hybrids) 20。栽培品种一般由各国权威机构和人士自行组织登录 ,如美国兰花协会 ,全日本兰协会 ,新西兰兰花协会 ,新加坡兰花协会等。我国已由中国兰花学会与中国兰花协会联合组成“中国兰花品种登记注册审查委员会”。 3 组织培养技术在兰花育种中的应用 3. 1 种苗繁殖及杂种后代培育兰花的传

21、统繁殖方式为分株繁殖 ,繁殖系数低、速度慢;有性繁殖时 ,由于种子很小 ,没有胚乳 ,在自然条件下萌发率很低 ,这是限制兰花繁殖速度的主要因素。 20世纪初 , bernard分离出兰花的根菌 ,并用其感染兰花的种子进行萌发试验 ,创立了兰花种子共生萌发方法 ,推动了兰花繁殖技术的进步 ; 1922 年 , knudson将兰花种子在离体条件下非共生萌发。 20世纪 60年代 , morel将大花蕙兰的茎尖诱导形成原球茎并分化成植株 ,为实现兰花工厂化生产奠定了基础。目前有 70个属的兰花可采用离体培养方法繁殖后代。我国 20世纪 80年代开始研究兰花的快繁技术 ,除春兰、

22、建兰、蕙兰、墨兰、寒兰等国兰的组织培养获得成功外 ,许多热带兰品种如卡特兰、蝴蝶兰、虎头兰、大花蕙兰、文心兰、石斛兰、万代兰、冬凤兰、兜兰等的组织培养和工厂化生产也获得了成功。种子无菌发芽育苗的成功 ,使兰花品种间、种间及属间的杂交育种成为可能。如著名的蕾丽卡特兰 ( laeliocattleya) 就是卡特兰 (cattleya) 和蕾丽兰 305 郭丽霞等: 兰花育种研究现状及进展 (laelia )的属间杂交种。采用人工授粉杂交技术进行种胚培养 ,已获得了大量兰花杂种 ,全世界育成的兰花杂交品种有 106 410个 ,其中 80 % 85 %是利用胚培育成功的。华

23、南热带农业大学农学院以部分海南野生兰为材料进行杂交 ,已成功地获得杂交种子试管苗 (未发表 )。 3. 2 原生质体融合及组织培养结合诱变育种兰花原生质体融合技术为兰花育种开辟了新的途径 ,且倍受日益发达的兰花产业的关注。可从根尖、茎叶、原球茎、花瓣、愈伤组织、悬浮细胞分离获得兰花原生质体 ,但不同的外植体分离难度不同。目前 ,已从卡特兰、石斛兰、蕙兰、蝴蝶兰等十几种兰花中分离获得原生质体。作为单子叶植物 ,兰花原生质体的融合比较难。以蝴蝶兰、石斛兰、肾药万代兰为材料 ,仅得到 3 % 5 %的融合原生质体。对试管苗幼叶的高质量原生质体进行电融合 ,融合率达10

24、% 。通过改变酶液、培养方式及培养基的配方等可望获得更好的结果。组织培养与诱变相结合是很有应用价值的育种手段。离体培养中 ,高浓度的激素可诱导愈伤组织发生变异。在高浓度的激素作用下 ,万代兰属花色发生改变 ,蕙兰属花瓣变厚 ,蝴蝶兰属整个植株发生变异。目前诱变处理多以原球茎作为基础材料 ,也有以丛生芽、根状茎为材料 ,通过秋水仙素处理及 60 co 辐射诱变 ,涉及兰属杂交种、五唇兰、寒兰 35、春兰 36、沉香虎头兰37、蝴蝶兰 38、墨兰 39、墨兰与大花蕙兰 f1杂交种 40、紫花苞舌兰41。 4 分子标记在兰花育种中的应用近年来 ,作为物种形态学分类鉴定的

25、一种辅助手段 ,遗传标记技术被广泛应用于属间、种间、品种间的分类和亲缘关系的鉴定研究中。 4. 1 分子标记分析亲缘关系和遗传多样性兰花植株营养体较相似 ,仅凭形态特征较难分类。分子标记的应用 ,可以准确、快速分类 ,判断其亲缘关系。 choi等 42在杂交中发现春兰 ( cymbidium goeringii ) 与建兰 (cym. ensi folium)、寒兰 (cym. kanran) 和墨兰 (cym. sinense) 具较高的亲和性 ,而与蕙兰 (cym. f aberi)、纹瓣兰 (cym.aloif olium )、鼓槌石斛 (dendrobium chrys

26、otoxum )和蝴蝶兰则无亲和性 ,经 rapd分析发现 ,春兰与建兰、寒兰和墨兰的亲缘关系较近 ,与蕙兰和纹瓣兰亲缘关系较远 ,与石斛兰和蝴蝶兰更远。文李等 43利用 rapd 技术分析了兰属 5个种 2个变种共 13个品种间的亲缘关系 ,从 55种 10个碱基随机引物中筛选出 4种引物 ,扩增出 93条多态性带 ,多态率为 100 % ,聚类分析表明 ,建兰、墨兰和春兰的亲缘关系较近 ,而春剑 ( cym. longibracteatum)、寒兰、独占春 (cym. eburneum) 和兔耳兰 (cym.lancif olium )与建兰的亲缘关系较远。孙彩云等

27、44利用 rapd技术分析中国兰属 ( cymbidium )的 28个原生种和部分种的不同品种及 3个杂交种共 50个材料间的亲缘关系。张俊祥等 45采用 aflp技术对云南省兰属的 14个种和 3个变种中的 34份样本进行了亲缘关系分析。李昂等 46采用 rapd技术研究了中国 3种珍稀濒危兰科植物硬叶兜兰 ( paphiopedilum micranthum)、麻栗坡兜兰 (paph. malipoense) 和独花兰 (changnienia amoena chien)的遗传多样性与群体遗传结构 , 12个 rapd引物在两种兜兰中共扩增出 131条

28、带 , 11个独花兰群体采用 16个 rapd引物共扩增出 119条带 ,研究认为 , 3个物种的遗传多样性偏低而群体间遗传分化较高 ,主要原因在于人为的过度采挖和生境的片断化。 4. 2 分子标记鉴定兰花品种 obara-okeyo等 47利用 rapd技术对 36个大花蕙兰 ( cymbidium hybridium )栽培种进行了品种鉴定和遗传分析 ,用 15个 rapd引物扩增出 132 条带 ,其中 78 %具多态性 ,所有的品种均可清楚鉴别 ,品种间的遗传距离为 0. 08 0. 05;利用 opa-1 引物 ,可以将已混淆的品种明确地区别出来。 chen 等 48利用

29、 ecori+ 4t和 msei + 3作引物对万代兰进行了 aflp分析 ,发现同一杂交来源的株系间有超过 10 %多态性 aflp带数 ,而同一品种的茎尖培养体细胞无性系变异品种也有 0. 3 %0. 7 % 的 aflp带数具多态性 ,说明 aflp适用于万代兰属品种的鉴定。谭文澄 49等采用 lcf -1寡核苷酸探针和限制性内切酶 hinf -1, 检测兰属 23样株和石斛属 1样株的 dn a酶解片段 ,获得了清晰易读的由 6 15条带组成有特异性的遗传指纹图谱 ,其结果表明 , lzf-1探针能与兰属及石斛属植物基因组 dna中的酶解片段中简单重复序列形成杂交分子

30、, 证实近缘植物基因组中存在同源 dna片段;各种植物谱带各具特异性 ,可见其间亲缘关系不同。同种植物谱带条数一致 ,电泳迁移率即片段的分子量区间类似 ,此方法可得到具有个体特异的 dna指纹图 , 可进一步应用于兰属植物的分子遗传学分析。 306 广西农业科学 2007年第 38卷第 3期 5 基因工程技术在兰花育种中的应用 5. 1 兰花特异基因功能分析与分离与花发育、花色及香味等有关的基因功能分析与分离的研究成为热点。在花发育方面 , yu等 50利用其建立的石斛兰属品种“ madame thong-in ”离体开花系统 ,通过 mrna差选方法 ( mrna differ

31、en- tial display) ,从茎尖分生组织和花芽分生组织中分别提出总 m rna,序列分析表明 ,其中 5个基因可能与花的转变有关。 yu等 51进一步分离出一些与花发育有关的基因 ,如 doh 1基因 ,控制花芽的形成和提早开花; domads 1 、domads 2和 domads 3基因 ,与花器官的形成有关。 bui等 52发现 3种 acc合成酶基因在蝴蝶兰授粉后的子房发育中起着重要作用 , 研究结果表明 , pral -acs 2和 pral-acs 3 的表达是授粉的初始信号 , 而 pral-acs 1则是次级信号。张宪省等 53

32、利用朵丽蝶兰分析生长素、乙烯及去雄等与授粉有关的因子调节下 acc合酶和 acc氧化酶基因在花中的表达 ,结果表明 ,生长素和乙烯均可诱导 acc合酶和 acc氧化酶的m rna在花器官中积累 ,去雄却不能诱导这两个基因在花器官中表达;生长素和乙烯所诱导的 acc合酶和 acc氧化酶的 mrna在花器官中的积累模式相似 , acc氧化酶的 mrna在柱头的表皮和薄壁细胞中积累。花色基因功能分析和分离取得了一些进展。查尔酮合成酶 ( chalcone synthase, chs)是花青素生物合成的一个重要的关键酶。利用转基因共抑制的特点 ,将查尔酮合成酶反义基因 dna

33、转到花卉中 , 可以改变植物的花色。 liew 54等利用同源探针从 bromheadia f inlaysoniana的 cdna文库中克隆出 3个 chs基因 ochs 3 、ochs 4和 ochs 8 ,其序列长度分别为 1445bp 、 1382bp和 1439bp,三者的同源性达 97 %以上。许华欣等 55为了探讨控制蝴蝶兰花色的机制 ,利用“白花红唇蝴蝶兰”和“红花朵丽蝶兰”为材料 ,进行了 chs cdna克隆和分析 ,发现 “白花红唇蝴蝶兰”约有 11个 chs基因 ,而“红花朵丽蝶兰”约含有 7个 chs基因 ,蝴蝶兰 chs基因为多基因族;从“白花红唇蝴蝶兰

34、” 选取出 pochs0 1 克隆系 , dna序列长度为 1498bp,可编码 390个氨基酸 ,其氨基酸序列与拟南芥等作物相比 ,具 59. 5 % 的同源性;利用 pochs 0作探针 ,对“粉红花蝴蝶兰”与“白花蝴蝶兰”杂交选育的淡红花、晕红花和白花后代进行 southern杂交 ,发现子代的杂交条带与母本相似 ,而与父本完全不同 ,说明来自“白花红唇蝴蝶兰”的 pochs0 1克隆系 ,可能是负责控制红花或喷点花花色表达的基因 ,而白花亲本可能无 pochs0 1基因的存在 ,或者由其他 chs基因负责控制。此外 ,王健等 56尝试以无香和有香共 16种春兰提取基因组

35、 dna后进行 rapd分析 ,以确定与香味成分连锁的相关基因。 5. 2 基因转化技术兰花基因工程起步晚 ,进展缓慢 ,主要是因为兰科植物对农杆菌不敏感 ,缺乏合适的载体 ,而一些直接转移的方法如 peg介导和电激法成功率又不高。 yang等 57成功地克隆了蕙兰花叶病毒外壳蛋白基因 ,用电子枪轰击法将这一基因导入兰花的原球茎和愈伤组织 ,得到较高的转化表达 ,给兰花基因工程带来了希望。目前 ,利用兰花离体培养物进行基因转化的研究取得了一些进展。 1992年 griesbsh采用虾脊兰 ( calanthe orchid )胚的顶端分生组织进行基因转化试验 ,在转化植株

36、中检测到 gus基因的特异型色斑。 kuchnle用基因枪轰击石斛兰属植物原球茎的遗传转化也获得成功。基因工程较多应用在兰花花色基因的研究上 ,国外发展得比较快 ,相对研究比较多 ,而国内则较少。目前进行基因转化研究的兰花种类有蝴蝶兰属、兰属、石斛兰属、文心兰属、万代兰属、五唇兰属 ( doritaenopsis )、卡德丽亚兰属和长萼兰属 ( brassia )等 58, 59 ,至今尚停留在建立基因转化体系的水平 ,还未达到应用阶段。 6 结束语综观国内外兰花育种 ,不难看出 ,国外在资源调查、研究利用方面走在前列 ,尤其是组织培养和基因工程应用方面。我国在兰花资

37、源上仍具有较大优势 , 在对现存野生兰科植物进行广泛调查的基础上 ,进行了系统分类和资料收集 ,在组织培养和常规育种方面也有较好的积累。对野生兰花资源的收集、保存以及创新利用工作有待进一步深入。应投入更多的人力、物力 ,加强种质资源的保护 ,加强基础理论研究 ,在传统育种技术与现代分子生物学相结合的基础上 ,拓展兰花育种研究新局面。参考文献: 1杨琪 .浅议云南兰科植物种质资源保存和种源基地建设 j.林业调查规划 , 2002, 12( s1): 16 19. 307 郭丽霞等: 兰花育种研究现状及进展 2王英强. 中国兜兰属野生花卉资源 j.仲恺农业技术学院学报 , 2

38、000, 13( 1): 45 49. 3李昂 ,罗毅波 ,熊治廷 ,葛颂 .三种兰科植物的保护遗传学初探 j.植物学报 , 2002, 44 (2): 250 252. 4罗毅波 . 中国兰科植物的保护策略 j. 中国林业 , 2003, ( 22): 24 25. 5于永福. 中国兰花状况调查 j. 森林与人类 , 2004, ( 5): 26 27. 6丁慎言 ,黄少华 ,赖齐贤 .海南中国野生兰花的宝库 j.中国花卉园艺 , 2004, ( 2): 32 33. 7李敏. 江西野生兰科植物资源初探 j. 江西园艺 , 2004, ( 6): 94 97. 8关文灵 ,李枝林 ,余

39、朝秀 ,王玉英 ,程利霞.云南野生兰花资源的多样性及其引种驯化 j. 西南农业学报 , 2006, 19(4): 688 691. 9刘仲健 ,刘可为 ,陈利君 ,雷嗣鹏 ,李利强 ,施晓春 ,黄来强. 濒危物种杏黄兜兰的保育生态学 j.生态学报 , 2006, 26(9): 2791 2800. 10丁慎言 ,尹俊梅.海南岛野生兰花图鉴 m. 北京: 中国农业出版社 . 2005. 11 shimura h, koda y. micropropagation ofcypripe- dium macranthosvar. rebunensethrough protocorm- like

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