基因工程技术概述(文件)

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【正文】 ℃ 45min Protocol: 3*1ml菌液 沉淀 + 6000rpm 5min 冰浴 30min 6000rpm 5min 沉淀 + +10ul 连接产物 +6ulPBR322 阴性对照 A+T A+T 阳性对照 Amp Tet 冰浴 30min 阳性克隆的鉴定： 挑菌落，小抽质粒，电泳 菌落 PCR 94 ℃ 10 min 94 ℃ 30s 55 ℃ 40s 72 ℃ 1min 73 72 ℃ 8min 74 4 ℃ hold X 30 碱裂解法 碱裂解法 • 原理： pH值介于 ，线形的 DNA和环状的质粒DNA变性，中间的氢键短裂，线状 DNA变性后互相分开，而环状分子双螺旋主链骨架彼此盘绕，互补两条链紧密合在一起。 试剂作用： • 溶液 I葡萄糖、 、 EDTA。 • 溶液 III醋酸钾。 01:51:5601:51:5601:511/24/2023 1:51:56 AM • 1以我独沈久，愧君相见频。 2023年 1月 24日星期二 上午 1时 51分 56秒 01:51: • 1比不了得就不比，得不到的就不要。 上午 1时 51分 56秒 上午 1时 51分 01:51: • 没有失败，只有暂时停止成功！。 01:51:5601:51:5601:51Tuesday, January 24, 2023 • 1不知香积寺，数里入云峰。 2023年 1月 上午 1时 51分 :51January 24, 2023 • 1少年十五二十时，步行夺得胡马骑。 01:51:5601:51:5601:511/24/2023 1:51:56 AM • 1越是没有本领的就越加自命不凡。 :51:5601:51:56January 24, 2023 • 1意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。 上午 1时 51分 56秒 上午 1时 51分 01:51: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感 谢 您 的 下 载 观 看 专家告诉 。 2023年 1月 上午 1时 51分 :51January 24, 2023 • 1业余生活要有意义，不要越轨。 01:51:5601:51:5601:51Tuesday, January 24, 2023 • 1知人者智，自知者明。 上午 1时 51分 56秒 上午 1时 51分 01:51: • 杨柳散和风，青山澹吾虑。 2023年 1月 24日星期二 上午 1时 51分 56秒 01:51: • 1楚塞三湘接，荆门九派通。 01:51:5601:51:5601:511/24/2023 1:51:56 AM • 1成功就是日复一日那一点点小小努力的积累。 2023年 1月 上午 1时 51分 :51January 24, 2023 • 1行动出成果，工作出财富。 01:51:5601:51:5601:51Tuesday, January 24, 2023 • 1乍见翻疑梦，相悲各问年。 初步鉴定 后续： • 测序确定插入序列与基因 bank报告完全一致 • 检测外源基因有无整合宿主细胞 ？ • 检测外源基因转录水平表达？ • 检测外源基因蛋白水平表达？ • 静夜四无邻，荒居旧业贫。 • 溶液 II NaOH、 SDS。环状分子由于本身合在一起，所以复性迅速而准确。 • 氯化钙法 ： • 氯化镁法： • 电转法：

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