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一种基于花药培养的红掌脱毒方法技术

来源：花匠小妙招时间：2024-11-30 11:00

本发明专利技术提供了一种基于花药培养的红掌脱毒方法，该脱毒方法详细步骤包括：（1）红掌花序的取材与预处理；（2）无菌花药的获得与接种；（3）花药诱导培养；（4）愈伤组织分化培养（5）壮苗生根培养；（6）炼苗与移栽；（7）红掌单倍体植株的剔除。本发明专利技术的脱毒原理是通过花药培养途径获得了红掌花粉植株，花粉植株几乎不含病毒，再剔除花培群体中的单倍体杂株，从而获得脱毒的红掌正常倍性植株。本发明专利技术操作简便，生产技术要求低，脱毒效率高，经检测脱毒率几乎可达100%，能够满足红掌脱毒苗规模化生产的需要。

A Virus-free Method for Anther Culture of Anthurium andraeanum

The present invention provides a method for detoxification of Anthurium andraeanum based on anther culture. The detoxification method includes: (1) sampling and pretreatment of inflorescence of Anthurium andraeanum; (2) acquisition and inoculation of sterile anthers; (3) anther induction culture; (4) callus differentiation culture; (5) rooting culture of strong seedlings; (6) seedling refining and transplanting; (7) removal of haploid plants of Anthurium andraeanum. The detoxification principle of the present invention is to obtain anther pollen plants of Anthurium andraeanum by anther culture, and the pollen plants contain almost no virus, and then eliminate haploid hybrid plants in anther culture population, so as to obtain the normal ploidy plants of the detoxified Anthurium andraeanum. The invention has the advantages of simple operation, low production technology requirements, high detoxification efficiency, and almost 100% detoxification rate after detection, which can meet the needs of large-scale production of the virus-free seedlings of Anthurium andraeanum.

【技术实现步骤摘要】
一种基于花药培养的红掌脱毒方法
本专利技术涉及一种基于花药培养的红掌脱毒方法，尤其涉及一种通过花药离体培养途径高效获得红掌脱毒种苗的方法，属于园艺科学领域。
技术介绍
红掌(AnthuriumandraeanumLinden)又名花烛、安祖花，为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，红掌的叶呈心形、墨绿、革质、有天鹅绒般的金属光泽，叶柄纤细硬朗；红掌的花朵由鲜猩红色的佛焰苞和橙红色的肉穗花序组成，花序螺旋状卷曲，花苞蜡质、形似手掌，整朵花光彩夺目，风姿楚楚，给人以明快、热烈的感受；红掌的花梗韧性好，每朵花的花期一般可达一个月，全年均可开花，因此红掌是一种较为珍稀的观花观叶两者兼宜的观赏植物，具有极高的观赏价值。野生红掌原产于哥斯达黎加、哥伦比亚等热带雨林区，常附生在树上，有时附生在岩石上或直接生长在地上，1896年由法国著名植物学家自哥伦比亚西南部的热带雨林引种到欧洲，20世纪60年代盛行欧美各国，此后欧洲、亚洲、非洲皆有广泛栽培，在许多国家和地区已经成为仅次于热带兰的主要热带切花品种。目前，荷兰、夏威夷、毛里求斯是世界红掌的主要生产中心，而我国红掌产业虽然起步较晚，但近年来发展迅速。随着红掌生产规模的不断扩大以及人们对红掌的喜爱持续升温，红掌如今已成为了国内主要的盆栽花卉和切花；此外红掌还具有净化空气的作用，不仅可以吸收人体排出的废气(氨气、丙酮)，还可以吸收装修残留的各种有害气体如甲醛等，同时可以保持空气湿润，是室内盆栽的优选，因此红掌栽培有着广泛的应用前景和很高的经济价值。红掌的繁殖方式有播种繁殖、扦插繁殖、分株繁殖以及组织培养这几种。播种繁殖法一般在育...

【技术保护点】
1.一种基于花药培养的红掌脱毒方法，其特征在于，该脱毒方法的详细步骤如下：（1）红掌花序的取材与预处理在10月~11月的晴天上午或阴天早上露水干后取材，将摘得的花序用湿纱布包裹带回实验室，筛选花粉小孢子处于单核中晚期的花序，置于4℃低温预处理3~5d；（2）无菌花药的获得与接种将上述花序用自来水冲洗10~20min，在超净工作台无菌条件下，先用75%酒精浸泡10min，再用无菌水冲洗干净，然后用无菌滤纸吸干表面水分；于解剖镜下用镊子拨开花序取出花药投入0.5%次氯酸钠+2‑3滴吐温‑80的消毒液中浸泡5~8min，再用无菌水冲洗3~4次后，即获得无菌花药；将无菌花药接种在诱导培养基中，每瓶培养基接种40‑50枚花药；（3）花药诱导培养将接种了花药的诱导培养基放置于人工气候培养箱中培养，培养条件控制为温度24~26℃，相对湿度65~75％，光照强度1500~2000Lux，光照10h/d，培养45~55d可诱导出黄绿色较致密的愈伤组织；（4）愈伤组织分化培养无菌条件下将诱导成功的直径为1.0‑2.0cm的愈伤组织转接到分化培养基上，置于24~26℃、相对湿度65~75％、光照强度2000...

【技术特征摘要】
1.一种基于花药培养的红掌脱毒方法，其特征在于，该脱毒方法的详细步骤如下：（1）红掌花序的取材与预处理在10月~11月的晴天上午或阴天早上露水干后取材，将摘得的花序用湿纱布包裹带回实验室，筛选花粉小孢子处于单核中晚期的花序，置于4℃低温预处理3~5d；（2）无菌花药的获得与接种将上述花序用自来水冲洗10~20min，在超净工作台无菌条件下，先用75%酒精浸泡10min，再用无菌水冲洗干净，然后用无菌滤纸吸干表面水分；于解剖镜下用镊子拨开花序取出花药投入0.5%次氯酸钠+2-3滴吐温-80的消毒液中浸泡5~8min，再用无菌水冲洗3~4次后，即获得无菌花药；将无菌花药接种在诱导培养基中，每瓶培养基接种40-50枚花药；（3）花药诱导培养将接种了花药的诱导培养基放置于人工气候培养箱中培养，培养条件控制为温度24~26℃，相对湿度65~75％，光照强度1500~2000Lux，光照10h/d，培养45~55d可诱导出黄绿色较致密的愈伤组织；（4）愈伤组织分化培养无菌条件下将诱导成功的直径为1.0-2.0cm的愈伤组织转接到分化培养基上，置于24~26℃、相对湿度65~75％、光照强度2000~2500Lux、光照10~12h/d的培养条件下进行愈伤组织分化培养，培养38~45d后愈伤组织分化出不定芽；（5）壮苗生根培养筛选步骤（4）中分化出的不定芽，将高于1.5cm的小芽从愈伤组织上切下，接种到生根培养基上，置于温度22~25℃、相对湿度60~80％、光照强度2000~3000Lux、光照12~14h/d的培养条件下进行壮苗生根培养，每30~33d继代一次，继代3次后可得到长出2-3片幼叶、根系生长旺盛的红掌幼苗；（6）炼苗与移栽将装有红掌幼苗的组培瓶移到温室中，此时温度控制在20~27℃、湿度控制在75％~85％，将组培瓶的瓶口打开，在自然光光照的条件下炼苗7~9d，然后将幼苗从组培瓶中取出，清洗掉根部的培养基残留，移栽入温室的栽培基质中，常规栽培管理；（7）红掌单倍体植株的剔除移栽后的红掌幼苗生长到现蕾期时，将单倍体植株剔除，剩余的则为红掌正常倍性的植株。2.根据权利要求1所述的一种基于花药培养的红掌脱毒方法，其特征在于，所述步骤（1）中筛选花序的方法为：将花粉经DAPI(4，6-联脒-2-苯基吲哚)染色确认小孢子发育时期为单核中晚期。3.根据权利要求1所述的一种基于花药培养的红掌脱毒方法，其特征在于，所述步骤（2）和（3）中诱导培养基的配方为：KNO31200~1400mg/L，（NH4）2SO4385~420...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚丹，
申请(专利权)人：江苏高航农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32