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组培实验室所需仪器设备及清单

来源:花匠小妙招 时间:2024-11-30 10:27

  植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

  植物组织培养设备:

  1、高压消毒锅:用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。

  2、超净工作台:用于培养物的无菌操作。

  3、接种工具:包括双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、酒精灯或接种灭菌器等。

  4、培养设备:包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床、恒温培养箱、人工培养箱等。

  5、化学实验及分析设备:包括分析天平,天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等。

  6、封口膜,培养瓶,试管,培养皿,记号笔,托盘,手术接种剪,直镊,枪型接种镊,手术刀柄,超净工作台,接种灭菌器,不锈钢接种盘,组织培养架,光照培养箱,人工气候箱,生化培养箱,霉菌培养箱,恒温恒湿箱,照度计,PH计,酸度计,电导率仪,干湿温度计,玻璃棒温度计,电子天平,架盘天平,精密电子秤,低温储藏箱,恒温振荡器,磁力搅拌器,离心机,生物显微镜,高压灭菌锅,培养基定量灌装机,纯水器,组培推车,三角烧瓶,烧杯,量筒,试管架,试管刷,容量瓶,酒精灯,干燥器,刻度吸管.

  组培试剂类:植物生长调节剂类:6-苄氨基嘌呤(6-BA);6-糠氨基嘌呤(KT;激动素);腺嘌呤(腺素);氯吡苯脲(KT-30;CPPU);反玉米素;塞苯隆(TDZ);生物素;α-萘乙酸(NAA);3-吲哚乙酸(IAA);3-吲哚丁酸(IBA);2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D);赤霉素GA3 ;奈乙酰胺(NAD);β-奈氧乙酸;对氯苯氧乙酸(防落素);对溴苯氧乙酸;对碘苯氧乙酸;赤霉素GA4+7 (GA4:GA7=1:2);吲哚-3-丙酸;吲哚-3-丙烯酸;吲哚-3-甲醇;吲哚-3-甲醛;吲哚-3-甲酸;三十烷醇;多效唑(PP333);缩节胺;矮壮素;乙烯利。有机物类:烟酸;肌醇;盐酸硫胺(VB1);盐酸吡哆辛(VB6);甘氨酸;叶酸;核黄素(VB2);抗坏血酸(VC);正丁酸; DL-精氨酸;腺嘌呤硫酸盐;蛋白胨;水解酪蛋白;蔗糖;葡萄糖。无机物类:硫酸铁;乙二胺四乙酸二钠盐;乙二胺四乙酸铁钠盐;硼酸;氯化钴;碘化钾;钼酸钠;无水氯化钙;二水氯化钙;干燥氯化钙;硝酸钙;D-泛酸钙;磷酸三钙;硫酸铜;硝酸胺;硝酸钾;结晶硫酸镁;硫酸亚铁;磷酸二氢钾;硫酸锰;硫酸锌;磷酸二氢钠;三氧化钼;氢氧化钾;硫酸铵 。日用耗材:琼脂粉;活性炭粉;超细活性炭粉。消毒试剂类:甲醛(福尔马林溶液);高锰酸钾;新基尔灭(苯扎溴铵溶液);安替福民(次氯酸钠溶液);过氧化氢 30%(双氧水)。

  植物组织培养的步骤有哪些

  将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放人为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物,除去脂质性的物质,便于灭菌液的直接接触。当然,理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。

  对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10~30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之70%酒精穿透力强,也很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下,待酒精蒸发后再剥除外层,取用内部材料。

  用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多,可根据情况选取1—2种使用见表。第四步是用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3-l0次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意:①酒精渗透性强,幼嫩材料易在酒精中失绿,所以浸泡时间要短,防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料,特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些,如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱,一般浸泡10分钟左右,对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿,所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08—0.12%的吐温20或80(一种湿润剂),可以降低植物材料表面的张力,达到更好的消毒效果。灭菌剂 使用浓度(%) 持续时间(min) 去除的难易 效果

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