首页分享 FISH技术在肿瘤病理诊断及肿瘤分子靶点治疗中的应用

FISH技术在肿瘤病理诊断及肿瘤分子靶点治疗中的应用

来源：花匠小妙招时间：2024-11-28 02:51

FISH技术在肿瘤病理诊断及肿瘤分子靶点治疗中的应用
中山大学肿瘤防治中心
分子病理诊断实验室
王芳邵建永
细胞遗传学技术
原理:通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA
靶序列杂交
观察:荧光显微镜
原位观察(细胞、组织)细胞核
彩色探针信号
目的:获得细胞内多条染色体(或染色体片段)或多种
基因状态的信息。
Fluorescence in situ hybridization
(FISH)
用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列,因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位
荧光标记探针
探针变性
样本DNA变性
杂交
原理
FISH技术的特点
操作简便,探针标记后稳定,可与多种技术结合,
可成功地帮助细胞遗传学家做出回顾性分析
方法敏感,能迅速得到结果,24小时就可以完成检测
标本来源丰富,间期细胞,分裂中期细胞、分化或未分化细胞及死亡或存活的细胞皆可以被检测
centromere
telomere subtelomere
locus
specific
whole chromosome paint
CSP探针:染色体着丝粒探针
GLP探针:位点特异性探针
WPP探针:全染色体或染色体区域特异性探针
FISH探针的种类
FISH技术在乳腺癌检测中的应用
乳腺癌 Her-2基因
致癌基因:Her-2基因;
位点:-q12;
编码蛋白:跨膜蛋白(与
表皮生长因子受体部分同源);
25-30%乳腺癌病人都有HER-2的扩增;
HER-2基因扩增是决定Herceptin治疗是否有效的关键性指标。
Her-2基因的检测方法
检测方法
检测指标
优点
缺点
IHC
Her-2蛋白
费用低
光镜即可观察结果
准确性差,主观性强,假阳性率高
CISH
Her-2 DNA
光镜即可观察结果
对低度扩增及染色体非整倍扩增检测灵敏度下降
FISH
Her-2 DNA
对于低倍、高倍染色体非整倍性扩增检测准确性高,灵敏度特异性好,结果判断客观
相对费用较高
疾病
名称
检测探针
标记颜色
探针定位
探针名称
乳腺癌
GLP Her2 / CSP17
红/绿
Her2: -q12
CSP17: