玉米细菌性枯萎病菌.ppt
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1、玉米细菌性玉米细菌性枯萎病菌枯萎病菌Erwiniastewartii(Smith)Dye一、总述 玉米细菌性枯萎病起玉米细菌性枯萎病起源于美洲,源于美洲,19871987年首次年首次发现于美国长岛。病菌发现于美国长岛。病菌通过病种子进行远距离通过病种子进行远距离传播,病区通过玉米叶传播,病区通过玉米叶甲和杂草寄主传播并越甲和杂草寄主传播并越冬。玉米细菌性枯萎病冬。玉米细菌性枯萎病是维管束型病害,受害是维管束型病害,受害后植株矮缩或枯萎,对后植株矮缩或枯萎,对玉米特别是甜玉米能造玉米特别是甜玉米能造成极大危害。成极大危害。二、分布状况二、分布状况主要分布于亚洲,欧洲和美洲主要分布于亚洲,欧洲和美
2、洲亚洲:亚洲:越南、泰国、马来西亚越南、泰国、马来西亚欧洲欧洲:俄罗斯、波兰、瑞士、意大利、前南斯拉夫(俄罗斯、波兰、瑞士、意大利、前南斯拉夫(19861986年年 发表的文章认为发表的文章认为19521952年的报道是错误的)、罗马尼亚、年的报道是错误的)、罗马尼亚、希腊希腊美洲:美洲:加拿大、加拿大、美国美国、墨西哥、哥斯达黎加、墨西哥、哥斯达黎加、波多黎各波多黎各、圭亚那、圭亚那、秘鲁秘鲁、巴西。、巴西。目前我国尚无此病发生的报道。目前我国尚无此病发生的报道。三、病原菌三、病原菌学名学名:Erwiniastewartii(Smith)DyeErwiniastewartii(Smith)D
3、ye异名异名:Pantoea stewartii Pantoea stewartii subsp.stewartii(Smith)subsp.stewartii(Smith)Mertaert et al.(Mertaert et al.(现用名现用名)英文名英文名:Stewarts bacterial Stewarts bacterial wilt of cornwilt of corn分类地位分类地位:原核生物界原核生物界,薄壁菌薄壁菌门门,肠杆菌科,多源菌属。,肠杆菌科,多源菌属。病原特点:病原特点:玉米细菌性枯萎病菌是玉米细菌性枯萎病菌是一种无鞭毛、不产生芽孢、一种无鞭毛、不产生芽孢、革
4、兰氏染色阴性、兼性厌氧革兰氏染色阴性、兼性厌氧杆菌,大小为(杆菌,大小为(0.40.40.70.7)mm(0.90.92.02.0)mm,以单个或短链形,以单个或短链形式存在。在葡萄糖琼脂培养式存在。在葡萄糖琼脂培养基上形成奶黄、柠檬黄或橙基上形成奶黄、柠檬黄或橙黄色菌落。黄色菌落。斯氏泛生菌三个亚种的比较斯氏泛生菌三个亚种的比较性状性状玉米细菌性玉米细菌性叶枯病叶枯病玉米细菌性叶玉米细菌性叶枯秆腐病枯秆腐病甘蔗细菌性流甘蔗细菌性流胶病菌胶病菌鞭毛菌落明胶液化淀粉水解甘油解化无鞭毛小、黄色、圆+极多鞭毛大、淡黄色+极生单鞭毛黄色、圆形、黄色素可扩散+四、所致病害症状四、所致病害症状 细菌性枯萎
5、病细菌性枯萎病在玉米生长的各在玉米生长的各个阶段均能发生,个阶段均能发生,但以开花前最明但以开花前最明显。它是一种典显。它是一种典型的维管束萎焉型的维管束萎焉性细菌病,玉米性细菌病,玉米的茎、叶、雄穗的茎、叶、雄穗和果穗均可被害。和果穗均可被害。主要症状为植株主要症状为植株矮化和枯萎。矮化和枯萎。幼苗感病源于种子带幼苗感病源于种子带菌。叶片首先表现水渍菌。叶片首先表现水渍状,其后叶片变褐色,状,其后叶片变褐色,卷曲,幼苗枯萎或矮缩。卷曲,幼苗枯萎或矮缩。病株上的病菌可以由鞘病株上的病菌可以由鞘翅目跳甲取食传至键株。翅目跳甲取食传至键株。昆虫传染的叶片首先自昆虫传染的叶片首先自昆虫取食处开始,发
6、生昆虫取食处开始,发生水渍状斑点,然后逐渐水渍状斑点,然后逐渐向上下扩展,形成不规向上下扩展,形成不规则形淡绿色或黄色的条则形淡绿色或黄色的条纹,随着条纹的扩展,纹,随着条纹的扩展,叶片萎焉死亡,中后期叶片萎焉死亡,中后期症状类似水稻白叶枯病症状类似水稻白叶枯病。重病株可以全株萎焉重病株可以全株萎焉枯死,轻病株多半矮化,枯死,轻病株多半矮化,茎节变褐,雄蕊早熟,茎节变褐,雄蕊早熟,枯萎变白,雌蕊不孕或枯萎变白,雌蕊不孕或产生发育不全的果穗。产生发育不全的果穗。其上所结的种子,内部其上所结的种子,内部可能带菌,如果将病株可能带菌,如果将病株的茎、叶、花序等部分的茎、叶、花序等部分加以横切,则有黄
7、色黏加以横切,则有黄色黏液(菌脓)从维管束切液(菌脓)从维管束切口处溢出,易拉成丝。口处溢出,易拉成丝。玉米上另有一种与玉米细菌玉米上另有一种与玉米细菌性枯萎病症状极为相似的细菌性枯萎病症状极为相似的细菌性病害,称为玉米细菌性叶枯性病害,称为玉米细菌性叶枯病,此病最处在叶上出现水渍病,此病最处在叶上出现水渍状、透明、狭窄椭圆形斑点,状、透明、狭窄椭圆形斑点,1-2mm1-2mm长,以后扩展至长长,以后扩展至长400mm400mm或者更长的坏死条纹。病斑在或者更长的坏死条纹。病斑在后期形成红褐色边缘,中央黄后期形成红褐色边缘,中央黄褐色。病斑可相互愈合,形成褐色。病斑可相互愈合,形成较大的枯死斑
8、,最后形成碎片。较大的枯死斑,最后形成碎片。茎受害部分多在果穗着生的茎茎受害部分多在果穗着生的茎节上,发生深褐色的病斑,使节上,发生深褐色的病斑,使茎节腐烂,从而导致其上部枯茎节腐烂,从而导致其上部枯死,病重的植株也多半矮化,死,病重的植株也多半矮化,并促使不实果穗丛生。并促使不实果穗丛生。这种病这种病的病原在我国已经存在的病原在我国已经存在,在水,在水稻上引起褐条病。稻上引起褐条病。从症状上区分这两种从症状上区分这两种细菌性病害较难,不过,细菌性病害较难,不过,玉米细菌性枯萎病的病玉米细菌性枯萎病的病斑较宽,周围有波纹状斑较宽,周围有波纹状的边缘,病斑边缘不明的边缘,病斑边缘不明显,而细菌性
9、叶枯病水显,而细菌性叶枯病水渍状更突出,病部更透渍状更突出,病部更透明,茎上病斑和茎腐发明,茎上病斑和茎腐发生处与健部分界明显。生处与健部分界明显。另从病症上看,后者无另从病症上看,后者无黄色菌浓。黄色菌浓。五、适生性五、适生性(一)侵染循环(一)侵染循环 此菌在种子和传菌昆虫上越冬,偶尔在土此菌在种子和传菌昆虫上越冬,偶尔在土壤中、绿肥和玉米秸秆上存留。在生长季节壤中、绿肥和玉米秸秆上存留。在生长季节主要是靠昆虫传播引起再侵染。主要是靠昆虫传播引起再侵染。(二)寄主范围(二)寄主范围自然寄主:自然寄主:玉米所有品种(主要是甜玉米)玉米所有品种(主要是甜玉米)其他禾本科寄主有假蜀黍、鸭茅草状摩
10、擦禾。其他禾本科寄主有假蜀黍、鸭茅草状摩擦禾。接种寄主:接种寄主:有金色狗尾草、高粱、有金色狗尾草、高粱、苏丹草苏丹草、小米、黍、小米、黍、燕燕麦等。麦等。隐症寄主:隐症寄主:马唐、洋野黍、秋稷、毛线稷、马唐、洋野黍、秋稷、毛线稷、六月禾、鸭茅、小糠草、小麦可以带菌而不六月禾、鸭茅、小糠草、小麦可以带菌而不表现症状。表现症状。(三)对环境的适应(三)对环境的适应u病原细菌最适生长温度是病原细菌最适生长温度是3030 ,最低,最低7-97-9 ,最高,最高3939 ,致死温度,致死温度5353 10min10min,最适,最适pHpH值值范围为范围为。u生长期高温、土地肥沃潮湿、偏施氮肥可加生长
11、期高温、土地肥沃潮湿、偏施氮肥可加重病情。重病情。u种子内的病菌,在种子内的病菌,在815815 存活存活200-250d200-250d,在在20-2520-25 可存活可存活110-120d110-120d,病菌不能在土壤,病菌不能在土壤和病残体中越冬和病残体中越冬(四)传播能力(四)传播能力 在美国病区,田间传播主要靠玉米跳甲在美国病区,田间传播主要靠玉米跳甲的取食迁移。其他害虫也可传病,但效率的取食迁移。其他害虫也可传病,但效率远不如玉米跳甲。这些害虫有玉米齿跳甲、远不如玉米跳甲。这些害虫有玉米齿跳甲、黄瓜十二点叶甲、北方玉米根甲、西部玉黄瓜十二点叶甲、北方玉米根甲、西部玉米根甲、金龟
12、子、种蝇、金针虫等。米根甲、金龟子、种蝇、金针虫等。种子是远距离传播和新区发病的主要途种子是远距离传播和新区发病的主要途径。我国自径。我国自19821982年以来多次从进口玉米上年以来多次从进口玉米上截获玉米枯萎病菌。截获玉米枯萎病菌。六、检验检疫方法六、检验检疫方法(一)病菌分离和致病性测定(一)病菌分离和致病性测定 分离时可取病茎经表面消毒后用无菌手术刀切分离时可取病茎经表面消毒后用无菌手术刀切分离时可取病茎经表面消毒后用无菌手术刀切分离时可取病茎经表面消毒后用无菌手术刀切断病断病断病断病 茎,然后挤压切口,再将菌脓用无菌接种环移茎,然后挤压切口,再将菌脓用无菌接种环移茎,然后挤压切口,再
13、将菌脓用无菌接种环移茎,然后挤压切口,再将菌脓用无菌接种环移至至至至1mL1mL1mL1mL无菌无菌无菌无菌1%1%1%1%蛋白胨中,稀释培养观察菌落形状。蛋白胨中,稀释培养观察菌落形状。蛋白胨中,稀释培养观察菌落形状。蛋白胨中,稀释培养观察菌落形状。也可从病种分离,挑取可疑病粒,经表面消毒后,也可从病种分离,挑取可疑病粒,经表面消毒后,也可从病种分离,挑取可疑病粒,经表面消毒后,也可从病种分离,挑取可疑病粒,经表面消毒后,在无菌条件下切开病粒,取胚周围的组织,置于无在无菌条件下切开病粒,取胚周围的组织,置于无在无菌条件下切开病粒,取胚周围的组织,置于无在无菌条件下切开病粒,取胚周围的组织,置
14、于无菌水中捣碎,用前述方法或划线分离法分离。待菌菌水中捣碎,用前述方法或划线分离法分离。待菌菌水中捣碎,用前述方法或划线分离法分离。待菌菌水中捣碎,用前述方法或划线分离法分离。待菌落形成后,分别将单个的黄色圆形光滑菌落和白色落形成后,分别将单个的黄色圆形光滑菌落和白色落形成后,分别将单个的黄色圆形光滑菌落和白色落形成后,分别将单个的黄色圆形光滑菌落和白色平滑菌落移至培养斜面继续培养平滑菌落移至培养斜面继续培养平滑菌落移至培养斜面继续培养平滑菌落移至培养斜面继续培养35353535天,然后分别用天,然后分别用天,然后分别用天,然后分别用蒸馏水稀释成蒸馏水稀释成蒸馏水稀释成蒸馏水稀释成110110
15、7 7cfu/mlcfu/ml的菌液,用幼苗茎基注的菌液,用幼苗茎基注射接种法或喇叭口灌注接种法,或剪苗端接种法来射接种法或喇叭口灌注接种法,或剪苗端接种法来验证其致病性。验证其致病性。(二)血清学检验(二)血清学检验 可用可用ELISAELISA、乳胶凝集或荧光抗体检验技术。、乳胶凝集或荧光抗体检验技术。(三)实时荧光(三)实时荧光PCRPCR法法 该方法根据细菌该方法根据细菌16SrDNA16SrDNA序列的特异性,设序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,进行实施荧光特异性探针,进行实施荧光PCRPCR。检测的绝对。检测
16、的绝对灵敏度是是质粒灵敏度是是质粒DNADNA,14.2fg/14.2fg/l l,比常规的,比常规的PCRPCR电泳检测高约电泳检测高约100100倍。整个检测过程只需倍。整个检测过程只需2h2h,完全闭管,降低了污染的机会,无须,完全闭管,降低了污染的机会,无须PCRPCR后后处理。处理。七、检疫处理七、检疫处理(一)口岸检疫(一)口岸检疫 带菌种子是玉米细菌性枯萎病远距离传带菌种子是玉米细菌性枯萎病远距离传播的主要来源,是传入无病区的重要途径。播的主要来源,是传入无病区的重要途径。因此在口岸要特别注意玉米种子的检查,因此在口岸要特别注意玉米种子的检查,第一要检查产地是否是疫区。第二要抽查第一要检查产地是否是疫区。第二要抽查皱缩色深的籽粒,进行分离培养接种。皱缩色深的籽粒,进行分离培养接种。(二)除害处理(二)除害处理 种子化学消毒无效。微波炉种子化学消毒无效。微波炉707010min10min只能杀死只能杀死87%87%的病菌。国外有人建议将种子贮藏较长时间,使其中的的病菌。国外有人建议将种子贮藏较长时间,使其中的细菌自然死亡,达到除害效果。经过除害处理的玉米种细菌自然死亡,达到
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