烟草花叶病毒和番茄花叶病毒在烟草上致病性差异的分子机理研究

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第一部分文献综述

1引言

2移动蛋白研究进展

2.1 MPs的基本特性

2.1.1 MPs的编码策略

2.1.2 MPs之间的功能互补

2.1.3 MPs与细胞骨架的互作

2.1.4胞间移动模型

2.2 MPs与病毒侵染能力

2.2.1 MPs与系统侵染

2.2.2 MPs与局部侵染

2.3与MPs互作的寄主因子

2.3.1 DnaJ同源物

2.3.2几丁质甲基化酶

2.4胞间移动的调控

2.4.1 MPs的磷酸化

2.4.2胞间连丝

3内源大分子转运机制

3.1胞间连丝

3.2伴胞和筛管

3.3 MPs与光合产物运输

3.4内源大分子转运

第二部分研究内容

引言

第一章材料与方法

1.1材料

1.1.1毒源

1.1.2抗血清

1.1.3供试鉴别寄主

1.1.4菌种、质粒

1.1.5常用缓冲液的配制

1.1.6常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器

1.2方法

1.2.1病毒提纯

1.2.2病毒基因组RNA抽提

1.2.3 RT-PCR技术

1.2.4 DNA克隆技术

1.2.5序列测定及分析

1.2.6植物叶片中病毒蛋白的WesternBlot的检测

1.2.7体外转录方法

1.2.8 TAS-ELISA法定量检测ToMV/TMV

1.2.9水杨酸测定

第二章侵染性MP置换克隆的构建

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1 ToMV-S1 MP克隆的获得

2.2 TMV-B与ToMV-S1 MP基因置换

2.3置换克隆的鉴定

2.4置换克隆的侵染性试验

2.5后代病毒鉴定

3讨论

第三章T/OMP与TMV、ToMV侵染性差异分析

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1 T/OMP与TMV的寄主范围基本一致

2.2 T/OMP与TMV、ToMV诱发N基因介导的HR反应产生的枯斑大小差异

2.3 T/OMP与TMV诱发HR反应产生的SA水平差异

2.4 T/OMP、TMV和ToMV系统侵染能力比较

3讨论

3.1 MP基因不是ToMV不能系统侵染普通烟的病毒决定因子

3.2 MP基因影响N基因介导的HR反应产生的枯斑直径

3.3 MP基因在病毒系统侵染中的作用

小结

参考文献

致谢

附录A：常用试剂的配制

附录B：常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器

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