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芍药花抗氧化活性成分的分离和鉴定

来源：花匠小妙招时间：2024-11-25 16:17

芍药花抗氧化活性成分的分离和鉴定

【摘要】： 芍药(Paeonialactiflora)为芍药科(Paenoiaeeae)芍药属(Paeonia)的著名草本花卉，是我国传统中药，其根具有行瘀、止痛、凉血、消肿等多种药用功能，广泛的应用于保健品、医药等领域。而芍药花是副产物，产量很大，具有较强的药理活性。本论文重点对芍药花中化学成分进行提取、分离、分析和结构鉴定，并比较不同干燥方式处理的芍药花的抗氧化活性，为芍药花的开发应用提供理论基础。主要结论如下：1.采用分光光度法测定三种干燥方式处理的芍药花总黄酮和总酚的含量，其中在冷冻干燥处理的芍药花提取液中的总酚和总黄酮含量最高，分别为52.40±1.55mg/g和81.24±7.62mg/g。在自然阴干4天的条件下，芍药花提取液中的总黄酮和总酚的含量最低，分别为46.22±1.66mg/g和62.50±2.18mg/g。由此可以得出，冷冻干燥处理的芍药花总酚和总黄酮含量最高。2.采用化学发光法测定三种干燥方式处理的芍药花的抗氧化活性。分别测定了其提取液对O2-、H2O2和HO-的清除作用，通过比较其清除率IC50得出抗氧化活性大小为阴干<烘干<冻干，这与总酚和总黄酮的含量呈正相关，这表明，过长的干燥时间会导致活性物质的流失，不利于保持芍药花的活性成分。3.建立了立高效液相色谱-二极管阵列检测器/电喷雾质谱联用技术研究芍药花中的花色苷类化合物的成分分析的方法，首先用含0.1%HCl的甲醇溶液提取芍药中的花色苷，然后经AB-8大孔树脂纯化，最后用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-DAD-ESI-MS2）进行紫外-可见光谱和质谱分析，鉴定出4种花色苷。经紫外-可见光谱、质谱和文献报道综合分析确定了芍药花中的主要花色苷是芍药素-3，5-二葡糖苷，含量为77.14%。含量较低的三种花色苷为矢车菊素-3，5-二葡糖苷，芍药素-3，5-乙酸酰二葡糖苷，飞燕草素-3-葡萄糖苷。4.采用聚酰胺柱层析、C18柱色谱、高效制备液相色谱、高速逆流色谱等对芍药花的化学成分进行初步研究，首次从该部位分离得到16个化合物，经过质谱、1H-NMR和13C-NMR并和参考文献对比，鉴定为没食子酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、1,2,3,6-没食子酸酰-β-D-葡萄糖苷(4)、异槲皮素-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷(5)，1,2,3,4,6-没食子酸酰-β-D-葡萄糖苷(6)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、山奈酚-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷(8)、异鼠李素-3-O-D-葡萄糖苷(9)、山奈酚(10)、山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(11)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(13)、山奈酚-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷(14)、芍药苷(15)、芍药内酯苷(16)。其中化合物5、7、8、9、10、11、12、14首次从在该种植物分出，化合物5、8、9首次从该属中分出。从物质基础的角度进一步说明芍药花的开发应用价值。5.采用HSCCC分离了芍药花中主要黄酮苷和没食子酸鞣质化合物。逆流色谱最佳两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-水（1:9:10，v/v/v）和石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水（1:9:0.5::10，v/v/v/v），共分离得到异槲皮素-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-D-葡萄糖苷、山奈酚、山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷7个黄酮苷类化合物，1,2,3,4,6-没食子酸酰-β-D-葡萄糖苷1个没食子酸鞣质。样品纯度高、分离时间快。高速逆流色谱法非常适合于芍药中活性成分的分离，是一种高效快速的分离方法。本研究也为分离其他高极性化合物提供了一个好的方法和策略。

【学位授予单位】：山东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013

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