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郁金香杂色综合症病原的免疫电镜鉴定与检测研究

来源：花匠小妙招时间：2024-11-24 18:33

第18卷第2期1999年4月电子显微学报JournalofChineseElectronMicroscopySocietyVol-18,No121999-04文章编号:100026281(1999)022016520168郁金香杂色综合症病原的免疫电镜鉴定与检测研究胡东维13郎少兰2原雅玲3吴云峰1(11西北农业大学植保系,陕西杨陵712100)(21西安联合大学师范学院,31西安植物园第三研究室,西安710061)摘要:免疫胶体金标记技术的鉴定结果表明,造成郁金香杂色综合症的主要病原是TBV,其次也有少量的植株被TBBV、TTBV及CMV所感染。TBV及TTBV病毒主要在花瓣和叶片中增殖与积累,并通过种球传给后代。TBV和TBBV可共同识别某些植株的病原,说明二者应属同一种病毒的不同株系。关键词:郁金香杂色综合症;鉴定;检测;免疫金标记分类号:Q336;S43211文献标识码:A郁金香杂色综合症(tulipbreakingsyndrome)是郁金香生产中最为常见、为害最大的一类病毒性病害,最为典型和明显的症状表现为花瓣颜色局部杂色、变淡或加深、花瓣小或畸形甚至不能正常开放;与此同时,叶片出现不同程度的花叶症状或坏死斑点与坏死条块、茎细而黄,植株矮小;随病毒侵染时间的增长种球逐年退化变小,迅速失去种用价值(Asjes,1994)。郁金香引入我国栽培已有多年历史且在许多地区已有相当规模,但郁金香杂色综合症致种球退化问题却相当严重,往往每年需从国外大量购进原种。有研究表明,郁金香病毒病与种球的退化密切相关,防治病害的发生可以在很大程度上减轻种球的退化(Asjes,1990)。但目前我国郁金香病毒病的病原种类、发生频率及为害方式等问题目前尚不十分确定。为此,本文参照国外郁金香病毒病的流行发生情况利用免疫电镜技术对陕西郁金香杂色综合症的病原进行了鉴定,并对郁金香杂色病毒(tulipbreakingvirus,TBV)在植株体内的增殖与积累情况进行初步分析。材料与方法1.病原物的提取与回接带有不同程度杂色综合症的郁金香植株分别采自西安植物园种球花卉育种圃及中国科学院西北植物研究所。分别取其花瓣和叶片各数克,加少量含100mmolƒL柠檬酸、100mmolƒL蔗糖和114molƒLNaCl的50mmolƒL磷酸缓冲液(pH714)后研碎,在4℃,15,000g条件下离心20min,取上清液用作病原鉴定和回接寄主。在定量研究不同组织器官的带毒量时,用于分离病原物的病组织重量为2g,加缓冲液研磨、冲洗后定容至10ml。其它步骤同上。显症植株的病原粗提液人工回接盆栽的健康的郁金香,观察其发病与症状情况。2.免疫金电镜标记黄瓜花叶病毒(CMV)与烟草花叶病毒(TMV)、郁金香杂色病毒(TBV)的抗血清分别由农收稿日期:1997201227基金项目:植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金资助项目3现工作单位:杭州浙江农业大学生物技术研究所(310029)