复方银花解毒汤抗流感病毒药效作用及机制研究

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第一章复方银花解毒汤抗H3N2流感病毒的药效作用

1．实验材料

1．1药物和试剂

1．2细胞与毒株

1．3实验动物

1．4药品及试剂配置

1．5实验仪器

2．实验方法

2．1FFYH指纹图谱色谱条件

2．2细胞毒性测定

2．3病毒滴度测定

2．4细胞病变效应(CPE法)抑制试验

2．5血凝试验

2．6实时荧光定量qRT-PCR检测方法

2．7Western blot检测方法

2．8免疫荧光检测

2．10FFYH体内抗流感病毒性肺炎的作用

2．11血清细胞因子检测

3．数据处理

4．实验结果

4．1FFYH指纹图谱

4．2FFYH的细胞毒性测定结果

4．3FFYH对H3N2流感病毒复制的抑制作用

4．4FFYH抑制H3N2流感病毒RNA转录作用

4．5FFYH对H3N2流感病毒蛋白表达的抑制作用

4．6FFYH体内抗流感病毒的药效结果

4．7FFYH对H3N2流感病毒性肺炎的保护作用

4．8FFYH对感染H3N2流感病毒小鼠血清炎症因子的抑制作用

5．讨论

第二章网络药理学探究复方银花解毒汤抗H3N2流感病毒的药效作用机制

1．FFYH活性成分的TCMSP网络分析

1．1活性成分和流感疾病靶点获取

1．6结果和分析

2．FFYH关键活性化合物的网络分析

2．1复方银花解毒汤关键活性化合物及靶点获取

2．2FFYH关键活性化合物抗流感的潜在靶点分析

2．3构建FFYH关键活性化合物-抗流感靶点的网络图

2．4FFYH关键活性化合物相关靶点的PPI网络构建

2．5FFYH关键活性化合物的GO和KEGG富集分析

2．7结果与分析

3．讨论

第三章复方银花解毒汤抗H3N2流感病毒的药效作用机制

1．实验材料

1．1药品及试剂

1．2细胞与毒株

1．3实验动物

1．4药品及试剂百噎

1．5实验仪器

2．实验方法

2．2THP-1细胞毒性测定

2．3Western blot检测方法

2．4体外qRT-PCR检测方法

2．5体内小鼠肺组织qRT-PCR检测方法

3．数据处理

4．实验结果

4．1FFYH对THP-1细胞毒性测定结果

4．2FFYH对H3N2病毒RNA转录的抑制作用

4．3FFYH对H3N2流感病毒蛋白表达的抑制作用

4．4FFYH对H3N2流感病毒感染所致炎症因子的抑制作用

4．5FFYH抑制H3N2感染THP-1单核细胞所致过激炎症反应的作用机制

4．6FFYH调控固有抗病毒免疫信号通路抗H3N2流感病毒药效作用机制

5．讨论

第四章复方银花解毒汤阻断自噬抑制H3N2流感病毒复制机理

1．实验材料

1．1药品及试剂

1．2细胞与毒株

1．3实验动物

1．4药品及试剂配置

1．5实验仪器

2．实验方法

2．1Western blot检测方法

2．2体外qRT-PCR检测方法

2．3体内小鼠肺组织qRT-PCR检测方法

2．4激光共聚焦检测细胞自噬潮方法

3．数据处理

4．实验结果

4．1FFYH促进自噬相关基因mRNA转录调控细胞自噬的作用

4．2FFYH能增强感染流感病毒THP-1单核细胞自噬

4．3FFYH能增强感染流感病毒A549细胞自噬

4．4阻断THP-1细胞自噬对FFYH抑制H3N2病毒复制的影响

4．5阻断A549细胞自噬对FFYH抑制H3N2病毒复制的影响

4．6FFYH对H3N2流感病毒感染所致细胞自噬潮的影响

5．讨论

总结

创新点

参考文献

综述

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢

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