一种用于检测人冠状病毒感染的通用引物序列及检测方法

摘要

本发明通过对GenBank上登录的六种人冠状病毒全基因组核酸序列的比对分析，在基因组多聚酶基因编码区(1b区)设计了一对简并引物hCoV-For和hCoV-Rev用于对人冠状病毒的通用定性检测。上游引物序列hCoV-For：ATGGGWTGGGAYTAYCCHAARTGTG，下游引物序列hCoV-Rev：TGYTGKGARCARAAYTCRTGWGG，扩增目的片段大小为605bp。分别提取HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63和HCoV-HKU1阳性样本的RNA，通过One-step RT-PCR对该通用引物对进行验证。结果表明，分别以上述四种人冠状病毒RNA为模板，以hCoV-For和hCoV-Rev为通用引物进行One-step RT-PCR反应后都能扩增出大小约600bp的单一目的条带。对PCR产物进行测序验证，结果表明扩增序列正确且不存在交叉反应。本发明可用于对人冠状病毒感染的核酸快速定性检测。展开▼

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