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兰花花香花色基因鉴定和分子标记辅助花色选择技术研究

来源：花匠小妙招时间：2024-11-23 05:19

兰花(Cymbidium)是我国的传统名花,具有较高的文化价值和独特的观赏价值,市场前景广阔。花香和花色是兰花重要的观赏性状,但迄今其遗传机制尚不清楚。因此,鉴定兰花花香和花色相关基因,建立分子标记辅助兰花花色选择技术体系,对进一步开展兰花花香和花色遗传育种研究具有重要意义。本研究以‘企剑白墨墨兰’、‘吴字翠墨兰’、‘黄花1号兰’、‘黄花2号兰’、‘宫粉佳人兰’、‘小凤兰’以及‘小凤兰’和‘吴字翠墨兰’杂交后代为材料,通过转录组测序和q RT-PCR分析寻找与兰花花香和花色相关基因,根据转录组测序结果开发SSR标记,筛选与兰花花色紧密连锁的分子标记,并开展光照和喷施蔗糖、Fe~(3+)与Al~(3+)对‘宫粉佳人兰’花色的影响试验。主要研究结果如下:1.利用q RT-PCR技术对18S、26S、ACT、EF1α、Rpo B、TUB、GAPDH、Psa B、RPS3、RPS19和Ch18Sr RNA、Ch28Sr RNA、Ch ACT、Ch EF1α、Chrpo B、Ch TUB、Ch UBQ和Ch TUA等18个内参基因进行溶解曲线和标准曲线分析,筛选出6个候选内参基因,分别是RPS3、RPS19、EF1a、GAPDH、Ch TUA和Ch TUB。利用ge Norm、Norm Finder和Best Keeper软件对6个候选内参基因进行表达稳定性评估。结果表明,RPS3、EF1a和GAPDH 3个基因适合用作兰花花香花色基因表达分析的内参基因。2.利用Illumina Hi Seq~(TM)技术对‘黄花1号兰’和‘黄花2号兰’的萼片及花瓣进行转录组测序,共获得了65512个unigenes,其中共有8965个unigenes差异表达。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要富集在光合作用-触角蛋白、光合作用、苯丙烷生物合成、单萜类生物合成、类黄酮生物合成、二萜类生... （共70页)