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物种鉴定流程及方法

来源：花匠小妙招时间：2024-11-20 17:16

样品采集1.植物药材样品对于中药材原植物采集用作DNA条形码研究的实验材料应为健康、新鲜、没被真菌、细菌和病毒等感染的叶片、花、芽、果实或种子等组织或器官要遵循一定的采样规范注意样本个数、压制凭证标本、拍摄原植物照片及生境照片并详细观察记录原植物形态特征同时用GPS仪定位记录海拔高度等。一般来说新鲜材料采集后最好及时提取DNA如在野外不便提取则应尽可能快的放在避光的冷环境中如液氮罐、干冰箱、冰壶、冰袋中并尽快运回实验室处理备用。对于那些分布在远离实验室的交通极为不便的边远地区要采集和及时运输新鲜材料提取DNA十分困难目前普遍采取的取样和保存植物样品的方法是硅胶干燥法。干燥时应注意以下事项1对于易失水的遗传物质材料如纸质叶或幼嫩叶等在采集后应立即放入柔软且通气性好的纸袋内将纸袋直接放入装有硅胶且密封较好的自封袋中进行快速干燥这样可使纸袋中的样品与硅胶能全面接触同时有效防止干样品在运输过程中与硅胶碰撞发生破碎样品与硅胶分开放置硅胶可以反复利用。为保证遗传物质材料能快速干燥同一份遗传物质材料不能过多可放入不同的纸袋中进行干燥。一旦发现硅胶从深蓝色变成粉红色要及时更换新的硅胶2对于不易失水的遗传物质材料如革质叶或蜡质叶等在采集后可放置一段时间在叶片脱水前然后再干燥或者采集后立刻放入硅胶的自封袋中干燥。一般来说硅胶与叶片的比例至少要10:1以保证叶片在12h之内干燥3对于难于用硅胶快速干燥的遗传物质材料如较厚或多浆的叶片或种子等可将这些材料碎成小片后放入纸袋中用硅胶快速干燥4同种不同个体的遗传物质材料不能混在一起采集应分开保存干燥5确保将遗传物质材料和具有其采集编号及其它信息的标签一起处理干燥遗传物质材料的小袋上也应提供相同的信息做到一一对应。对于采集回来的新鲜样品如要长期保存应经液氮处理后贮存在-80℃冰箱或直接储放于液氮中且在与提取缓冲液接触前应防止冰冻的样品在空气中融化否则酚类易被氧化。对于已干燥好的植物材料仍可置于塑料袋中并留有少许硅胶放在室温下的干燥器中几个月或长期储存在-80℃待用但注意要密封好