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一株鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌的种类鉴定

来源：花匠小妙招时间：2024-11-20 12:19

一株鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌的种类鉴定

【摘要】：鸡蛋花锈病是鸡蛋花的重要病害,其病原菌为鸡蛋花鞘锈菌(Coleosporium plumeriae),感染锈病的鸡蛋花叶片背面出现黄色隆起的粉状夏孢子堆,叶片正面有淡黄色小斑点,影响其观赏价值,严重时叶片提前脱落。2020年在广西南宁市上林县的一个自2003年以来从未施用化学药剂的茶园——万古茶园,发现鸡蛋花锈病叶片背面的夏孢子堆被白色的霉状物覆盖,在光学显微镜下镜检发现,这些霉状物为具分隔的菌丝体和大量椭圆形或近球形、单胞无色的分生孢子,被菌丝体覆盖的鸡蛋花鞘锈菌夏孢子堆中,可见有菌丝体自夏孢子中长出,夏孢子由黄色变为透明、其边缘由完整变为破碎。在扫描电子显微镜下,被霉状物覆盖的夏孢子皱缩变瘪,而正常夏孢子饱满。可见,覆盖在鸡蛋花鞘锈菌上的白色霉状物为该锈菌的重寄生真菌。挑取少量鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌的菌丝体置于PDA培养基上,在28℃培养7 d,可见菌落白色,直径28～40 mm,菌落正面稍凸起、有皱褶,气生菌丝质地紧密,菌落背面黄色;分生孢子梗菌丝状单生,分生孢子呈头状聚生在分生孢子梗顶端,分生孢子呈椭圆形或近球形,单胞无色,大小(0.5～1.0)μm×(0.9～1.2)μm。提取鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌代表菌株单孢分离菌株PR-CPH1的总DNA,用真菌通用引物ITS1/iTS4、SSU基因的NS1/NS4引物和LSU基因的NL1/NL4引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行测序和序列分析。在NCBI的GenBank数据库中进行BLAST比较,结果发现菌株PR-CPH1的ITS序列(MW505984)、SSU序列(MW505988)和LSU序列(MW505987)与Simplicillium subtropicum的相应片段序列(ITS-AB603990、SSU-LC496895和LSU-LC496880)的同源性分别为99.00%、98.11%和98.11%。下载GenBank上发布的Simplicillium属主要真菌种类的iTS、SSU和LSU序列,三个片段联合(ITS-SSU-LSU)后,利用MEGA 6.0软件中的邻接法(Neighbor-joining method,N-J法)构建系统发育树,发现菌株PR-CPH1与Simplicillium subtropicum(strain JCM18180)的三个片段(AB603990-LC496895-LC496880)联合序列的遗传距离最近。根据Kenichi等(2013)对Simplicillium subtropicum的形态特征描述及ITS、SSU和LSU联合序列的系统发育分析,鉴定菌株PR-CPH1为Simplicillium subtropicum。Simplicillium subtropicum的分类地位为子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、虫草菌科(C ordycipitaceae)、单梗霉属(Simplicillium)。有关Simplicillium subtropicum的研究,仅见Anoumedem等(2020)报道,从番荔枝科(Annonaceae)的一种植物(Duguetiastaudtii)中分离得到内生真菌Simplicillium subtropicum,从中提取得到的两种化合物Simplicilones A和B对宫颈癌细胞株KB3.1有轻微毒理作用。未见Simplicillium subtropicum是植物病原菌重寄生真菌的报道,也未见鸡蛋花鞘锈菌重寄生现象的报道。本研究发现的鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌(Simplicillium subtropicum)为首次报道。

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1 黄奕蔓;白津铭;朱文倩;李峰;黄桂香;廖咏梅;一株鸡蛋花鞘锈菌重寄生真菌的种类鉴定[A];植物病理科技创新与绿色防控——中国植物病理学会2021年学术年会论文集[C];2021年 2 赵敏;陈壁锋;谭剑斌;周轶琳;陈瑞仪;王凤岩;胡帅尔;黄建康;鸡蛋花提取液对大鼠致畸作用的研究[A];第四届第二次中国毒理学会食品毒理学专业委员会与营养食品所毒理室联合召开学术会议论文集[C];2008年