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高二生物植物的组织培养技术

来源:花匠小妙招 时间:2024-11-20 11:04

1、植物组织培养技术 组织培养概述 1.组织培养定义 组织培养是指 用无菌方法使 植物体的离体 器官、组织和 细胞在人为提 供的条件下生 长和发育的所 有培养技术的 总称,也称之 为离体培养。 2.组织培养的发展 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术。 它的发展经历了四个发展阶段: (一)萌芽阶段(从20世纪初到30年代中): 1902年德国植物生理学家Haberlandt提出细胞全能 性概念,并首次进行离体细胞培养,但没有成功。 1904年,Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的 胚。1922年,Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗 。 (二)奠基阶段(从20世 纪30年代末到50年代中): 1934年,White 用番茄 根尖建立起第一个活跃生长 的无性繁殖系,从而使非胚 器官的培养首先获得成功。 1939年,Gautherete培 养胡萝卜根小外植体成功。 1943年,White提出了 植物细胞“全能性”学说,标志 组织培养成为一门新兴学科 。 1952-1953年:美国科学家Steward F.C. 用胡萝卜根的细胞悬浮培养,发现 单个细胞能象受精卵发育成胚一样的

2、途 径,发育成完整植抹。证实了植物细胞“ 全能性”学说。 (三)快速发展和应用阶段(从20世纪50年代末到现在) 1960年以来组织培养理论、 实践、技术和方法不断完善和发展 ,并广泛应用于生物学的许多分支 学科。 1960年,Cocking酶解法分离 原生质体获得成功,使植物细胞可 以象动物细胞一样进行细胞融合。 1960年,Morel等人 通过对兰花茎尖进行 培养,获得了快速繁 殖的脱毒兰花,随后 在国内外进行了“兰 花试管苗产业化”。 1964年,印度学者Guha和 Maheshwari成功地培养曼陀罗 花药获得单倍体再生植株,从而 促进了植物花药培养单倍体育种 技术的发展。 3.植物组织培养的基础理论 植物细胞的全能性 定义:植物细胞具有该植物体全部遗传的可能 性,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜 在能力。 原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体 所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每 一个活细胞都应该具有全能性。 差异:(1) 受精卵的全能性最高; (2) 受精卵分化后的细胞中,体细胞 的全能性比生殖细胞的低。 植物全能性 的

3、表达 离体的植物器官 、组织、细胞 游离单细胞 或原生质体 胚状体 根、芽 愈伤组织 人工种子 再生植株 脱 分 化 培养条件: 基本培养基 和适宜的植 物生长调节 物质,适宜 的温度、空 气、无菌环 境、适合的 PH、适时光 照等。 脱分化:将分化组织的已停止分裂的细胞从植 物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的 分裂活性。 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养 条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。 4.植物组织培养分类 愈伤组织培养 细 胞 培 养 器 官 培 养 原生质体培养 最为常见的组织培养 悬浮细胞培养 单细胞培养 胚、胚乳、珠心、子房、根、茎 、叶、花和幼果的部分组织的培 养 按材料的类别分 愈伤组织培养 将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节 剂的存在,而其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过 再分化形成再生植株。它是最为常见的。 器官培养: 将植物的器官如 胚、胚乳、珠心 、子房、根、茎 、叶、花和幼果 的部分组织接种 在无菌培养基上 进行培养。 细胞和原生质体 培养: 细胞培养是将植 物的单个细胞分离出 来,并进行培养,而 原生质体培养是指将 植物细胞

4、的细胞壁通 过机械、物理或化学 的方法去除,然后再 进行培养。 原球茎-主要是兰科植物在诱导时,分化出的原初植物形态,具 有完整植株的器官雏形,成苗容易。 胚状体-由愈伤组织或表面形成的许多类似胚的突起,是初步 分化的幼小生命体,芽根有共同的维管束,是双极性结构,起源 于单细胞,无嵌合现象,结构完整,可直接形成小植株,成苗率 高,去分化难,再分化也很难。 胚状体与不定芽的区别 胚状体在组织学上具备以下和不定芽不同 的三个特征: 最根本的特征是具有两极性。 胚状体的维管组织与外植体的维管组织 无解剖结构上的联系,而不定芽或不定根 往往总是与愈伤组织的维管组织相联系。 胚状体的维管组织的分布是独立的“v”字 形,而不定芽的维管组织无此现象。 按培养方法分为 固体培养 液体培养 看护培养 微室培养 初代培养继代培养 按培养过程分为 初代培养 继代培养 5.植物组织培养应用 快速繁殖: 运用组织培养的途径,一个单株一年可以繁殖 几万到几百万个植株,而且均来自一单一的个体, 遗传性状一致。例如一株葡萄一年繁殖到3万多株 ,一株兰花一年繁殖到400万株。 种苗脱毒:由于 病毒的感染严重影响作 物的产量和品质,而利 用组织培养技术可以有 效地除去植物体内的病 毒,得到大量的无病毒 种苗。主要的方法是培 养植物茎尖分生组织, 也可以采用热处理或加 入化学试剂的方法达到 脱毒的效果。已经取得 成功的有马铃薯、草莓 、香蕉、葡萄等等。 远缘杂交: 利用组织培养 可以使难度很 大的远缘杂交 取得成功,从 而育成一些罕 见的新物种。 potatopotato tomatotomato pomatopomato 泡马豆泡马豆 突变育种:采用组织培养可以直接诱变和筛选出 具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种 基因工程:基因工程主要研究DNA的转导,而基 因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生 生物制品:有些极其昂贵的生物制品,可以用大 规模培养植物细胞来直接生产 种质保存:繁殖量大,省空间,保存时间长

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