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植物检疫学植物检疫性细菌病害参考.ppt

来源：花匠小妙招时间：2024-11-18 05:43

植物检疫学植物检疫性细菌病害参考

第六章检疫性细菌病害植物病原细菌检疫检验技术直接检测：直观检验和生长检验间接检测活菌检测免疫吸附分离法噬菌体检验非活菌检测血清学检测 1、活菌检测分离培养法：营养培养基、选择培养基或鉴别培养基分离纯化得到的细菌浓缩接种及离体叶检测：提取液浓缩接种感病植物，观测发病情况。例如：浙江大学等在1％灭菌水琼脂中加75×10－6的苯并咪唑，做平板，加感病植物叶片，针刺＋摩擦接种，培养（光、温、湿度），短期获得症状。主要应用于水稻细菌性条斑病菌和小麦细菌性黑颖病菌的检测。 2.免疫吸附分离法原理：接合血清学与平板分离技术，利用与抗原高度亲和性的抗体，来捕获目标细菌，样本中其他细菌均被冲洗掉，再将目标细菌转移或释放到培养基上生长。方法：平皿免疫吸附评价测定法和免疫吸附稀释培养法平皿免疫吸附评价测定法简略流程如下： 3.噬菌体检验原理：噬菌体侵染细菌，裂解寄主细胞，在液体培养时，会使浑浊的细菌悬浮液变清，在固体平板上培养，则出现许多边缘整齐、透明光亮的噬菌斑。噬菌体具有专化性，利用此特点，可鉴别细菌的种类。 4.非活菌检测非活菌检测的方法很多，下表是检测病原细菌常用的一些方法，前9种血清学方法，均属非活菌检测。它们既能用于病原鉴定，又能直接用于病种或病株，甚至是无症感染组织的检测。 5.血清学检验原理：方法：酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫荧光抗体法免疫荧光抗体法：将荧光染料（异硫氢酸荧光黄或罗丹明）与抗体以化学方法接合，再与抗体反应，形成有荧光标记的抗体—抗原复合物，在荧光显微镜下，可观察到黄绿色荧光。梨火疫病Fire blight of pear 分布：梨火疫病的地理分布寄主：梨火疫病菌寄主范围很广，能为害梨、苹果、山楂、木旬子、李等４０多个属220多种植物，大部分属蔷薇科Pomoideae亚科。危害性：仁果类果树的一种毁灭性病害。一棵多年生的梨和苹果树发病后可在几星期内死亡症状：侵害花、果实、枝条和叶片。花:侵染后变深褐色，枯萎。叶片:从叶缘沿叶脉扩展，先呈水浸状，后黑褐色。嫩稍:先水浸状，后褐色至黑色，向下弯曲，呈鱼钩状。果实：病部褐色凹陷，扩展到全果，潮湿时病部生粘稠的细菌溢，初乳白色，后红褐色。病枝:叶片凋萎，幼果僵化，但病叶病果不脱落，远望似火烧状，故称火疫病。伤口：初期水浸状，后下陷，呈溃疡斑，病健交界处产生龟裂纹，韧皮部红褐色，有黏液状菌脓。严重时，病害从嫩稍很快扩展到枝条、主干，直至根部，全株死亡。主要鉴定特征：梨火疫病最典型的症状是花、果实和叶片受火疫病菌侵害后，很快变黑褐色枯萎，犹如火烧一般，但仍挂在树上不落，故此得名。目前国际上将其症状据受侵害的部位，分成５个阶段。（2）溃疡枯萎：是指前一季越冬溃疡边缘的病菌重新复活的结果。初症是在复活的溃疡附近的健康树皮组织上出现窄的水渍状区，几天后，树皮内部组织出现褐色条斑，随后病菌侵入附近繁殖枝内部并引起萎蔫死亡。这些枝条特别是嫩枝与下面谈及的枝枯萎有明显区别，即在萎蔫之前枝尖芽褪色（黄至桔黄色）。（4）病菌亦可直接从气孔、水孔等自然孔口或蕾苞，或由风引起的伤口侵入叶片，初叶边坏死，并向中脉、中柄、茎扩展，后变黑，通常有菌脓。（5）损伤枯萎和砧木枯萎：这二种比较特殊，前者主要是由于晚霜、冰雹或大风损伤引起，如果实很容易引起果实枯萎。后者仅限于高感品种EMAL-26、 EMLA-9和MARK-39砧木。通常是由感病的接穗在这些砧木上发病后引起，最终成溃疡带而杀死树体。病原菌：学名：Erwinia amylovora（Burrill）Winslow 异名： Micrococcus amylovorus Burril Bacillus amylovorus (Burrill) Trevisan Bacterium amylovorus (Burrill) Chester 分类地位：原核生物界(Procaryotes),薄壁菌门(Gracilicutes),肠杆菌科(Enterobacteriaceae)欧文氏菌属(Erwinia)解淀粉欧文氏菌形态特征：直杆菌，有荚膜，周生鞭毛，能运动，大小为0.9-1.8× 0.6-1.5μm，多数单生，有时成双或短时间内3-4个呈链状。革兰氏染色阴性。在蔗糖培养基上27℃下培养3d，菌落直径3～4mm，白色至奶油色，半球形隆起，有黏性，