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组培具体操作

来源：花匠小妙招时间：2024-11-12 11:36

植物组织培养具体操作二、植物组织培养过程以菊花叶片为外植体1、培养基的配制:MS培养基母液的配制MS培养基含有近30种营养成分为了避免每次都要对这几十种成分进行称量可将培养基中的各种成分按照比例配制成MS培养基干粉用时直接取用即可。每42gMS培养基加1L蒸馏水。MS培养基的配制取1000mL烧杯称取42gMS培养基干粉于不锈钢盆中加水至800ml。使用电磁炉加热使琼脂溶解按照要求加入浓度为0.5mg/ml的激素NAA0.2ml定容至1000ml用1mol/LNaOH和1mol/LHCl调节pH至6.0。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中拧上盖子整齐的放入到高压蒸汽灭菌锅的物料篮内121℃下灭菌20min。将培养皿用报纸包好一起放入灭菌锅进行灭菌。高压蒸汽灭菌锅的使用注意事项1、排气管通入到盛水的桶中避免蒸汽将人烫伤。2、放入灭菌物品后拧紧阀门打开开关进行灭菌。3、在压力表归零之前切勿试图开盖。2、接种仪器及器具仪器超净工作台光照培养箱接种器具杀菌器器具枪形镊剪刀器具架酒精灯培养皿酒精棉球3、外植体类型实验室做植物组织培养实验时采用的是无菌苗一般以菊花作为培养对象其中分为芽培和叶培。芽培将无菌苗的带有芽的嫩枝条插入生根培养基经过培养后直接生长并生根形成一个大的完整的植株。达到了扩大繁殖培养的目的。叶培使用的是诱导培养基先将叶片剪碎后接种到培养基上叶片组织经过脱分化会形成愈伤组织然后经过再分化形成不定芽转接到生根培养基上之后继续培养可生长成为一个完整的植株。此外还可以用植物其他的离体器官、组织以及细胞等作为外植体但就我们实验室的条件暂时使用叶和芽作为外植体进行培养。除无菌的菊花苗外还可以使用烟草、矮牵牛、小丽花以及百合等无菌苗进行扩大繁殖培养。它们的培养基添加激素的浓度不一样其他都相同。