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一种三七组织培养育苗方法

来源：花匠小妙招时间：2024-11-12 11:12

一种三七组织培养育苗方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中草药材栽培技术，具体涉及一种三七育苗的方法，尤其是三七的组织培养育苗方法，属于中药材繁殖栽培技术领域。
【背景技术】
[0002]三七，拉丁名为:Panaxnotoginseng (Burk.)F.H.Chen ex G.Y.WuetK.M.Feng,也称田七，为五加科多年生草本植物。以根、根状茎入药，生品能散瘀止血，消肿镇痛，治咯血、吐血、衄血、便血、子宫脱垂、胸腹刺痛、外伤出血、跌打肿痛；熟品能补血活血，治失血、贫血。花、叶也能作药用，花有清热、平肝、降压的作用。据现代临床新用，三七亦能治疗重症肝炎、高血脂病、冠心病、上消化道出血、颅脑外伤、眼前房出血，并有防癌抗癌作用。
[0003]三七是名贵中药材，也是我国传统常用中药材，除供国内药用外，还是我国大宗出口创汇产品之一，广泛应用于医药工业、日用化工、食品工业和美容化妆品工业，现全国年需要量约420万千克，还出口 180万千克，随着医药卫生事业的发展和人们生活水平的提高，三七的需要量还要增加，可大力发展三七种植。而开展三七人工种植，首先要解决三七育苗问题，现在人们种植三七主要用种子繁殖，用实生苗栽培，它的缺陷是遗传性状不稳定，成苗率低，移栽后的三七生长缓慢，易染病，产量不高。

【发明内容】

[0004]发明目的:本发明的目的是针对现有技术中三七栽培出现生长缓慢，易染病，产量不高的问题，提供一种组织培养育苗方法，提高三七育苗成苗率，而且能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，可大面积进行三七人工栽培。
[0005]技术方案:本发明所述的一种三七组织培养育苗方法，具体包括以下步骤:
1.采种:选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
[0006]2.无菌苗的培养:将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3?5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
[0007]3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，苄基嘌呤(BA)浓度为1.0?2.5mg/L，优选为
2.0mg/L，奈乙酸(NAA)浓度为0.1?0.3mg/L，优选为0.2mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和
0.7%的琼脂，培养基温度保持24°C?26 °C，PH值5.9?6.2。
[0008]4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成。
[0009]5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导50天后，平均高达3.5?4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天?30天后，每簇增殖至45?50个丛生芽。
[0010]6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根。
[0011]7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%?80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
[0012]有益效果:本发明与现有技术相比，其有益效果是:
本发明的三七育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达60%?85%，成苗达90%以上，可以满足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，移栽后2?3年可收获，比传统栽培时间缩短I年左右，每亩产田七干品650千克，在同等管理条件下比传统栽培产量提高30%。
【具体实施方式】
[0013]下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
[0014]实施例1:一种三七组织培养育苗，其具体步骤如下:
1.采种:选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养:将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养;
3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，苄基嘌呤(BA)浓度为1.0/L，奈乙酸(NAA)浓度为0.lmg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ;
4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为50% ;
5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导50天后，平均高达3.5?4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天?30天后，每簇增殖至45?50个丛生芽；
6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
[0015]实施例2:—种三七组织培养育苗，其具体步骤如下:
1.采种:选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养:将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗4次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养;
3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，苄基嘌呤(BA)浓度为2.0mg/L，奈乙酸(NAA)浓度为0.2mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ；
4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为85% ;
5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导50天后，平均高达3.5?4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天?30天后，每簇增殖至45?50个丛生芽；
6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有77%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
[0016]实施例3:—种三七组织培养育苗，其具体步骤如下:
1.采种:选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养:将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养;
3.诱导培养基:以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，苄基嘌呤(BA)浓度为2.5mg/L，奈乙酸(NAA)浓度为0.3mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ；
4.丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为67% ;
5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导50天后，平均高达3.5?4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天?30天后，每簇增殖至45?50个丛生芽；
6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽:将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
【主权项】
1.一种三七组织培养育苗方法，其特征在于包括以下步骤: (1)采种:选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种； (2)无菌苗的培养:将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒，后在超净工作台上用无菌水浸洗3?5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养; (3)诱导培养基:以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24°C?26°C，PH 值 5.9 ?6.2 ; (4)丛生芽诱导，当无菌苗长至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养丛生芽； (5)丛生芽继代增殖，丛生芽诱导后，平均高达3.5?4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基进行继代增殖； (6)诱导生根，当继代增殖的丛生芽有70%长至3?4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根； (7)试管苗的移栽，将发育良好，具有2?3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%?80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
2.根据权利要求1所述的三七组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤(2)三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒的时间为15分钟。
3.根据权利要求1所述的三七组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤(3)的植物激素苄基嘌呤(BA)浓度为1.0?2.5mg/L，奈乙酸(NAA)浓度为0.1?0.3mg/L。
【专利摘要】本发明公开一种三七组织培养育苗方法，属于中药材繁殖栽培技术领域，有效解决了三七育苗遗传性状不稳定，成苗率低，移栽后的三七生长缓慢，易染病，产量不高的问题，具体包括采种、培养无菌苗、诱导培养基、诱导丛生芽、丛生芽继代增殖、诱导生根、试管苗的移栽等具体步骤，其有益效果是：具有取材方便，丛生芽诱导率达60%～85%，成苗达90%以上，可以满足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，移栽后2～3年可收获，比传统栽培时间缩短1年左右，每亩产田七干品650千克，在同等管理条件下比传统栽培产量提高30%。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104813938
【申请号】CN201510243354
【发明人】黄振忠
【申请人】黄振忠
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年5月14日