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月光花组培苗的培育方法.pdf

来源：花匠小妙招时间：2024-11-12 11:07

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911115301.8 (22)申请日 2019.11.14 (71)申请人黄志君地址 530399 广西壮族自治区南宁市横县横州镇环城东路福满园小区620号 (72)发明人黄志君 (74)专利代理机构南宁市来来专利代理事务所 (普通合伙) 45118 代理人邓晓安 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称月光花组培苗的培育方法 (57)摘要本发明公开了一种月光花组培苗的培育方法，其关键步骤如下：（1）选择无病害、。

2、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片作为外植体；（2）叶片的消毒：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片，剪去叶片，经前处理脱毒；（3）将处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基；（4）将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养；（5）待扩繁的试管苗取出，转入生根培养；（6）炼苗；（7）移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。由该方法所制备得到的月光花成活率高，生产成本低，生长周期短，遗传稳定性好，利于大规模推广种植。权利要求书1页说明书4页 CN 。

3、110679487 A 2020.01.14 CN 110679487 A 1.一种月光花组培苗的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：外植体的建立：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片作为外植体；脱毒处理：步骤得到的外植体进行前处理脱毒，处理完毕后，晾干备用；初代培养：将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基，初代培养基成分为： 0.01-0.04mg/L萘乙酸+ 0.01-0.04mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+0.1-3.0mg/L的赤霉素+ 20-30g/L的蔗糖+6g/L琼脂粉+0.5g/L活性炭，所述的培养基的pH。

4、值为6.0；光照强度 2000Lux，培养温度232，培养时间222天；继代培养：将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养，培养基成分为： N6+IAA0.15mg/L+蔗糖25g/L；培养温度252，光照时间22h/d，培养基 pH5.8-6.0；每25天扩繁一次试管苗；生根培养：待步骤扩繁的试管苗取出，转入生根培养，生根培养基成分为：改良1/ 2DKW+IBA0.3-0.5mg/L+稀效唑0.3-0.5mg/L+AgNO35mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂10g/L， PH5.8，光照3000lx，温度235，培养至25 天。

5、，根长至3-5cm，苗长高3cm时出瓶；炼苗：选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土：椰糠配比为1:3 的营养基质中，保持空气湿度50-60%，光照8000lux；移栽：炼苗15天后移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。 2.根据权利要求1所述月光花组培苗的培育方法，其特征在于，所述步骤前处理脱毒的过程为：在连续放晴3天以上的气候采集枝条，剪去叶片，浸泡于5%洗衣服溶液中，同时用软毛刷轻轻擦洗表面污垢，流水冲洗30分钟，用75%乙醇处理30秒，无菌水清洗3次后，再用 0.1%HgCl2溶液浸泡15分钟，无菌水冲洗2-6次，每次2-6分钟。

6、。 3.根据权利要求1所述月光花组培苗的培育方法，其特征在于，步骤生根培养中改良 DKW为除氮盐外DKW培养基的1/2，且加入了活性炭，活性炭对试管苗生根具有一定的促进作用。 4.根据权利要求1所述月光花组培苗的培育方法，其特征在于，移栽前，将组培苗在定根水中浸泡1-2h。 5.根据权利要求4所述月光花组培苗的培育方法，其特征在于，所述定根水组成为： 3.5%甲霜灵+3.5%恶霉灵+0.08%吲哚丁酸+0.08%萘乙酸钠+0.6%聚丙烯酸钠+纯净水余量。权利要求书 1/1 页 2 CN 110679487 A 2 月光花组培苗的培育方法技术领域 0001 本发明涉及种。

7、植技术领域，具体为一种月光花组培苗的培育方法。背景技术 0002 月光花（学名： Calonyction aculeatum (L.) House）是旋花科，月光花属一年生草本植物，长可达10米，有乳汁，茎圆柱形绿色，叶片卵形，先端长锐尖或渐尖，基部心形，花大，夜间开，芳香，总状，有时序轴之字曲折；萼片卵形，绿色，有长芒，内萼片芒较短或无；花冠大，雪白色，极美丽，瓣中带淡绿色，花柱和雄蕊伸出花冠外；花丝圆柱形，花药大，基部箭形，淡黄色；花盘环状，蒴果卵形，果柄粗厚。种子大，无毛。 0003 原产地为热带美洲， 1979。

8、年以来广布于全热带。中国分布陕西、江苏、浙江、江西、广东、广西、四川、云南，通常栽培，也有野生的。 0004 月光花的白色花朵形似满月，大而美丽，且在夜间开放，故得名。月光花生长很迅速，因此可作为引人注目的篱垣布景。 0005 月光花可以说是不太容易养殖的植株，传统的月光花种植过程较为麻烦，生长速度较慢，不利于月光花的大面积种植。而且每次移栽完之后成活率都很低。而采用组培苗的形式进行快速繁殖的月光花，种植简单，存活率高，后期生长速度快。然而，目前的月光花组培技术有了一定的提高，但是在快速增殖技术上，仍然存在一定的缺陷，开发一种快速。

9、增殖培养月光花的方法，具有重要的意义，本案由此产生。发明内容 0006 本发明提供一种月光花组培苗的培育方法，由该方法所制备得到的月光花成活率高，生产成本低，生长周期短，遗传稳定性好，利于大规模推广种植。 0007 本发明具体的技术方案为：一种月光花组培苗的培育方法，包括以下步骤：外植体的建立：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片作为外植体；外植体处理：步骤得到的外植体进行前处理脱毒，处理完毕后，晾干备用；初代培养：将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基，初代培养基成分为： 0.01-0.04mg/L。

10、萘乙酸+ 0.01-0.04mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+0.1-3.0mg/L的赤霉素+ 20-30g/L的蔗糖+6g/L琼脂粉+0.5g/L活性炭，所述的培养基的pH值为6.0；光照强度 2000Lux，培养温度232，培养时间222天；继代培养：将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养，培养基成分为： N6+IAA0.15mg/L+蔗糖25g/L；培养温度252，光照时间22h/d，培养基 pH5.8-6.0；每25天扩繁一次试管苗；生根培养：待步骤扩繁的试管苗取出，转入生根培养，生根培养基成分为：改良1/ 2DKW+IBA0.3-0。

11、.5mg/L+稀效唑0.3-0.5mg/L+AgNO35mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂10g/L，说明书 1/4 页 3 CN 110679487 A 3 PH5.8，光照3000lx，温度235，培养至25 天，根长至3-5cm，苗长高3cm时出瓶；炼苗：选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土：椰糠配比为1:3 的营养基质中，保持空气湿度50-60%，光照8000lux；移栽：炼苗15天后移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。 0008 需要进一步说明的是，所述步骤前处理脱毒的过程为：在连续放晴3天以上的气候采集枝条，剪去叶片，浸泡于5。

12、%洗衣服溶液中，同时用软毛刷轻轻擦洗表面污垢，流水冲洗30分钟，用75%乙醇处理30秒，无菌水清洗3次后，再用0.1%HgCl2溶液浸泡15分钟，无菌水冲洗2-6次，每次2-6分钟。 0009 需要进一步说明的是，步骤生根培养中改良DKW为除氮盐外DKW培养基的1/2，且加入了活性炭，活性炭对试管苗生根具有一定的促进作用。 0010 需要进一步说明的是，移栽前，将组培苗在定根水中浸泡1-2h。 0011 需要进一步说明的是，所述定根水组成为： 3.5%甲霜灵+3.5%恶霉灵+0.08%吲哚丁酸+0.08%萘乙酸钠+0.6%聚丙烯酸钠+纯净水余量。 0012 本。

13、发明的突出的实质性特点和显著的进步是： 1、操作简单：在诱导培养基基础上，对培养基进行了优化，使丛生芽在短时间内大量繁殖； 2、采用本发明改良的月光花成活率为90%以上，周期短，污染小，生产成本低，利于大规模种植。具体实施方式 0013 下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，意识本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围作出更为清楚明确的界定。 0014 实施例1：一种月光花组培苗的培育方法，包括以下步骤：外植体的建立：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片作为外植体；外植体处理：步骤。

14、得到的外植体进行前处理脱毒，处理完毕后，晾干备用；初代培养：将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基，初代培养基成分为： 0.01mg/L萘乙酸+ 0.01mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+0.1mg/L的赤霉素+ 20g/L的蔗糖+ 6g/L琼脂粉+0.5g/L活性炭，所述的培养基的pH值为6.0；光照强度2000Lux，培养温度232 ，培养时间222天；继代培养：将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养，培养基成分为： N6+IAA0.15mg/L+蔗糖25g/L；培养温度252，光照时间22h/d，培养基 pH5.8-6.0；每。

15、25天扩繁一次试管苗；生根培养：待步骤扩繁的试管苗取出，转入生根培养，生根培养基成分为：改良1/ 2DKW+IBA0.3mg/L+稀效唑0.3mg/L+AgNO35mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂10g/L， PH5.8，光照 3000lx，温度235，培养至25 天，根长至3-5cm，苗长高3cm时出瓶；炼苗：选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土：椰糠配比为1:3 的营养基质中，保持空气湿度50-60%，光照8000lux；说明书 2/4 页 4 CN 110679487 A 4 移栽：炼苗15天后移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。。

16、0015 步骤前处理脱毒的过程为：在连续放晴3天以上的气候采集枝条，剪去叶片，浸泡于5%洗衣服溶液中，同时用软毛刷轻轻擦洗表面污垢，流水冲洗30分钟，用75%乙醇处理 30秒，无菌水清洗3次后，再用0.1%HgCl2溶液浸泡15分钟，无菌水冲洗2-6次，每次2-6分钟。 0016 步骤生根培养中改良DKW为除氮盐外DKW培养基的1/2，且加入了活性炭，活性炭对试管苗生根具有一定的促进作用。 0017 移栽前，将组培苗在定根水中浸泡1-2h。 0018 所述定根水组成为： 3.5%甲霜灵+3.5%恶霉灵+0.08%吲哚丁酸+0.08%萘乙酸钠+ 0.6%聚丙烯酸钠+。

17、纯净水余量。 0019 选择好的地块，深耕，施少量农家肥，施肥后使用甲基硫菌灵用沙土搅拌杀菌， 30 天后统计成活率达85%。 0020 实施例2：一种月光花组培苗的培育方法，包括以下步骤：外植体的建立：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花带叶柄的叶片作为外植体；外植体处理：步骤得到的外植体进行前处理脱毒，处理完毕后，晾干备用；初代培养：将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基，初代培养基成分为： 0.03mg/L萘乙酸+ 0.03mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+2mg/L的赤霉素+ 25g/L的蔗糖+6g/L 琼脂粉+0.5g/L。

18、活性炭，所述的培养基的pH值为6.0；光照强度2000Lux，培养温度232，培养时间222天；继代培养：将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养，培养基成分为： N6+IAA0.15mg/L+蔗糖25g/L；培养温度252，光照时间22h/d，培养基 pH5.8-6.0；每25天扩繁一次试管苗；生根培养：待步骤扩繁的试管苗取出，转入生根培养，生根培养基成分为：改良1/ 2DKW+IBA0.4mg/L+稀效唑0.4mg/L+AgNO35mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂10g/L， PH5.8，光照 3000lx，温度235，培。

19、养至25 天，根长至3-5cm，苗长高3cm时出瓶；炼苗：选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土：椰糠配比为1:3 的营养基质中，保持空气湿度50-60%，光照8000lux；移栽：炼苗15天后移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。 0021 步骤前处理脱毒的过程为：在连续放晴3天以上的气候采集枝条，剪去叶片，浸泡于5%洗衣服溶液中，同时用软毛刷轻轻擦洗表面污垢，流水冲洗30分钟，用75%乙醇处理 30秒，无菌水清洗3次后，再用0.1%HgCl2溶液浸泡15分钟，无菌水冲洗2-6次，每次2-6分钟。 0022 步骤生根培养中改良DKW为除氮盐。

20、外DKW培养基的1/2，且加入了活性炭，活性炭对试管苗生根具有一定的促进作用。 0023 移栽前，将组培苗在定根水中浸泡1-2h。 0024 定根水组成为： 3.5%甲霜灵+3.5%恶霉灵+0.08%吲哚丁酸+0.08%萘乙酸钠+0.6%聚丙烯酸钠+纯净水余量。 0025 选择好的地块，深耕，施少量农家肥，施肥后使用甲基硫菌灵用沙土搅拌杀菌， 30 天后统计成活率达90%。说明书 3/4 页 5 CN 110679487 A 5 0026 实施例3：一种月光花组培苗的培育方法，包括以下步骤：外植体的建立：选择无病害、无虫害、叶芽多且芽眼饱满的月光花植株，取月光花。

21、带叶柄的叶片作为外植体；外植体处理：步骤得到的外植体进行前处理脱毒，处理完毕后，晾干备用；初代培养：将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基，初代培养基成分为： 0.04mg/L萘乙酸+ 0.04mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+3.0mg/L的赤霉素+ 30g/L的蔗糖+ 6g/L琼脂粉+0.5g/L活性炭，所述的培养基的pH值为6.0；光照强度2000Lux，培养温度232 ，培养时间222天；继代培养：将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后，继续进行继代培养，培养基成分为： N6+IAA0.15mg/L+蔗糖25g/L；培养温度252，光照时间。

22、22h/d，培养基 pH5.8-6.0；每25天扩繁一次试管苗；生根培养：待步骤扩繁的试管苗取出，转入生根培养，生根培养基成分为：改良1/ 2DKW+IBA0.5mg/L+稀效唑0.5mg/L+AgNO35mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂10g/L， PH5.8，光照 3000lx，温度235，培养至25 天，根长至3-5cm，苗长高3cm时出瓶；炼苗：选择健壮、半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土：椰糠配比为1:3 的营养基质中，保持空气湿度50-60%，光照8000lux；移栽：炼苗15天后移到露天培养，建立月光花组培苗生产基地。 0027 需。

23、要进一步说明的是，所述步骤前处理脱毒的过程为：在连续放晴3天以上的气候采集枝条，剪去叶片，浸泡于5%洗衣服溶液中，同时用软毛刷轻轻擦洗表面污垢，流水冲洗30分钟，用75%乙醇处理30秒，无菌水清洗3次后，再用0.1%HgCl2溶液浸泡15分钟，无菌水冲洗2-6次，每次2-6分钟。 0028 需要进一步说明的是，步骤生根培养中改良DKW为除氮盐外DKW培养基的1/2，且加入了活性炭，活性炭对试管苗生根具有一定的促进作用。 0029 需要进一步说明的是，移栽前，将组培苗在定根水中浸泡1-2h。 0030 需要进一步说明的是，所述定根水组成为： 3.5%甲霜。

24、灵+3.5%恶霉灵+0.08%吲哚丁酸+0.08%萘乙酸钠+0.6%聚丙烯酸钠+纯净水余量。 0031 选择好的地块，深耕，施少量农家肥，施肥后使用甲基硫菌灵用沙土搅拌杀菌， 30 天后统计成活率达87%。 0032 最后应说明的是，实施例只是本发明最优的具体实施方式而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。说明书 4/4 页 6 CN 110679487 A 6 。